雷公藤红素对C6胶质瘤细胞凋亡及细胞周期阻滞的影响及机制的研究

雷公藤红素对C6胶质瘤细胞凋亡及细胞周期阻滞的影响及机制的研究

论文摘要

目的:探讨雷公藤红素对体外C6胶质瘤细胞凋亡及细胞周期阻滞的影响及机制。方法雷公藤红素处理体外培养的C6胶质瘤细胞,MTT法检测细胞增殖,Hochest33342染色荧光显微镜观察以及锇铀铅染色透射电镜观察胶质瘤细胞形态变化,流式细胞术分析细胞凋亡率及细胞周期改变。蛋白印迹分析检测凋亡相关蛋白及细胞周期调控蛋白的表达变化。结果雷公藤红素对C6胶质瘤细胞的增殖抑制作用呈浓度和时间依赖性;2.56μmol/L雷公藤红素处理C6胶质瘤细胞24h后,荧光显微镜、透射电镜下均可见凋亡形态学改变。流式细胞术检查显示,凋亡细胞比例由1.32%升高到19.34%;并且,处于G0/G1期的细胞比例由76.42%降低到54.52%,G2/M期细胞比例由9.29%升高到30.50%。蛋白印迹分析显示,雷公藤红素降低了Bcl-2及XIAP蛋白表达,促进了Bax及Caspase3的表达以及PARP的剪切;雷公藤红素在诱导细胞周期调控蛋白p21、p27及cyclin B1蛋白表达增加的同时抑制了cdk2蛋白的表达。结论雷公藤红素能够通过调节凋亡相关蛋白及细胞周期相关因子的表达影响C6胶质瘤细胞的凋亡及细胞周期阻滞。

论文目录

  • 前言
  • 中文摘要
  • Abstract
  • 中英文缩写词
  • 第1章 绪论
  • 第2章 综述
  • 2.1 雷公藤红素的研究进展
  • 2.1.1 免疫抑制活性
  • 2.1.2 氧化抑制活性
  • 2.1.3 抑制生育的生物活性
  • 2.1.4 抑制纤维化活性
  • 2.1.5 抑制血管生成活性
  • 2.1.6 抑制动脉粥样硬化活性
  • 2.1.7 诱导细胞凋亡活性
  • 2.1.8 肿瘤抑制活性
  • 2.2 胶质瘤治疗的研究进展
  • 2.2.1 手术治疗
  • 2.2.2 化学治疗
  • 2.2.3 放射治疗
  • 2.2.4 其它治疗
  • 2.2.5 小结
  • 第3章 材料与方法
  • 3.1 材料
  • 3.1.1 主要试剂
  • 3.1.2 主要仪器
  • 3.2 方法
  • 3.2.1 细胞培养
  • 3.2.2 MTT 法检测细胞增殖变化
  • 3.2.3 Hochest 染色荧光显微镜观察
  • 3.2.4 锇铀铅染色透射电镜观察
  • 3.2.5 流式细胞仪分析细胞周期变化和凋亡率
  • 3.2.6 蛋白印迹分析
  • 3.2.7 统计学处理
  • 第4章 结果
  • 4.1 雷公藤红素具有抑制 C6 胶质瘤细胞增殖的作用
  • 4.2 雷公藤红素具有诱导 C6 胶质瘤细胞凋亡及细胞周期阻滞的作用
  • 4.3 雷公藤红素能够诱导与凋亡及细胞周期阻滞相关蛋白表达变化
  • 第5章 讨论
  • 第6章 结论
  • 参考文献
  • 作者简介及在学期间所取得的科研成果
  • 致谢
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