代代花中三种单体化合物的活性研究

论文摘要

代代(Citrus aurantium L. var. amara Engl)系芸香科(Rutaceae)柑橘属(Citrus)酸橙(Citrus aurantium L.)的变种之一。其含有同枳壳、枳实相似的化学成分及药理作用,其果具有消食、化痰和健胃疗效。代代花中含有丰富的挥发油,黄酮,柠檬苦素,甾体和噻吩类等。但是有关代代花化学成分和药理作用的研究报道很少,因此对代代花中提取出来的β谷甾醇(βS)、5羟基6,7,3’,4’四甲氧基黄酮(HTF)和Limonexic acid(LA)化学成分的活性进行研究,为其在更多领域应用提供一定的理论依据,有利于其资源的进一步开发利用。分别测定三种单体化合物的还原能力,清除自由基能力,抗卵黄脂蛋白脂质(LPO)氧化能力和抗PC12细胞损伤能力来研究其抗氧化能力,其中HTF和LA对双氧水刺激的PC12细胞损伤导致的细胞存活率和总的抗氧化酶(TSOD)活性下降和丙二醛(MDA)水平的升高有很好的抑制作用,特别是当浓度达到100 g/mL时HTF对SOD活性降低的抑制率可以达到65.1%,而LA对其的抑制率达到86.05%。为进一步的抗肿瘤抗癌和抗炎研究奠定了基础。研究了三种单体化合物的抗肿瘤细胞和癌细胞增殖凋亡活性,当浓度达到100 g/mL时HTF对B16细胞的抑制率可以达到73.0%,明显好于阳性对照五氟尿嘧啶(5 F)的抗肿瘤效果,LA对肿瘤细胞的作用仅次于5 F。β谷甾醇(βS)当浓度达到200 g/mL时对Hela细胞的增殖抑制率达到36.4%。在浓度为200 g/mL时HTF对肝癌细胞SMMC 7721增值抑制率达到88.2%,5 F、LA和βS分别为58.6%、50.3%和34.2%。HTF和LA能够明显的抑制CCl4所致HL 7702细胞损伤的谷草转氨酶(GOT)、MDA和脂肪脱氢酶(LDH)的增加,并且随着浓度的增加抑制效果明显增强,且随着浓度的增加抑制效果增强,其中HTF的作用效果好于Vc对细胞损伤模型的保护作用。对三种单体的抗炎、抗病毒和抗菌活性进行了研究,其中HTF和LA对脂多糖刺激的小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)炎症因子NO浓度的增加有明显的抑制作用,并且能够明显的抑制2.2.15细胞产生的HBsAg和HBeAg,而βS基本没有抗炎和抗病毒活性。另外,在抗菌实验研究中,三种单体化合物都没有明显的抗菌效果。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 代代花的研究概况
• 1.1.1 代代花简介
• 1.1.2 代代花的活性成分及药理作用
• 1.1.3 代代花中活性成分国内外研究现状
• 1.2 柑橘属中多甲氧基黄酮和柠檬苦素类化合物的活性研究概况
• 1.2.1 多甲氧基黄酮的活性研究概况
• 1.2.2 柑橘属中柠檬苦素类化合物的研究概况
• 1.3 β谷甾醇的活性研究现状
• 1.3.1 β谷甾醇简介
• 1.3.2 β谷甾醇的药理活性研究
• 1.4 本论文的立题背景和主要研究内容
• 1.4.1 立题背景
• 1.4.2 本论文的主要研究内容
• 第二章 抗氧化活性研究
• 2.1 还原能力
• 2.1.1 材料与设备
• 2.1.2 实验方法
• 2.1.3 实验结果与讨论
• 2.2 清除自由基能力
• 2.2.1 材料与设备
• 2.2.2 实验原理与步骤
• 2.2.3 实验结果与讨论
• 2.3 抗脂质过氧化能力
• 2.3.1 材料和设备
• 2.3.2 实验原理和方法
• 2.3.3 结果和讨论
• 2.4 抗双氧水刺激的PC12 细胞损伤能力
• 2.4.1 材料和设备
• 2.4.2 实验方法
• 2.4.3 实验结果和讨论
• 2.5 本章小结
• 第三章 抗癌抗肿瘤及对正常细胞损伤保护活性研究
• 3.1 抗肿瘤活性
• 3.1.1 实验材料和设备
• 3.1.2 实验方法
• 3.1.3 实验结果
• 3.2 抗癌活性
• 3.2.1 实验材料和设备
• 3.2.2 实验方法
• 3.2.3 实验结果
• 3.3 正常肝细胞损伤的保护作用
• 3.3.1 材料和设备
• 3.3.2 实验方法
• 3.3.3 实验结果
• 3.4 本章小结
• 第四章 抗病毒活性研究
• 4.1 实验材料和设备
• 4.1.1 材料和试剂
• 4.1.2 设备和仪器
• 4.2 实验原理
• 4.3 实验方法
• 4.4 实验结果
• 4.4.1 细胞破坏率
• 4.4.2 抗原抑制率
• 4.4.3 抗病毒效果
• 4.5 本章小结
• 第五章 抗炎活性研究
• 5.1 实验材料和设备
• 5.1.1 材料和试剂
• 5.1.2 设备和仪器
• 5.2 实验原理
• 5.3 实验方法
• 5.3.1 细胞培养
• 5.3.2 细胞毒性研究
• 5.3.3 样品的抗炎活性检测
• 5.4 实验结果讨论
• 5.4.1 细胞毒性
• 5.4.2 抗炎活性
• 5.5 本章小结
• 第六章 抗菌活性研究
• 6.1 实验材料和设备
• 6.1.1 材料和试剂
• 6.1.2 仪器和设备
• 6.2 实验方法
• 6.2.1 菌悬液制备
• 6.2.2 抗菌效果测定
• 6.3 实验结果及小结
• 6.4 本章小结
• 结论与展望
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间取得的研究成果
• 致谢
• 附表