阿克替苷抑制良性前列腺增生的药理学研究

阿克替苷抑制良性前列腺增生的药理学研究

论文摘要

目的研究管花肉苁蓉的化学成分阿克替苷对大鼠实验性前列腺增生模型的抑制作用及其机理。方法①去势大鼠皮下注射丙酸睾酮建立良性前列腺增生模型,阿克替苷(60、30、15mg·kg-1·d-1)灌胃6周。末次给药后分离前列腺,称重并计算前列腺指数;取腺体制作石蜡切片,光学显微镜观察前列腺细胞结构并计数相同倍数下腺体数目;②石蜡切片应用免疫组织化学方法检测雄激素受体(AR)和转化生长因子Ⅰ型受体(TGF-βR1)在前列腺组织中的表达。③流式细胞仪测定前列腺细胞凋亡率;透射电子显微镜观察前列腺细胞的超微结构。结果①中、高剂量阿克替苷可明显减轻大鼠前列腺湿重指数(0.589±0.001、0.547±0.002),与模型组( 0.780±0.004)比较差异有显著性( p< 0.01) ,分别与正常组(0.536±0.004)、阳性组(0.51±0.001)比较差异无显著性。光学显微镜下,正常组大鼠前列腺腺体分布均匀(18±2),腺上皮细胞呈单层排列整齐,腺腔大小均匀,腔内可见分泌物。模型组腺体密集,数目明显增多(25±1),腺上皮乳突状凸起伸向腔内,腺上皮细胞高柱状,复层排列,间质增多。前列康组大鼠前列腺腺体数目(21±2)明显多于正常组,腺上皮细胞光滑,腺腔明显扩张。阿克替苷高剂量组大鼠前列腺腺体数目(18±1)明显少于模型组、阳性药物前列康组(p<0.01),腺上皮细胞呈单层整齐排列,间质均匀,腺腔大小均匀,腔内明显可见红染分泌物,明显优于前列康组大鼠前列腺的形态,与正常组前列腺细胞形态接近。综上,高剂量阿克替苷明显改善了大鼠前列腺增生,作用优于阳性药物前列康。②代表前列腺AR阳性的棕黄色颗粒表达于前列腺上皮细胞上。正常组大鼠前列腺AR表达较弱(3.149±0.117)%;模型组AR表达(5.702±0.187)%明显增强,与正常组比较差异有显著性(p<0.01);中、高剂量阿克替苷减弱了前列腺上皮细胞AR的表达(4.481±0.31)%、(3.498±0.524)%,与模型组比较差异有显著性( p < 0.01 ) ,与正常组差异无显著性;高剂量阿克替苷组(3.498±0.524)% AR的表达明显弱于阳性组(4.661±0.455)(p<0.01)。TGFβR1的阳性着色为红棕色,位于腺上皮和间质中。正常组大鼠前列腺TGFβR1表达较弱(9.91±0.496)%;模型组TGFβR1表达明显增强(14.75±1.126),与正常组比较差异有显著性(p<0.01);中、高剂量阿克替苷减弱了腺上皮和间质中TGFβR1的表达(10.98±0.478)%、(10.05±0.297)%,与模型组比较差异有显著性( p < 0.01 ) ,与正常组比较差异无显著性;高剂量阿克替苷组(10.05±0.297)% TGFβR1的表达明显弱于阳性组(11.30±0.531)%(p<0.01)。综上表明高剂量阿克替苷减弱大鼠前列腺增生中AR和TGFβR1表达的作用强于前列康。③流式细胞仪检测发现,正常组大鼠前列腺细胞凋亡率低(1.10±0.06),可能与选择幼龄大鼠有关。经高、中、低剂量阿克替苷处理后大鼠前列腺细胞凋亡率(24.70±1.85)%、(16.1±1.04)%、(14.5±0.68)%明显高于模型组(9.50±0.5)%、前列康组(9.83±0.76)%,差异均有显著性(p<0.01),可见阿克替苷能诱导前列腺细胞凋亡,且作用明显强于前列康。④透射电子显微镜下可见正常组细胞核完整,核染色质分布均匀,粗面内质网丰富,腔内可见分泌物;模型组前列腺细胞细胞核形态改变,粗面内质呈囊状高度扩张,空泡明显;而阿克替苷高剂量组前列腺细胞核较完整,染色质密度增高,内质网空泡减少,有凋亡小体。结论阿克替苷可减轻大鼠前列腺湿重指数,改善前列腺增生的形态,调节前列腺分泌功能,抑制大鼠前列腺增生;阿克替苷通过减弱AR及TGF-βR1过表达,抑制前列腺上皮细胞增殖,诱导前列腺细胞凋亡,进而抑制大鼠实验性前列腺增生。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 符号说明
  • 前言
  • 1. 良性前列腺增生概述
  • 2. 肉苁蓉研究现状
  • 2.1 肉苁蓉的分类及分布
  • 2.2 肉苁蓉的功效
  • 3. 肉苁蓉的开发前景
  • 参考文献
  • 第一部分 阿克替苷对大鼠前列腺增生的腺体指数及形态结构的影响
  • 1 材料和方法
  • 1.1 实验动物
  • 1.2 仪器及试剂
  • 1.3 药物及配制
  • 1.4 造模及分组
  • 1.5 给药剂量与途径
  • 1.6 取材与制样
  • 1.7 统计学处理
  • 2 结果与分析
  • 3 讨论
  • 参考文献
  • 第二部分 阿克替苷对实验性前列腺增生大鼠雄激素受体(AR)表达的影响
  • 1 材料和方法
  • 1.1 实验动物
  • 1.2 仪器及试剂
  • 1.3 药物及制备
  • 1.4 造模及分组
  • 1.5 给药剂量与途径
  • 1.6 取材与制样
  • 1.7 统计学处理
  • 2 结果与分析
  • 3 讨论
  • 参考文献
  • 1)表达的影响'>第三部分 阿克替苷对实验性前列腺增生大鼠β转化生长因子Ⅰ型受体(TGF-βR1)表达的影响
  • 1 材料和方法
  • 1.1 实验动物
  • 1.2 仪器及试剂
  • 1.3 药物及配制
  • 1.4 造模及分组
  • 1.5 给药剂量与途径
  • 1.6 取材与制样
  • 1.7 统计学处理
  • 2 结果与分析
  • 3 讨论
  • 参考文献
  • 第四部分 阿克替苷对实验性前列腺增生大鼠细胞凋亡的影响
  • 1 材料和方法
  • 1.1 实验动物
  • 1.2 仪器及试剂
  • 1.3 药物及配制
  • 1.4 造模及分组
  • 1.5 给药剂量与方法
  • 1.6 取材与制样
  • 1.6.1 单细胞悬液的制备
  • 1.6.2 超薄切片制备
  • 2 结果与分析
  • 3 讨论
  • 参考文献
  • 全文讨论
  • 一、雄激素在实验性前列腺增生模型中的应用
  • 二、雄激素类药物与前列腺增生的治疗
  • 三、阿克替苷对实验性前列腺增生大鼠的作用及其机理探讨
  • 1. 阿克替苷抑制大鼠前列腺腺体增生,调节前列腺分泌功能
  • 1 过表达,诱导前列腺细胞凋亡'>2. 阿克替苷减弱AR 及TGF-βR1过表达,诱导前列腺细胞凋亡
  • 参考文献
  • 结论
  • 致谢
  • 攻读学位期间发表的学术论文
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