抗胆碱酯酶药对诱发糖尿病小鼠的毒性影响

论文摘要

糖尿病这种终身性慢性内分泌疾病发病率呈逐年上升趋势,已成为当今世界危害人类生命的第三大疾病。但目前对其发病机制尚不十分清楚,而且由其引发的各种疾病更需要进一步研究。另外,动物及人类在健康和生病状态下对药和农药等有毒物质的反应有不同情况,而且关于有毒物质对糖尿病人群尤其是对其脑部影响的研究目前还甚少。因此,本研究从毒理学角度出发,以抗胆碱酯酶药为受试物对诱发糖尿病的小鼠进行了大量毒性研究,目的是阐明农药等有毒物质对糖尿病小鼠的影响,进而为制定农药残留在农畜产品中的限量标准及为进一步研究糖尿病中枢神经系统的发病机制提供依据。本研究采用通过链脲霉素制作的糖尿病模型小鼠,对其进行了胰脏病理切片观察、脑部Na+,K+-ATPase活性测定、DDVP（杀虫剂）、Propoxur（杀虫剂）、Donepezil·HCl（抗痴呆药）、Methamidophos（杀虫剂）等四种药对脑部乙酰胆碱酯酶（AChE）、以及在In trvio条件下Donepezil·HCl对AChE的活性影响研究。研究结果如下:1.糖尿病模型小鼠制作试验:用ICR雌性7周龄小鼠,链脲霉素100mg/kg/d给药2-4次,血糖值显示300mg/dl,糖尿病组饮水量增多、体重增加受到抑制,糖尿病组与非糖尿病组比较差异显著（P＜0.05）,摄食量无显著差异,排尿量显著增多。说明在100mg/kg.d链脲霉素剂量下,模型成功。2.小鼠胰脏病理切片制作及观察试验:为了进一步确认用链脲霉所做的模型是否为糖尿病模型小鼠,以链脲霉素制作的小鼠5只为试验组,另选同样条件下饲养的5只健康小鼠为对照组,采用胰脏病理切片方法,观察胰岛β细胞是否受到损坏。结果,用链脲霉素制作的小鼠,胰脏细胞不紧凑、胰岛形状不规则,胰岛β细胞数减少、缺如,甚至出现多处空胞,表明胰岛组织被严重破坏。而未用链脲霉素的小鼠胰脏细胞胞质紧密、胰岛呈规则的圆形或椭圆形,胰岛α及β细胞数目多、呈圆形。这进一步验证了糖尿病模型制作成功。3.小鼠脑部Na+,K+-ATPase活性的测定:以链脲霉素制作的小鼠5只为试验组,另选同样条件下饲养的5只健康小鼠为对照组,测定了各自的脑部位海马、纹状体、大脑皮质的Na+,K+-ATPase活性。结果,糖尿病组海马、纹状体、大脑皮质的Na+,K+-ATPase活性明显降低,糖尿病组与非糖尿病组比较,差异极显著（P＜0.01）。4.DDVP对链脲霉素诱发的糖尿病小鼠脑部AChE活性的影响:以链脲霉素制作的小鼠20只为试验组,另选同样条件下饲养的20只健康小鼠为对照组,测定其脑部AChE活性。按5 mg/kg投与DDVP后,在0 min到180 min内,糖尿病组与非糖尿病组比较,其脑部海马、纹状体、大脑皮质中的AChE活性未发生显著性变化。同时,糖尿病组惺蟮恼癫傲飨殉潭冉先?无竖毛现象,而非糖尿病组小鼠的振颤及流涎程度大于糖尿病组,且有轻度竖毛的现象。5.Propoxur对链脲霉素诱发的糖尿病小鼠脑部AChE活性的影响:以链脲霉素制作的小鼠30只为试验组,另选同样条件下饲养的30只健康小鼠为对照组,测定脑部AChE活性。按10 mgNg投与Propoxur后,在0 min到180 min内,糖尿病组与非糖尿病组比较,其脑部海马、纹状体、大脑皮质中的AChE活性未发生显著性变化。同时,糖尿病组振颤及流涎程度较弱,无竖毛现象,而非糖尿病组小鼠的振颤及流涎程度大于糖尿病组,且有轻度竖毛现象。6.在In trvio的条件下Donepezil·HCl对AChE活性的影响:在In trvio的条件下,10nM浓度的Donepezil能使57.98%左右AChE受到抑制,而在1000nM浓度的Donepezil时,就能抑制92.44%左右的AChE活性。这说明,Donepezil·HCl在体外对AChE活性具有强烈的抑制作用。