论文摘要
胚胎发育是一个细胞快速分裂、高度分化的过程,与细胞增殖、分化相伴随的还有细胞死亡。细胞死亡对于维持细胞动态平衡、胚胎结构的重建具有非常重要的作用,它发生在胚胎的特定部位和特定时间,并有严格的时空程序,基因表达调控贯穿整个过程,形成有序的调控网络,在胚胎发育中协调发挥作用。mcpr1是我实验室通过消减杂交技术从RA诱导的小鼠腭裂模型中获得的新基因（GenBank登录号为AYO74887）,命名为mcpr1（mouse cleft palate related gene-1）。前期研究鉴定了其mRNA全长,在部分组织中探讨了mcpr1的表达变化。但对其详细的组织表达分布及其作用机理知之甚少;本研究在描述其组织广泛表达的基础上,并对其在胚胎颌面部发育中可能参与的调控机制进行阐述,研究内容主要分为以下三部分进行: 一、MCPR1多克隆抗体的制备及鉴定 采用多聚酶链式反应（PCR）扩增出mcpr1基因蛋白编码序列,经过中间载体pGEX-T-easy,定向克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建融合表达载体pGEX-4T-mcpr1,用IPTG诱导在大肠杆菌中表达,得到GST-MCPR1融合蛋白,初步纯化,经SDS-PAGE电泳,直接割胶,将其作为抗原免疫制备多克隆抗体。一个月后,获得免疫血清,初步纯化鉴定获得高效价、同源性及特异性较好的多克隆抗体。MCPR1多克隆抗体的获得为在蛋白水平研究新基因mcpr1的功能提供了实验基础,为检测MCPR1在不同组织中的表达变化提供有力的条件。
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