Columbin对实验性2型糖尿病大鼠肝脏药物代谢酶CYP450的影响

论文摘要

目的:探讨columbin对实验性2型糖尿病大鼠肝脏药物代谢酶细胞色素P450（CYP450）活性的影响,深入研究其对实验性2型糖尿病大鼠肝脏CYP450各亚酶基因表达及对CYP2E1蛋白表达的调节作用。方法:高脂高糖饮食联合小剂量腹腔注射链脲佐菌素（STZ）30mg/kg,建立实验性2型糖尿病大鼠模型。实验动物共分4组:正常对照组、模型对照组（蒸馏水5mg/kg/d）,低、高剂量columbin组（25、50mg/kg/d）,连续灌胃给药4 W,末次给药2 h后断头处死,制备肝微粒体,提取肝脏细胞mRNA。采用酶化学法检测肝微粒体CYP450总酶含量、各亚酶催化活性;实时定量逆转录-聚合酶链式反应（Quantitive real-time RT-PCR）法测定肝脏CYP450各亚酶mRNA的相对表达水平;蛋白免疫印迹法Western blotting检测肝脏CYP2E1酶蛋白相对表达量。结果:①2型糖尿病状态下肝脏CYP450总酶含量与正常组相比,差异无统计学意义（P>0.05）,高剂量可显著降低2型糖尿病肝脏CYP450总酶含量,约为模型组的0.68（P< 0.01）②2型糖尿病模型大鼠肝脏CYP1A1、CYP1A2、CYP2B1活性增强,在CYP1A1、CYP1A2和CYP2B1 mRNA转录水平有不同程度的上调;低、高剂量columbin均可逆转糖尿病状态下上述CYP450亚型的活性及mRNA表达的变化,并随剂量增高其逆转作用有增强的趋势:与模型组相比,columbin可降低CYP1A1、CYP1A2、CYP2B1活性,不同程度下调三者的mRNA转录水平。③2型糖尿病状态下CYP2D1活性及其mRNA的表达有轻微的降低,但与正常组相比其差异无统计学意义（P>0.05）,给予columbin对CYP2D1活性及mRNA表达亦无明显影响。④2型糖尿病状态下CYP2C11、CYP2E1和CYP3A1的活性降低,三者的mRNA转录水平均有不同程度的下降,CYP2E1的蛋白表达量显著降低;低、高剂量columbin均可逆转上述CYP450酶亚型的活性及mRNA表达的变化,并随剂量增高其逆转作用有增强的趋势:与模型组相比较,columbin可增强CYP2C11、CYP2E1和CYP3A1活性,不同程度的上调CYP2C11、CYP2E1和CYP3A1的mRNA转录及CYP2E1的蛋白表达。结论:在2型糖尿病状态下,大鼠肝脏药物代谢酶CYP450会发生变化,columbin可相应的逆转这些变化,使肝脏药物代谢酶趋向正常,为2型糖尿病的合理用药提供了实验依据。

论文目录

• 全文缩略词
• 摘要
• Abstract
• 前言
• 参考文献
• 第一部分 Colunbin 对实验性2 型糖尿病大鼠肝脏CYP450 酶活性的影响
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 Columbin 对实验性2 型糖尿病大鼠肝脏CYP450 基因表达的调控作用
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 第三部分 Columbin 对实验性2 型糖尿病大鼠肝脏CYP450 蛋白表达的影响
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 全文总结
• 创新点
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 发表论文及参加会议情况