7.Donepezil-HCl对链脲霉素诱发的糖尿病小鼠脑部AChE活性的影响:以链脲霉素制作的小鼠30只为试验组,另选同样条件下饲养的30只健康小鼠为对照组,测定脑部AChE活性。按5 mg/kg投与Donepezil-HCl后,与上述试验结果一样,在0 min到180 min内,糖尿病组与非糖尿病组比较,其脑部海马、纹状体、大脑皮质中的AChE活性未发生显著性变化。同时,糖尿病组振颤及流涎程度较弱,无竖毛现象,而非糖尿病组小鼠的振颤及流涎程度大于糖尿病组,且有轻度竖毛现象。8.Methamidophos对链脲霉素诱发的糖尿病小鼠脑部AChE活性的影响:以链脲霉素制作的糖尿病小鼠20只为试验组,另选同样条件下饲养的20只健康小鼠为对照组,测定脑部AChE活性。按7 mg/kg投与Methamidophos后,糖尿病组与非糖尿病组比较,其3小时和24小时的脑部海马、纹状体、大脑皮质中的AChE活性变化差异显著（p＜0.01）。同时,糖尿病组小鼠振颤出现的较晚,振颤及流涎程度较弱,过3.5h后症状得到基本恢复,而非糖尿病组小鼠振颤出现的早,振颤及流涎程度较强,过7h后症状得到了基本恢复。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 糖尿病概述
• 1.2 糖尿病流行的相关因素
• 1.3 糖尿病的流行趋势及治疗进展
• 1.4 糖尿病中枢神经系统疾病
• 1.5 抗胆碱酯酶药
• 1.6 目的意义
• 1.7 研究内容
• 第二章 试验材料与方法
• 2.1 主要仪器
• 2.2 主要试剂
• 2.3 实验动物
• 2.4 麻醉方法
• 2.5 糖尿病模型的制作
• 2.6 血糖值测定
• 2.7 小鼠胰脏病理切片制作及观察试验
• +,K⁺-ATPase活性的测定'>2.8 小鼠脑部Na⁺,K⁺-ATPase活性的测定
• 2.9 DDVP对链脲霉素诱发的糖尿病小鼠脑部AChE活性的影响
• 2.10 Propoxur对链脲霉素诱发的糖尿病小鼠脑部AChE活性的影响
• 2.11 在In trvio的条件下Donepezil·HCl对AChE活性的影响
• 2.12 Donepezil·HCl对链脲霉素诱发的糖尿病小鼠脑部AChE活性的影响
• 2.13 Methamidophos对链脲霉素诱发的糖尿病小鼠脑部AChE活性的影响
• 第三章 结果
• 3.1 糖尿病模型小鼠制作试验
• 3.2 小鼠胰脏病理切片制作及观察
• +,K⁺-ATPase活性的测定'>3.3 小鼠脑部Na⁺,K⁺-ATPase活性的测定
• 3.4 DDVP对链脲霉素诱发的糖尿病小鼠脑部AChE活性的影响
• 3.5 Propoxur染毒对链脲霉素诱发的糖尿病小鼠脑部AChE活性的影响
• 3.6 在In trvio的条件下Donepezil·HCl对AChE活性的影响
• 3.7 Donepezil·HCl对链脲霉素诱发的糖尿病小鼠脑部AChE活性的影响
• 3.8 Methamidophos对链脲霉素诱发的糖尿病小鼠脑部AChE活性的影响
• 第四章 讨论
• 4.1 糖尿病模型小鼠制作试验
• 4.2 小鼠胰脏病理切片制作及观察试验
• +,K⁺-ATPase活性的测定'>4.3 小鼠脑部Na⁺,K⁺-ATPase活性的测定
• 4.4 DDVP对链脲霉素诱发的糖尿病小鼠脑部AChE活性的影响
• 4.5 Propoxur对链脲霉素诱发的糖尿病小鼠脑部AChE活性的影响
• 4.6 在In trvio的条件下Donepezil·HCl对AChE活性的影响
• 4.7 Donepezil·HCl对链脲霉素诱发糖尿病小鼠脑部AChE活性的影响
• 4.8 Methamidophos对链脲霉素诱发糖尿病小鼠脑部AChE活性的影响
• 第五章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人资料