氨氮和亚硝态氮胁迫对日本沼虾血淋巴的影响

论文摘要

目前,全球正面临生态环境恶化和多种暴发性疾病侵袭的双重危害。环境因子作为引起虾病暴发的因素之一,开始受到较广泛的关注。研究生态环境与虾类自身免疫抗病能力的关系,已成为虾类病害防治领域的重要课题之一。而氨态氮和亚硝态氮则是养殖环境中最主要的外来和自身污染物。本文就血淋巴中血细胞数量、血清生化指标、免疫相关酶类及血蓝蛋白等方面系统地研究了氨氮和亚硝态氮对日本沼虾免疫能力的影响。本项研究的实施不仅完善甲壳动物血液学知识,为虾类免疫抗病研究提供相应的理论依据,也为日本沼虾的增养殖和环境保护提供依据。本文对取自华北白洋淀种群的日本沼虾(Macrobrachium nipponense)血细胞进行显微形态观察、分类、测量和计数。依据细胞的形态、胞质中颗粒的数量和密度以及细胞的核质比把日本沼虾血细胞分为透明细胞(hyaline cell, HC)、半颗粒细胞(semigranular cell, SGC)和颗粒细胞(granular cell, GC)3类。血细胞大小依次为颗粒细胞>半颗粒细胞>透明细胞。血细胞密度为1.13(±0.50)×106个/mL,其中GC占48.5%,SGC占31.8%,HC19.7%。通过氨氮和亚硝态氮胁迫日本沼虾实验,得出日本沼虾的血细胞的总数和各类血细胞数量都有显著变化,随着氨氮和亚硝态氮浓度的增加,血淋巴中血细胞数量均呈先上升后下降的趋势,差异显著。经过24小时胁迫,氨氮和亚硝态氮对日本沼虾血淋巴中血清总蛋白、血糖及血清总胆固醇都有显著的影响。随氨氮浓度增加血清总蛋白和血糖含量呈下降趋势。血清总胆固醇的含量是先上升后下降趋势。随着亚硝态氮浓度的增加,血清总蛋白呈下降的趋势,血糖是先上升后下降的趋势,血清总胆固醇则是上升的趋势。随着氨氮浓度的增加,日本沼虾血淋巴中血清酚氧化酶的含量呈先上升后下降的趋势,较对照组,酚氧化酶活力上升差异显著；碱性磷酸酶呈下降趋势,较对照组,差异显著。随着亚硝酸浓度的增加,血淋巴中血清酚氧化酶活力呈先下降再上升再下降的趋势,较对照组,酚氧化酶含量在较高浓度时显著升高；碱性磷酸酶呈先下降再上升又下降变化,较对照组,变化显著。氨氮和亚硝态氮胁迫对日本沼虾血蓝蛋白含量的影响是显著的。随着氨氮浓度增加,日本沼虾血淋巴中血蓝蛋白的含量呈先上升后下降的趋势。随着亚硝态氮浓度增加,血淋巴中血蓝蛋白含量也是先上升再下降。总之,氨氮和亚硝态氮对日本沼虾血淋巴中的指标都有显著影响,对血细胞、生化指标、酚氧化酶及血蓝蛋白都产生了不同程度的影响。所以血淋巴的指标可以作为检验虾类机体是否健康的指标。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 研究的目的与意义
• 1.2 血细胞研究进展
• 1.2.1 光镜染色观察分类
• 1.2.2 光镜电镜结合观察形态学分类
• 1.2.3 功能分类
• 1.2.4 免疫学分类
• 1.3 血淋巴血清生化指标的研究
• 1.4 血淋巴免疫研究进展
• 1.4.1 血淋巴细胞及其功能
• 1.4.2 体液因子
• 1.4.2.1 酚氧化物酶原活化系统
• 1.4.2.2 凝集素
• 1.4.2.3 溶菌酶
• 1.4.2.4 抗菌肽
• 1.5 水体环境因子对甲壳动物影响的研究
• 1.6 研究内容
• 第2章 材料与方法
• 2.1 材料、试剂与仪器
• 2.1.1 主要材料
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 主要仪器
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 样品处理
• 2.2.2 血细胞观察、分类和计数
• 2.2.3 血细胞大小的测定
• 2.2.4 血涂片制作
• 2.2.5 血糖、血清蛋白及血清总胆固醇的测定
• 2.2.6 酚氧化酶的测定
• 2.2.7 碱性磷酸酶的测定
• 2.2.8 血蓝蛋白的测定
• 2.2.9 数据分析
• 第3章 氨氮和亚硝酸胁迫对日本沼虾血细胞数量的影响
• 3.1 前言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 实验设计
• 3.2.2 血细胞各项指标测定方法
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 日本沼虾血细胞形态学特征
• 3.3.2 氨态氮和亚硝态氮胁迫对日本沼虾血细胞组成和数量的影响
• 3.4 讨论
• 3.4.1 血涂片的染色方法
• 3.4.2 血细胞的分类依据
• 3.4.3 环境胁迫对日本沼虾血细胞的影响
• 第4章 氨氮和亚硝酸胁迫对日本沼虾血清生化指标的影响
• 4.1 前言
• 4.2 材料与方法
• 4.2.1 实验设计
• 4.2.2 血清营养各项指标测定
• 4.3 结果与分析
• 4.4 讨论
• 第5章 氨氮和亚硝酸胁迫对日本沼虾血清酚氧化酶和碱性磷酸酶的影响
• 5.1 前言
• 5.2 材料与方法
• 5.2.1 实验设计
• 5.2.2 血清酚氧化酶和碱性磷酸酶的测定
• 5.3 结果与分析
• 5.4 讨论
• 第6章 氨氮和亚硝酸胁迫对日本沼虾血蓝蛋白含量的影响
• 6.1 前言
• 6.2 材料与方法
• 6.2.1 实验设计
• 6.2.2 血蓝蛋白的测定
• 6.3 结果与分析
• 6.4 讨论
• 6.4.1 血蓝蛋白和酚氧化酶
• 6.4.2 血蓝蛋白和环境因子
• 第7章 结语
• 参考文献
• 致谢