论文摘要
神经干细胞（Neural stem cells, NSCs）是广泛存在于中枢神经系统内未分化的细胞,它具有自我增殖及多向分化的潜能,被移植回中枢神经系统后,能进一步迁移、分化,与宿主神经元整合并发挥神经功能。NSCs体内移植为神经系统损伤修复和退行性病变的治疗带来新的希望,从而成为当今神经科学研究的热点之一。本实验采用无血清培养技术培养NSCs,并利用神经干细胞的标记物对其进行鉴定,应用神经元、神经胶质细胞、少突胶质细胞特异性标志物NSE、GFAP、O4对自然分化的NSCs进行免疫细胞化学染色,证明其多向分化潜能,同时用免疫组织化学染色技术观察了移植至大鼠脊髓内的NSCs存活及迁移情况。结果显示:应用DMEM-F12培养基,内添加B27、EGF及bFGF进行NSCs的培养,获得的细胞球呈Nestin及Musashi染色阳性。细胞在添加10%胎牛血清自然分化后,呈NSE、GFAP、O4染色阳性。NSCs在大鼠体内移植2周BrdU免疫组化染色结果显示:在移植的脑脊膜处可见阳性细胞,散在分布脊髓白质内,脊髓中央管周围及灰质内亦可见阳性细胞。提示:本实验成功获得了神经干细胞,获得的神经干细胞可以向神经元、神经胶质细胞、少突胶质细胞分化。将NSCs移植后入大鼠脊髓内,NSCs可以存活并向周围迁移。