辣椒花药培养及再生植株技术研究

论文摘要

本文针对辣椒花药培养目前存在的问题,在前人研究的基础上,以12个辣椒品种为试材进行了辣椒花药培养,对培养中胚状体的诱导主要因素以及成苗技术进行了摸索,以期为辣椒花药培养技术在实践中的应用奠定一定的技术基础。研究内容及结果如下:1.通过对12种辣椒材料花蕾、花药外部形态和小孢子分裂时期的观察对比,找到了期间的对应关系,即:当花瓣微露、白绿色、萼瓣等长或瓣稍长、花药顶端紫色且紫色部分不超过花药的四分之三时,此时大多数花粉细胞处于单核靠边期至双核早期。这一判别标准在后期的实践中证明是行之有效的。2.对Nitch,NTH,MS 3类9个培养基的诱导情况进行比较,发现:基础培养基的种类对于辣椒花药培养中胚状体诱导是重要影响因子,在本试验中,MS培养基的诱导效果最好;基础培养基对于花药愈伤组织的诱导并不是十分重要的影响因素,植物生长调节剂浓度是愈伤组织诱导的影响因子。3.在植物生长调节剂对辣椒花药培养的影响方面,本研究比较了不同浓度的KT与2,4-D和KT与NAA两组培养基的诱导效果,结果显示,较低浓度的植物生长调节剂利于胚状体的诱导,较高浓度时利于愈伤组织的诱导;不同植物生长调节剂的组合和浓度下,胚状体诱导率差异很大（0.75%～19.03%）;不同基因型所适应的植物生长调节剂的种类和浓度差异很大,在KT 0.05mg/L + 2,4-D 0.005 mg/L组合下胚状体诱导率达到本试验的最高。4.在基因型的影响方面,本研究所参试的12份材料在设计的8个培养基中,都获得了胚状体,但胚状体诱导率差异很大（0.75%～19.03%）。5.在活性碳的影响方面,本试验对添加0、0.05%、0.25%、0.5%活性炭的培养基胚状体诱导情况进行了比较,结果显示,活性炭可以有效控制花药褐化和愈伤程度,但花药在高浓度的活性炭（0.25%,0.5%）培养基中会出现死亡现象;0.05%的活性炭培养基可以有效地提高参试材料的胚状体发生,在活性炭浓度为0.5%的培养基花药胚状体诱导率显著下降。6.本研究对3个供试材料的胚状体形态进行了观察,发现并不是所有的胚状体都能生长成正常的植株,3个材料胚状体的成苗率在39.1～45.3%,都很低。进一步观察发现,胚状体在发育过程中会出现四种形态:成熟胚状体、无生长点胚状体、根毛状胚状体、停止发育的胚状体,在这四类胚状体中,只有成熟胚状体和无生长点胚状体可发育成正常植株,根毛状胚状体和停止发育的胚状体则无法成苗,这是造成胚状体成苗率较低的直接原因。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• 1 文献综述
• 1.1 辣椒花药培养研究概况
• 1.2 影响辣椒花药培养的因素
• 1.2.1 供试材料因素
• 1.2.2 培养基成分的影响
• 1.2.3 花药培养方法
• 2. 引言
• 3. 材料和方法
• 3.1 试验材料
• 3.2 主要实验仪器及试剂
• 3.3 实验内容及方法
• 3.3.1 供试材料的准备
• 3.3.2 花蕾分裂时期观察方法
• 3.3.3 培养基制作方法
• 3.3.4 花药接种与培养方法
• 3.3.5 试验内容和实验方案
• 4. 结果与分析
• 4.1 辣椒花蕾的外部形态特征与小孢子发育时期的对应关系
• 4.1.1 花蕾和花药外部形态与品种的关系
• 4.1.2 单核靠边期与双核早期的花蕾和花药外部形态特征
• 4.2 基础培养基对辣椒花药诱导的影响
• 4.2.1 淮椒3 号在9 个处理中胚状体和愈伤组织的诱导结果
• 4.2.2 淮椒3 号在9 个处理中胚状体诱导率的结果分析
• 4.2.3 淮椒3 号在9 个处理中愈伤组织诱导率的结果分析
• 4.3 植物生长调节剂对辣椒花药培养的影响
• 4.3.1 各培养基中不同材料胚状体的诱导结果
• 4.3.2 诱导结果的方差分析
• 4.4 基因型对辣椒胚状体诱导率的影响
• 4.5 活性炭对辣椒花药培养的影响
• 4.6 胚状体的形态与成苗率的关系
• 4.6.1 胚状体的形态分类
• 4.6.2 不同形态胚状体的成苗状况
• 4.6.3 胚状体的形态与成苗率的关系
• 4.7 花药培养植株倍性鉴定
• 5. 结论与讨论
• 5.1 关于辣椒花蕾的外部形态特征与小孢子发育时期的对应关系
• 5.2 关于基础培养基对辣椒花药诱导的影响
• 5.3 关于植物生长调节剂对辣椒花药培养胚状体诱导的影响
• 5.4 关于基因型对辣椒花药胚状体诱导的影响
• 5.5 关于活性炭对辣椒花药的培养
• 5.6 关于胚状体形态对成苗率的影响
• 参考文献
• ABSTRACT