中年昆明小鼠学习记忆功能、血清甲状腺素水平与相关脑区Synaptotagmin Ⅰ和Rab3a蛋白含量相关性研究

论文摘要

目的研究中年昆明小鼠学习记忆功能、血清甲状腺素水平与相关脑区SynaptotagminⅠ和Rab3a蛋白含量,及其相互之间相关性研究。方法选取5月龄组和12月龄组昆明小鼠:5月龄组27只（13雄14雌）,12月龄组12只（4雄8雌）。通过新物体再认和六臂放射状水迷宫（radial six-armwater maze,RAWM）实验观察小鼠的学习记忆能力。行为学实验结束后两周采血取脑,应用放射免疫法检测小鼠血清甲状腺素（thyroid hormone,TH）水平,采用蛋白质印迹技术（Western blotting）检测两组小鼠嗅球、额叶、顶叶、腹侧海马及背侧海马中SynaptotagminⅠ（SytⅠ）、Rab3a和内参蛋白β-actin蛋白的表达,然后经Photoshop CS软件处理后,再用图像分析系统（Image-Pro Plus 6.0）进行印迹条带灰度值测定。SytⅠ（Rab3a）灰度值与β-actin灰度值的比值作为SytⅠ（Rab3a）相对含量。用方差分析方法进行统计学分析,使用Spearman秩相关检测行为学实验参数、血清TH和SytⅠ（Rab3a）相对含量三者之间的相关性。结果①新物体再认实验中5月龄组和12月龄组小鼠无论在训练期还是实验期,探索总时间和优先指数均无统计学差别;②RAWM实验示:学习期中随着实验天数的增加,两组小鼠均表现出错误数逐渐减少,潜伏时间逐渐缩短。12月龄组与5月龄组小鼠相比较显示出错误数多,潜伏时间长,重复测量方差分析显示有显著性,分别为[F（1,37）=5.361,P=0.026]和[F（1,37）=6.948,P=0.012]。记忆期时两组小鼠在试验中错误数随天数的增加而下降,潜伏时间也随天数的增加而缩短。12月龄组小鼠错误数多[F（1,37）=12.298,P=0.001],潜伏时间长[F（1,37）=13.900,P=0.001];③12月龄组小鼠血清TT3和TT4水平明显低于5月龄组,P分别为0.001和0.022;④Westernblotting检测两组昆明小鼠嗅球、顶叶、额叶、背侧海马和腹侧海马中突触蛋白SytⅠ和Rab3a的相对含量无显著差异;⑤新物体再认实验中,TT3和TT4与实验成绩之间未表现出相关性。RAWM实验中,TT4与学习期潜伏时间,记忆期错误数和潜伏时间存在负相关（r=-0.348,P=0.03、r=-0.503,P=0.001和r=-0.503,P=0.001）,而TT3仅与记忆期潜伏时间有负相关（r=-0.38,P=0.017）;⑥TT3与五个脑区中突触蛋白SytⅠ和Rab3a表达未见明显相关,TT4仅在嗅球与Rab3a正相关（r=0.345,P=0.032）,在腹侧海马中与Rab3a负相关（r=-0.401,P=0.013）,与五个脑区中突触蛋白SytⅠ无相关,与顶叶、额叶和背侧海马中Rab3a表达无相关。结论①12月龄昆明小鼠空间学习记忆功能下降明显,而非空间学习记忆未出现改变。②12月龄组小鼠血清TT3和TT4水平均低于5月龄组。③对不同脑区突触蛋白SytⅠ和Rab3a的检测未见年龄相关性改变。④TT4与学习期潜伏时间,记忆期错误数和潜伏时间存在负相关,TT3与记忆期潜伏时间有负相关。⑤TH与五个脑区中突触蛋白SytⅠ和Rab3a表达未见明显相关。

论文目录

• 中英文缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 1.引言
• 2.材料和方法
• 2.1 材料
• 2.2 行为学测试
• 2.3 血清甲状腺素检测
• 2.4 脑标本采集
• 2.5 Western blotting步骤
• 2.6 统计学处理
• 3.结果
• 3.1 行为学检测结果
• 3.2 血清TH水平
• 3.3 蛋白定量
• 3.4 血清甲状腺素与行为学和突触蛋白（SytⅠ、Rab3a）相关性分析
• 4.讨论
• 4.1 中年昆明小鼠,存在非同步性空间和非空间学习记忆功能损害
• 4.2 中年小鼠血清TH水平降低
• 4.3 不同脑区年龄相关性突触蛋白Syt Ⅰ、Rab3a相对含量
• 4.4 血清甲状腺素与行为学和突触蛋白（Syt Ⅰ、Rab3a）相关性
• 5.结论
• 参考文献
• 个人简历
• 致谢
• 综述
• 参考文献