论文摘要
在海洋特殊的生态环境中,许多低等无脊椎动物,如柳珊瑚,软珊瑚等,通过拒捕食、抗生物附着、鱼毒等生态学作用形成自身的化学防御体系。因此,以化学生态学作用为指导,寻找海洋中具有抗生物污损活性的化合物,对生物防污剂的筛选发现具有现实意义。本研究从中国热带海洋珊瑚礁中选择一种柳珊瑚,运用天然产物化学的方法,以抗藤壶污损等活性为指导,从柳珊瑚次级代谢产物中筛选发现抗污损活性化合物,为海洋防污剂的研究和开发提供基础资料。选择采自中国涠洲岛海域的柳珊瑚Dichotella gemmacea (Valenciennes),在抗藤壶幼虫附着活性模型指导下,运用色谱分离技术(硅胶、凝胶、反相硅胶等柱层析和半制备HPLC等)和现代波谱分析技术(NMR, MS, IR, UV等),追踪分离具有抗污损活性的次级代谢产物。已分离鉴定15个化合物,包括brianane型二萜化合物7个,分别为juncin D (1), juncin P (2), juncin R (3), juncin S (4), gemmacolide C (5), junceellolide D (6), junceellin (7);甾体类化合物5个,分别为胆甾醇(8), ergosterol peroxide (9), cerevisterol (10), junceelloside C (11), junceelloside D (12);甘油醚类化合物2个,分别为正十六酸甘油酯(13), (R)-1-O-nonadecyl-3-O-hexadecanoyl glycerol (14);苯衍生物1个,即邻苯二甲酸二丁酯(15)。其中化合物1, 3, 4, 5, 7, 9, 10, 11, 12为首次从该柳珊瑚中分离获得。采用抗藤壶活性模型,结合卤虫致死活性模型和斑马鱼毒性模型,对化合物进行了化学防御活性筛选和评价。发现,brianane型二萜化合物1, 2和6在10μg/mL时对藤壶Balanus amphitrite幼虫附着的抑制率为100%,其中,化合2和6具有强抗藤壶附着活性,抑制藤壶幼虫附着的EC50值分别为0.77μg/mL和0.80μg/mL。同时,化合物2还显示卤虫Artemia salina致死活性(50μg/mL抑制率为85%);化合物6对斑马鱼Danio rerio胚胎发育还显示了较强的毒性,致死LC50为51.4μg/mL,致畸EC50为41.6μg/mL,致卵凝结EC50为56.5μg/mL。高度氧化的甾体化合物9和甾体皂苷化合物11对藤壶幼虫的附着具有中等强度的抑制活性。本研究从海洋化学生态学的研究方式入手,以抗藤壶污损等活性为指导,从柳珊瑚次级代谢产物中筛选发现抗污损活性化合物,探讨次级代谢产物的化学生态效应,为寻找高效、天然海洋防污剂提供了基础资料。