论文摘要
目的建立一种简便、快捷、准确的3-磷酸甘油醛脱氢酶的检测方法，能适用全自动生化分析仪，并对此方法进行评估，为以后的临床推广奠定基础。通过测定血中GAPD的活性，探讨GAPD在糖尿病肾病早期诊断中的意义。方法以三乙醇胺作为缓冲液（PH为7.5），1，3-二磷酸甘油酸为底物，偶联3-磷酸甘油酸激酶，GAPD逆向催化1,3-二磷酸甘油酸为3-磷酸甘油醛，同时还原型辅酶Ⅰ（NADH）被氧化成氧化型辅酶Ⅰ（NAD+）。在波长340nm处NADH有强吸收峰，在线性范围内，吸光度的下降速率与GAPD的活性成正比，因此测定波长340nm处吸光度的下降速率，可间接地计算出GAPD的活性。测定190例健康者和80例2型糖尿病患者的血GAPD，尿微量白蛋白和β2-微球蛋白，对结果进行统计分析。结果通过各项试验，对GAPD的各参数进行摸索和评价，建立一套良好的可适用全自动生化分析仪的测定方法。疾病组中三组GAPD活性水平均高于正常组（P<0.05）,疾病组中的微量白蛋白尿组、大量白蛋白尿组的微量白蛋白和β2-微球蛋白高于对照组（P<0.05）,但是正常蛋白尿组中的微量白蛋白和β2-微球蛋白与对照组相比差异无统计学意义（P>0.05）。疾病组各组之间中的GAPD无差异（P>0.05），而微量白蛋白和β2-微球蛋白在各组之间差异有统计学意义（P<0.05）。结论用连续监测法测定样本中GAPD的方法简单易于操作，测定速度快，试剂盒的稳定性好，抗干扰能力强，精密度和准确度高，线性范围广，可应用全自动生化分析仪，便于推广。GAPD在正常白蛋白尿期活性已经发生变化，比微量白蛋白和β2-微球蛋白活性变化更早，能够提早预测糖尿病肾脏疾病的发生，有利于临床做出诊断，改善患者的预后。
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