人胎脑神经干细胞的分离培养、分化及鉴定研究

人胎脑神经干细胞的分离培养、分化及鉴定研究

论文摘要

目的:探讨人胚胎脑神经干细胞的体外分离培养条件情况,观察其增殖和分化特点。 方法:用胰蛋白酶消化法从人胚脑中分离出单个细胞后,采用无血清培养技术及单细胞克隆技术,协同应用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)和B27从8—16周龄人胚胎脑海马、大脑皮层分离出神经干细胞进行培养,用5%胎牛血清将其诱导分化,利用免疫荧光细胞化学化学技术对培养的神经干细胞及分化细胞进行鉴定。 结果:培养得到较大量悬浮生长具有连续增殖能力的神经干细胞,能够传代培养,表达神经干细胞的标志物Nestin;经血清诱导分化后分化为神经元和胶质细胞,表达特异性抗原NF200和GFAP。 结论:在体外培养条件下可以从人胚胎脑海马、皮层分离培养得到具有神经干细胞基本特征的细胞群,可能为临床应用提供材料,进一步用于缺血性脑损伤,为脑血管病的治疗开辟新的天地。

论文目录

  • 前言
  • 材料与方法
  • 一 组织及来源
  • 二 主要药品及来源
  • 三 主要仪器
  • 四 主要溶液配制
  • 五 试验方法与步骤
  • 结果
  • 一 细胞形态学观察
  • 二 克隆细胞的传代培养
  • 三 单细胞克隆
  • 四 诱导分化
  • 五 细胞标志物的鉴定
  • 讨论
  • 一 神经干细胞的分离培养
  • 二 神经干细胞的鉴定
  • 三 神经干细胞的增殖和诱导分化机制
  • 结论
  • 附图
  • 参考文献
  • 文献综述
  • 致谢
  • 学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明
  • 相关论文文献

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