论文摘要
急性免疫性肝损伤临床表现为乏力、纳差、上腹部不适、黄疸、发热、肝区疼痛等,可归为中医“胁痛”、“黄疸”等病范畴。大量临床与实验研究表明,中药可通过多途经实现对肝损伤的保护作用,其机制与改善肝脏微循环、拮抗内毒素、对抗肝细胞凋亡、抑制炎性细胞因子以及清除自由基等有关。复肝灵颗粒(FGL)是由黄香草木樨、黄芩、鸡骨草、金钱草、生甘草等数味中药组成,具有清热解毒、疏肝利胆、活血化瘀、利湿消肿的功效,主治各种类型的急慢性病毒性肝炎,特别对湿热型乙型活动性肝炎有良好疗效。对乙肝表面抗原和核心抗原阳性者也有明显转阴作用,并适用于器官、组织淋巴郁滞性高蛋白水肿。通过免疫功能试验证明:复肝灵颗粒对免疫性肝损伤也具有显著的保护作用;还具有提高环磷酰胺所致的小鼠体液免疫低下的作用,提高机体网状内皮系统吞噬异物的能力,具有改善机体免疫功能的作用。第一部分复肝灵颗粒的薄层色谱鉴定研究目的通过设计工艺路线,进行工艺方法和条件的筛选,制定出方法简便、条件确定的稳定工艺,建立复肝灵颗粒(FGL)的质量控制方法,提高该药的质量可控性。方法鉴别方法的研究:采用薄层色谱法(TLC),选用合适的提取溶剂和方法,以及最适宜的固定相、展开系统、显色系统等,对黄香草木樨、鸡骨草及金钱草等药材进行定性鉴别。结果供试品色谱中,在与对照药材相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;TLC方法专属性强,色谱中均能检出药材,且斑点清晰,分离度好,易于识别。结论黄香草木樨、鸡骨草及金钱草的鉴别方法分离度好,特异性强,重现好,可快速地对FGL进行定性检测,准确度高,精密度好,简单快速,建立的质量标准可有效控制FGL的质量。第二部分复肝灵对鼠免疫性肝损伤保护作用的实验研究目的研究复肝灵颗粒(FGL)对卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用及FGL对小鼠免疫功能的影响。方法50只小鼠用BCG联合LPS腹腔注射,建立小鼠免疫性肝损伤模型,其中4组分别给予FGL大(100mg/kg)、中(50mg/kg)、小(25mg/kg)剂量及联苯双酯(80mg/kg)灌胃治疗,余10只模型小鼠(模型对照组)和10只未造模小鼠(正常对照组)给予蒸馏水灌胃,通过对小鼠胸腺、肝脏、脾脏脏器指数、血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性、过氧化产物MDA含量、超微结构的检测,研究FGL对肝脏的保护作用。再以小鼠溶血素实验检测小鼠免疫功能。结果(1)模型对照组小鼠与正常对照组相比较,胸腺指数明显减小,肝脏指数及脾脏指数显著增大,FGL大、中剂量组均可显著增大胸腺指数(P<0.01)。(2)模型对照组小鼠血清ALT及AST活性显著增高(P<0.01)。FGL大、中、小剂量组均显著降低模型小鼠血清ALT及AST活性。(3)FGL各剂量组均能明显降低BCG+LPS引起的肝组织MDA的升高(P均<0.01),达到或接近正常对照组水平。(4)FGL不同剂量灌胃给药均可显著或非常显著地升高由环磷酰胺引起的小鼠溶血素水平低下。结论本试验成功的制备了BCG加LPS诱导小鼠产生免疫性肝损伤的模型;FGL对这种免疫性肝损伤具有显著的保护作用。FGL具有提高环磷酰胺所致的小鼠体液免疫低下的作用,表明FGL具有提高机体免疫功能的作用。
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