东北黑土氮素固持的微生物调控研究

东北黑土氮素固持的微生物调控研究

论文摘要

东北地区一直是我国最重要的粮食生产基地之一。但是长期以来过度利用和施肥不合理,使得黑土退化严重,土壤质量发生了较大变化,氮素损失已成为制约其高产高效和持续发展的重要因素之一。因此,如何恢复黑土土壤质量成为当前土壤学研究中的一个热点,具有重要理论和现实意义。本论文以黑土为研究对象,采用实验室模拟手段,以土壤生物化学方法、分子生物学技术(PCR-DGGE)、微生物分子标记物技术(PLFA、土壤氨基糖法)等技术手段开展了黑土氮素微生物转化和固持过程特征等研究,获得了以下主要研究结果:1与施尿素、施尿素+葡萄糖相比较,施尿素+秸杆使土壤微生物氮含量显著增加且可保持长期稳定;施尿素+葡萄糖虽可迅速提升微生物量氮,但保持时间很短;而单独添加尿素对微生物氮的增加贡献较小。2施入尿素+秸杆可以提高多酚氧化酶、尿酶、β-葡糖苷酶的活性,但对转化酶影响缓慢;尿素+葡萄糖处理对上述四种酶活性刺激作用明显;单独独添加尿素对四种酶的活性有一定抑制作用。3脂肪酸组成变化分析结果显示添加尿素+秸杆可以短期内改善微生物群落多样性,革兰氏阴性菌数量增加明显,而且使这种多样性保持很长一段时间;尿素+葡萄糖虽然可以迅速提高土壤微生物量,但微生物多样性改善不大,它只能富集某几类特定微生物;单独添加尿素对微生物多样性改善最小。4施尿素、尿素+葡萄糖、尿素+秸杆三种处理都使土壤氨基糖积累,其中尿素+秸杆处理的土壤氨基糖总量增加40%,大于其它处理,这说明添加秸杆可使土壤微生物残留物大幅增加。真菌对土壤氨基糖的积累要大于细菌。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第一章 东北黑土退化的历史背景及现状
  • 1.1 东北黑土的分布和特性
  • 1.2 东北黑土的退化困境
  • 1.2.1 东北黑土退化的原因
  • 1.2.2 东北黑土退化的特征
  • 1.3 东北黑土区农业可持续发展对策
  • 1.3.1 做好黑土资源的综合防治
  • 1.3.2 增加有机能和优化无机能的投入
  • 1.3.3 坚持土地用途管制制度及完善配套法规
  • 1.3.4 发展生态农业,提高经济生产力
  • 第二章 东北黑土氮素转化的调控机理研究进展
  • 2.1 土壤氮素转化的一般过程
  • 2.2 土壤氮素转化研究的科学问题
  • 2.2.1 土壤氮素损失的主要困扰
  • 2.2.2 国内外缓释、控释肥料发展概况及存在问题
  • 2.2.3 土壤微生物在氮肥转化及提高氮肥利用率方面的作用
  • 2.2.4 在氮肥转化过程中土壤微生物群落的变化研究
  • 第三章 土壤微生物生态学研究进展
  • 3.1 传统土壤微生物生态学研究领域及方法评价
  • 3.1.1 传统微生物生态学主要研究内容和研究领域
  • 3.1.2 传统微生物生态学主要研究方法及评价
  • 3.2 最新土壤微生物生态学标记物评价方法
  • 3.2.1 磷脂脂肪酸分析方法(PLFA)
  • 3.2.2 氨基糖测定法
  • 3.3 分子生物学方法在微生物多样性研究中的应用
  • 3.3.1 总DNA 中G+C 丰度分析
  • 3.3.2 核酸杂交分析技术
  • 3.3.3 DNA 重组动力学分析
  • 3.3.4 遗传指纹图谱分析技术
  • 第四章 实验室条件下土壤氮素固持的模拟分析
  • 4.1 研究目的
  • 4.2 研究意义
  • 4.3 研究内容
  • 4.4 技术路线
  • 第五章 土壤微生物量及速效氮的研究
  • 5.1 前言
  • 5.2 材料与方法
  • 5.2.1 调查地概况
  • 5.2.2 供试土壤样品的采取和处理
  • 5.2.3 实验设计
  • 5.2.4 土壤样品养分含量分析
  • 5.2.5 土壤微生物量测定
  • 5.3 结果与分析
  • 5.3.1 供试土壤速效氮分析
  • 5.3.2 供试土壤微生物量分析
  • 5.4 讨论
  • 第六章 土壤酶活性研究
  • 6.1 前言
  • 6.2 材料与方法
  • 6.2.1 土壤样品
  • 6.2.2 土壤酶的测定
  • 6.3 结果与分析
  • 6.3.1 不同处理对土壤多酚氧化酶的影响
  • 6.3.2 不同处理对土壤脲酶的影响
  • 6.3.3 不同处理对土壤转化酶的影响
  • 6.3.4 不同处理对土壤Β-葡糖苷酶的影响
  • 6.4 讨论
  • 第七章 PCR-DGGE 分析土壤微生物群落结构的变化
  • 7.1 前言
  • 7.2 材料与方法
  • 7.2.1 土壤样品
  • 7.2.2 细菌多样性分析方法
  • 7.2.3 土壤基因组DNA 直接提取与纯化
  • 7.2.4 PCR 扩增细菌16S RDNA
  • 7.2.5 PCR 产物的DGGE 分离及DGGE 图谱分析
  • 7.3 结果与分析
  • 7.4 讨论
  • 第八章 PLFA 分析土壤微生物群落结构变化
  • 8.1 前言
  • 8.2 材料和方法
  • 8.2.1 主要试剂
  • 8.2.2 仪器
  • 8.2.3 PLFA 提取及其测定方法
  • 8.2.4 计算方法
  • 8.3 结果与分析
  • 8.4 讨论
  • 第九章 土壤氨基糖的变化对微生物多样性的指示作用
  • 9.1 前言
  • 9.2 材料和方法
  • 9.2.1 主要试剂
  • 9.2.2 分析仪器
  • 9.2.3 土壤氨基糖提取及测定方法
  • 9.2.4 计算方法
  • 9.3 结果与分析
  • 9.4 讨论
  • 第十章 结论与展望
  • 10.1 结论
  • 10.2 展望
  • 参考文献
  • 致谢
  • 作者简介
  • 相关论文文献

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