体外受精对小鼠早期生长发育中印迹基因IGF2和H19mRNA表达的影响

论文摘要

【目的】本研究旨在探讨体外受精对小鼠早期生长发育中印迹基因IGF2和H19mRNA表达的影响,借此来研究体外受精是否对小鼠早期生长发育有影响。【方法】将已经获能的ICR小鼠精子用移液器吸入该品系卵母细胞中,使精子的浓度为（5～7）×105个/mL（每个液滴中总卵数为50枚左右）,放入37℃、5%CO2培养箱受精6h,将受精卵继续培养18～22 h,并将发育良好的2细胞胚胎移植至同期发情的假孕母鼠输卵管内;并设自然交配小鼠作为正常对照。以见阴栓视为受孕1d,体外受精组和自然交配对照组小鼠妊娠14d,取胚胎,称重,然后迅速用液氮将其冷冻;其余体外受精组和对照组已孕雌鼠,让其继续怀孕直至仔鼠出生,称取子代初生重,然后将新生仔鼠解剖,取其心、肝、脑,并将它们迅速用液氮冷冻。将已经用液氮冷冻过的14天胚胎和从仔鼠上采集的心、肝、脑样品按照RNeasyMini Kit的操作规程提取总RNA,测其浓度后将RNA反转录成DNA,用Real-timeRT-PCR检测IGF2和H19 mRNA在实验组和对照组胚胎和初生鼠中的表达。【结果】实验发现:体外受精组第14天胚胎IGF2/H19的mRNA的表达量分别是对照组的1.57倍和1.38倍,第14天胚胎重,体外受精组比对照组高16.5%,协方差检验差异极显著（P＜0.001）;体外受精组初生小鼠心脏IGF2/H19的mRNA的表达量分别是对照组的1.87倍和2.06倍;体外受精组初生小鼠肝脏IGF2/H19的mRNA的表达量分别是对照组的1.56倍和1.52倍;体外受精组初生小鼠脑IGF2/H19的mRNA的表达量分别是对照组的1.27倍和2.11倍;初生重,体外受精组比对照组高13.2%,协方差检验差异极显著（P＜0.001）。结果表明:体外受精技术改变了印迹基因IGF2和H19的表达,从而促进了小鼠的早期生长发育。【结论】通过本实验发现,体外受精提高了印迹基因IGF2和H19mRNA表达,并增加了14天胚胎及新生仔鼠的体重。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 符号说明
• 前言
• 第一部分:小鼠体外受精的研究
• 一、材料
• 二、方法
• 三、结果
• 四、讨论
• 第二部分:体外受精技术对胚胎印迹基因IGF2/H19表达水平的影响
• 一、材料
• 二、方法
• 三、结果
• 四、讨论
• 参考文献
• 文献综述
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 致谢