论文题目: 人源肝癌单链抗体的筛选与鉴定
论文类型: 博士论文
论文专业: 外科学
作者: 薛国柱
导师: 窦科峰
关键词: 单链抗体,抗体库,筛选,肝癌,细胞内重组,内化
文献来源: 第四军医大学
发表年度: 2005
论文摘要: 利用细胞融合技术成功制备的杂交瘤单克隆抗体(mAb)在疾病的预防和诊治等方面显示出了重要作用,但在体内的应用则有诸多限制。抗体库技术为制备高亲和性的抗体提供了有力工具。该技术无需免疫即可制备全人源性抗体,可有效避免鼠源性抗体在人体应用时诱发HAMA产生不良反应。对于无法提纯或抗原性质不确定的肿瘤抗原,必须采用新的筛选系统。抗体与抗原结合后可以经细胞内化的方式将抗原与抗体的复合物吞入细胞内。内化筛选方法可筛选到对于肿瘤导向治疗具有重要作用的内化抗体。目的: 对菌落PCR方法进行研究,探讨在抗体库筛选中的应用价值。筛选出的抗体需要用ELISA方法检测其与抗原的结合能力,对ELISA反应的抗体浓度和作用条件等进行优化,建立稳定的细胞ELISA方法。噬菌体抗体库筛选过程中洗涤液、洗脱液、封闭液、筛选体积以及细胞状态等均对筛选结果产生影响,对筛选条件进行优化,以避免特异性抗体的丢失,同时尽可能减少非特异性抗体。构建大容量的次级噬菌体抗体库,采用细胞内化的方法,筛选可以内化进入肝癌细胞的特异性噬菌体抗体。对筛选出的抗体进行序列分析,进一步对筛选出的抗体进行特异性和抗原定位研究。
论文目录:
缩略语表
中文摘要
英文摘要
前言
文献回顾
正文
1 第一部分 菌落聚合酶链反应在抗体库筛选中的应用．
2 第二部分 全细胞ELISA检测肝癌单链抗体选
3 第三部分 肝癌单链抗体库筛选条件的优化及肝癌抗体库的初步筛选
4 第四部分 细胞内重组技术筛选肝癌特异性噬菌体单链抗体
5 第五部分 肝癌噬菌体单链抗体的序列分析及特异性鉴定
小结
参考文献
附录
个人简历和研究成果
致谢
发布时间: 2005-07-19
参考文献
- [1].人源性肝癌单链抗体库的构建[D]. 赵爱志.第四军医大学2002
- [2].1、NEDD9在肝癌侵袭转移中的作用研究 2、肝癌单链抗体的可溶性表达及活性鉴定[D]. 马龙洋.第四军医大学2009
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