连翘炮制和连翘酯苷A的分离纯化工艺研究

论文摘要

连翘(Fructus forsythiae)为木犀科连翘属植物连翘(?)(Forsythia Suspensa (Thunb.) Vahl)的干燥果实,为常用中药。目前,连翘一直没有明确的炮制方法,以致连翘饮片的质量参差不齐,影响了中成药的质量。因此研究连翘的炮制方法具有重要意义。连翘酯苷A是连翘的主要化学成分之一,且具有多种生理活性作用,因此,研究高纯度连翘酯苷A的分离纯化工艺对拓展连翘酯苷A的用途具有重要的现实意义。本研究运用现代科技手段,对青翘和连翘叶的炮制方法和机理、连翘酯苷A的分离纯化工艺,高纯度连翘酯苷A的质量标准做了初步研究。1.连翘酯苷A对照品的制备：采用制备型HPLC分离得到高纯度连翘酯苷A对照品,纯度可达到98%以上,采用UV、IR、NMR进行结构鉴定,证明为连翘酯苷A。2.连翘及连翘叶的炮制方法研究：分别采用清蒸法和水煮法对连翘和连翘叶进行了炮制研究,并用HPLC检测炮制品中连翘酯苷A含量变化。结果表明炮制品中连翘酯苷A含量提高,并且稳定性提高。采用清蒸法炮制连翘10 min为最佳,采用水煮法炮制连翘叶6 min为宜,采用清蒸法炮制连翘叶10 min为宜,并且研究中发现连翘在炮制过程中化学成分指纹图谱有较大变化。3.连翘炮制机理初步研究：采用紫外分光光度计和HPLC法观察连翘粗酶液对连翘酯苷A的作用,分析确定连翘植物酶对连翘酯苷A有降解作用,结果表明连翘炮制的目的主要在于破坏植物酶的活性。4.连翘酯苷A的分离纯化研究：首先采用聚酰胺吸附树脂初步分离纯化,用静态吸附试验考察上样浓度,用动态吸附试验考察了最大上样量,最后利用正交试验设计优化纯化工艺参数,确定优化工艺为：径高比(R：H)=1：11,上样量11.9 mg/100mL,上样液浓度3.3 mg/mL。初步纯化后连翘酯苷A纯度在60%以上。采用柱材料2对粗样品进行精制,用25%乙醇洗脱得到连翘酯苷A含量为90%以上的产物。5.连翘酯苷质量标准的初步研究：遵照中国药典2010版,对原料药中水分、重金属、砷盐等进行检查,各项指标都符合要求。采用反相高效液相色谱法建立了连翘酯苷A的含量测定方法；考察了样品在高温和高湿条件下的稳定性。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 连翘的考证
• 1.2 连翘的化学成分
• 1.2.1 苯乙醇苷类
• 1.2.2 木脂素及其苷类
• 1.2.3 萜类成分
• 1.2.4 黄酮类和微量元素
• 1.2.5 其他成分
• 1.3 连翘的药理作用
• 1.3.1 抗菌作用
• 1.3.2 抗病毒作用
• 1.3.3 抗肝损伤作用
• 1.3.4 抑制弹性蛋白酶活力的作用
• 1.3.5 抑制cAMP磷酸二酯酶的作用
• 1.3.6 解热作用和镇吐作用
• 1.3.7 抗内毒素作用
• 1.3.8 抗氧化作用
• 1.3.9 镇痛和利尿作用
• 1.3.10 对心血管系统的影响
• 1.3.11 抑制肿瘤细胞转移和血管源生成作用
• 1.3.12 抑制PAF活性
• 1.3.13 治疗过敏性紫癜
• 1.3.14 降血脂作用
• 1.3.15 减肥作用
• 1.3.16 抗炎作用
• 1.3.17 毒性
• 1.4 药材及其制剂的质量控制研究
• 1.4.1 连翘苷为指标
• 1.4.2 连翘酯苷A为指标
• 1.4.3 其它指标
• 1.5 连翘酯苷A的药理作用
• 1.5.1 抗菌作用
• 1.5.2 抗炎作用
• 1.5.3 抗病毒作用
• 1.5.4 保肝作用
• 1.5.5 诱生外周血白细胞中α-IFN的作用
• 1.5.6 抗氧化活性
• 1.6 连翘酯苷A的分离纯化研究
• 1.7 连翘叶的研究进展
• 1.7.1 提取和含量测定
• 1.7.2 药理作用
• 1.8 连翘和连翘叶的炮制研究进展
• 1.8.1 炮制历史沿革
• 1.8.2 炮制研究
• 1.9 本文研究目的和意义
• 参考文献
• 第二章 连翘酯苷A对照品制备
• 2.1 仪器与材料
• 2.2 方法
• 2.2.1 分析色谱条件
• 2.2.2 制备色谱条件
• 2.2.3 连翘酯苷A样品溶液制备
• 2.2.4 紫外光谱鉴定连翘醋普A
• 2.2.5 红外光谱鉴定连翘醋普A
• 2.2.6 核磁共振鉴定连翘醋普A样品
• 2.3 结果
• 2.3.1 制备
• 2.3.2 纯度检测
• 2.3.3 连翘酯苷A鉴定
• 2.4 小结与讨论
• 参考文献
• 第三章 连翘果实和叶炮制方法研究
• 3.1 仪器与材料
• 3.2 炮制品制备
• 3.2.1 常温晾干
• 3.2.2 清蒸炮制法
• 3.2.3 水煮炮制法
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 色谱条件
• 3.3.2 供试品溶液制备
• 3.3.3 对照品溶液的制备
• 3.3.4 标准曲线的绘制
• 3.3.5 样品受热稳定性初步考察
• 3.4 结果与讨论
• 3.4.1 炮制方法对连翘各色谱峰的影响
• 3.4.2 炮制时间对连翘中连翘酯苷A含量的影响
• 3.4.3 连翘炮制品与生品受热稳定性比较
• 3.4.4 不同炮制方法对连翘叶的影响
• 3.5 结论
• 参考文献
• 第四章 连翘炮制机理初步研究
• 4.1 实验材料及仪器
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 色谱条件
• 4.2.2 连翘粗酶液的制备
• 4.2.3 连翘酯苷对照品溶液的制备
• 4.2.4 供试品溶液制备
• 4.2.5 连翘粗酶对连翘酯苷的影响
• 4.2.6 检测方法
• 4.3 结果
• 4.4 小结与讨论
• 参考文献
• 第五章 连翘酯苷A分离纯化工艺研究
• 5.1 实验材料及仪器
• 5.2 试验方法与结果
• 5.2.1 样品测定
• 5.2.2 聚酰胺分离连翘酯苷A样品
• 5.2.3 柱色谱2对连翘酯苷A的纯化
• 5.2.4 放大实验
• 5.3 讨论
• 5.4 小结
• 参考文献
• 第六章 连翘酯苷A质量标准的初步研究
• 6.1 实验材料及仪器
• 6.2 定性鉴别
• 6.2.1 性状
• 6.2.2 鉴别
• 6.3 检查
• 6.3.1 水分
• 6.3.2 重金属
• 6.3.3 砷盐
• 6.3.4 检测
• 6.4 连翘酯苷A含量测定
• 6.4.1 色谱条件
• 6.4.2 供试品溶液的制备
• 6.4.3 方法学的考察
• 6.5 高温试验
• 6.6 高湿试验
• 6.7 结果与讨论
• 第七章 总结与展望
• 总结
• 主要创新点
• 展望
• 个人简介
• 硕士期间发表论文
• 致谢