论文摘要
最近50年来,肺癌的发病率有着相当大程度的增长,并且在恶性肿瘤中发病率最高。化疗抗药性如今成为成功治愈肺癌病人的最大障碍。P-糖蛋白（P-gp）引起的多重耐药性（MDR）是最早发现的,也是在临床化疗抗药性中被检测到最多的机制。倍半萜稀内酯化合物小白菊内酯（PN）是草本菊科植物中的活性成分,已经运用于治疗炎症,偏头痛,月经失调,发热和风湿性关节炎。尽管已经证实小白菊内酯对抗化疗抗性具有重要性,但其针对肺癌多重耐药性的药理学作用还未完全阐明。本实验使用人肺腺系细胞A549和构建的A549的阿霉素耐药细胞系（A549/DOX）,研究了PN在药物抗性中的作用以及可能存在的机制。NF-κB是广泛存在的一类转录因子,能够调节多种生命机能如凋亡,细胞增殖与分化,并且在调控免疫应答与炎症反应中具有重要作用。许多抗癌药物能够引起NF-κB核转运并影响其靶基因的激活,NF-κB激活又能保护细胞而对抗凋亡刺激,例如化疗造成的多重耐药性。PN是天然的NF-κB的抑制剂,因此我们验证了PN对NF-κB通路的抑制作用。热休克蛋白家族（HSPs）是一类高度保守的分子伴侣蛋白,在各种刺激存在的情况下诱导产生,如感染、高温、自由基以及机械压力目前研究最多的高度保守的热休克蛋白是HSP70,它作为ATP依赖的分子伴侣能够帮助新生多肽的折叠。HSP70还能抑制由不同的刺激导致的细胞凋亡,并与药物抗性有一定相关性。因此我们探究了HSP70是否与P-gp有关联,并且参与耐药过程。本实验证明了PN能够增强阿霉素对A549/DOX细胞的细胞毒性,进而促进凋亡。在A549/DOX细胞中,PN能够抑制P-gp的上调,并且提高阿霉素在细胞中的积累。同时我们发现PN很明显的对NF-κB在A549/DOX细胞中的激活有抑制作用,这意味着PN的抗癌活动包含对NF-κB的抑制。此外,我们发现HSP70和P-gp之间有着联系。在A549细胞中过表达HSP70,能够促进P-gp的上调,而且我们认为这是不依赖NF-κB激活的,并且在A549的阿霉素耐药细胞系中,对HSP70进行干扰,这导致P-gp表达下降。有趣的是,PN也能够有效地抑制HSP70的上调。由此,PN通过削弱NF-κB的激活和HSP70的上调这种机制来抑制P-gp的表达,而逆转细胞对阿霉素的抗药性。我们的实验结果不仅深入探究了PN抑制与多重耐药性相关的P-gp来促进肺癌化疗疗效的这种潜能,而且突出展现了在药物抗性中HSP70的重要角色。