中心体相关激酶Nek2与乳腺癌前病变及早期癌变的相关性研究

论文摘要

目的：为了探讨中心体相关蛋白激NNek2蛋白及DNA水平在正常乳腺上皮、癌前病变、导管内癌和浸润性导管癌中的表达及扩增情况，从分子水平分析分析Nek2在乳腺上皮恶变过程中各阶段的作用，并综合本课题组前期对中心体研究的成果，讨论Nek2通过调节中心体来影响乳腺上皮增生癌变这一过程，为进一步探索乳腺癌早期诊断标志物及预后检测指标并研究癌前病变、早期癌变的基因治疗提供理论依据。方法：选取正常乳腺组织20例，重度不典型导管上皮增生／外周型乳头状瘤病伴导管上皮不典型增生20例、导管内癌20例，浸润性导管癌20例。采用免疫组织化学的方法分别检测四组样本组织冰冻切片Nek2蛋白的表达情况，采用荧光实时定量聚合酶链式反应检测四组样本组织Nek2拷贝数扩增情况，分析细胞中Nek2在乳腺癌前病变和早期癌变组织中蛋白表达和基因扩增的相关性。并结合本课题组前期的研究结果分析Nek2同中心体的相关性。结果：1．免疫组织化学结果显示Nek2蛋白阳性细胞定位在胞浆，胞浆中可见棕黄色颗粒着色。Nek2蛋白表达在四组样本之间差异性显著(x~2=25.030，P=0.000)，浸润性导管癌组明显高于正常乳腺组(P=0.000)和癌前病变组(P=0.033)，导管内癌组高于正常乳腺组(P=0.000)和癌前病变组(P=0.002)，癌前病变组高于正常乳腺组(P=0.033)，导管内癌组和浸润性导管癌组均没有显著性差异(P=0.738)。2．荧光实时定量PCR结果显示Nek2的DNA拷贝数在各组之间的表达有统计学差异(F=28.735，p=0.000)，正常乳腺组、癌前病变组、导管内癌组和浸润性导管癌组DNA拷贝数对数进行组间比较，浸润性导管癌中Nek2的DNA水平明显高于正常乳腺组(P=0.000)和癌前病变组(P=0.027)，导管内癌组高于正常乳腺组(P=0.000)和癌前病变组(P=0.000)，癌前病变组明显高于正常乳腺组(P=0.000)，导管内癌组与浸润性导管癌组无显著性差异(P=0.405)。3．Nek2蛋白表达随着肿瘤恶性程度的提高而增加，同时DNA拷贝数随着肿瘤恶性程度的提高而扩增，二者存在正相关性(r=0.887，P＜0.01)。结论：1．Nek2蛋白表达在导管内癌组显著高于癌前病变组，说明Nek2蛋白表达免疫组化检测结果可作为乳腺癌早期诊断和高危人群筛选的辅助指标。2．Nek2基因扩增同蛋白表达呈正相关性，变化趋势一致，提示蛋白过表达可能来自于基因扩增。3．Nek2异常同中心体异常变化趋势一致，作为中心体相关激酶，通过对中心体的调节的作用，可造成中心体数量、结构和功能的异常，从而导致肿瘤的发生。

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 1.前言
• 2.材料与方法
• 3.结果
• 4.讨论
• 5 问题与展望
• 6.结论
• 致谢
• 参考文献
• 论文发表及科研情况
• 附:综述《Nek家族对中心体的调节作用及其与肿瘤发生的关系》