本文主要研究内容
作者陈晓佳,孙林浩,袁阳,黄小红,张伟妮（2019）在《尼罗罗非鱼肝脏N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质分析》一文中研究指出：N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)是生物体内主要的溶酶体水解酶之一,广泛存在于动植物和微生物体内.以尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)肝脏作为材料,采用硫酸铵(饱和度30%～70%)分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱层析、Sephadex G-200分子筛凝胶过滤柱层析的方法分离纯化NAGase,得到比活力为2 988U/mg的酶制剂.经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测呈现单一条带,说明所得酶为PAGE单一纯.通过Sephadex G-200柱层析法测得NAGase的总分子质量为61.8ku,结合SDS-PAGE结果,说明该酶仅有一个亚基.进一步测定了NAGase的酶学性质:NAGase水解底物对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-NAG)的最适温度为55℃,温度稳定范围为0～55℃,超过75℃时则完全丧失活性;NAGase水解底物的最适pH为5.8,pH稳定范围为4.0～9.0,pH大于9.0时几乎完全失活;该酶水解底物的动力学参数Km和vm分别为0.229mmol/L和9.346μmol/(L·min);运用化学修饰法分析发现二硫键、氨基、组氨酸咪唑基和色氨酸吲哚基均是NAGase的活性必需基团,而精氨酸胍基则不是其活性必需基团.
Abstract
N-yi xian -β-D-an ji pu tao tang gan mei (NAGase)shi sheng wu ti nei zhu yao de rong mei ti shui jie mei zhi yi ,an fan cun zai yu dong zhi wu he wei sheng wu ti nei .yi ni luo luo fei yu (Oreochromis niloticus)gan zang zuo wei cai liao ,cai yong liu suan an (bao he du 30%～70%)fen ji chen dian 、DEAE Sepharose Fast Flowli zi jiao huan zhu ceng xi 、Sephadex G-200fen zi shai ning jiao guo lv zhu ceng xi de fang fa fen li chun hua NAGase,de dao bi huo li wei 2 988U/mgde mei zhi ji .jing shi er wan ji liu suan na -ju bing xi xian an ning jiao dian yong (SDS-PAGE)jian ce cheng xian chan yi tiao dai ,shui ming suo de mei wei PAGEchan yi chun .tong guo Sephadex G-200zhu ceng xi fa ce de NAGasede zong fen zi zhi liang wei 61.8ku,jie ge SDS-PAGEjie guo ,shui ming gai mei jin you yi ge ya ji .jin yi bu ce ding le NAGasede mei xue xing zhi :NAGaseshui jie de wu dui xiao ji ben -N-yi xian -β-D-an ji pu tao tang gan (pNP-NAG)de zui kuo wen du wei 55℃,wen du wen ding fan wei wei 0～55℃,chao guo 75℃shi ze wan quan sang shi huo xing ;NAGaseshui jie de wu de zui kuo pHwei 5.8,pHwen ding fan wei wei 4.0～9.0,pHda yu 9.0shi ji hu wan quan shi huo ;gai mei shui jie de wu de dong li xue can shu Kmhe vmfen bie wei 0.229mmol/Lhe 9.346μmol/(L·min);yun yong hua xue xiu shi fa fen xi fa xian er liu jian 、an ji 、zu an suan mi zuo ji he se an suan yin duo ji jun shi NAGasede huo xing bi xu ji tuan ,er jing an suan gua ji ze bu shi ji huo xing bi xu ji tuan .
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自厦门大学学报(自然科学版)的陈晓佳,孙林浩,袁阳,黄小红,张伟妮，发表于刊物厦门大学学报(自然科学版)2019年05期论文，是一篇关于尼罗罗非鱼论文,乙酰氨基葡萄糖苷酶论文,纯化论文,酶学性质论文,活性必需基团论文,厦门大学学报(自然科学版)2019年05期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自厦门大学学报(自然科学版)2019年05期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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