龙牙百合组织培养的优化研究

龙牙百合组织培养的优化研究

论文摘要

通过采用回归的最优设计进行试验处理方案设计,对龙牙百合组织培养体系进行优化,并分析影响龙牙百合组织培养各环节因素,从而得到最佳培养条件。用顶芽、幼叶、茎段和鳞片为外植体,进行小鳞茎和芽的诱导、继代增殖、生根结鳞茎诱导以及组培苗假植移栽等方面试验,试验结果如下:1初代诱导培养采用饱和D—最优设计研究6-BA和NAA浓度配比对鳞片、茎段和叶片诱导的影响,应用SAS 8.2统计分析软件依据试验结果建立多项式回归方程,并对6-BA和NAA进行单效应分析和互作相应分析,再应用Qbasic寻优软件进行寻优,得到各外植体诱导的最佳培养基。诱导鳞片产生小鳞茎的最佳培养基为:MS+6-BA1.5 mg/L+NAA0.5 mg/L,诱导小鳞茎鳞片产生丛生芽的最佳培养基为:MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.25mg/L,诱导茎段产生丛生芽的最佳培养基为:MS+6-BA2.40mg/L+NAA0.25 mg/L,诱导叶片产生丛生芽的最佳培养基为:MS+6-BA2.50 mg/L+NAA0.25 mg/L。用附加不同浓度的6-BA和NAA的MS为培养基对顶芽进行诱导,结果表明,较适宜的培养基为:MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2mmg/L。2芽的继代增殖培养以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA和KT单因素以及6-BA和NAA配合使用对龙牙百合丛生芽进行继代增殖培养,发现6-BA单独使用效果最好,应用Qbasic对其结果进行运算建立回归方程,并寻优得6-BA最佳浓度为1.0 mg/L,增殖系数为5.02/30 d。3生根结鳞茎的诱导培养以1/2 MS为基本培养基,添加不同浓度白糖,结果发现,白糖的浓度与结鳞茎呈正相关,糖浓度为6%时,结鳞茎数最多;与生根呈负相关,糖浓度太高,苗的移栽成活率低。当糖浓度为6%时,改变1/2 MS培养基中KH2PO4含量,发现在KH2PO4用量为5.1g/L时,对试管苗生根结鳞茎有促进作用,结鳞茎的时间缩短,鳞茎直径比较大。以改良1/2MS为基本培养基,添加6%蔗糖,采用311—A最优混合设计对NAA、IBA和IAA浓度进行试验方案设计,根据试验结果,应用SAS 8.2统计软件建立多项式回归方程,应用Excel进行单效应和互作效应分析,再应用Qbasic寻优软件进行寻优,得到生根结鳞茎的最佳培养基为:1/2 MS+NAA0.33 mg/L+IBA0.27 mg/L+IAA0.30 mg/L+6%蔗糖。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1 前言
  • 1.1 食用百合品种特性
  • 1.2 食用百合的营养价值和药用价值
  • 1.3 国内外研究进展
  • 1.3.1 外植体选择的研究
  • 1.3.2 外植体的灭菌方法研究
  • 1.3.3 基本培养基对百合组织培养各阶段的影响研究
  • 1.3.4 初代诱导培养研究
  • 1.3.5 继代增殖培养研究
  • 1.3.6 生根结鳞茎培养研究
  • 1.3.7 组培苗移栽研究
  • 1.3.8 统计方法在植物组织培养上的应用研究
  • 1.4 研究本课题的目的和意义
  • 2 材料与方法
  • 2.1 试验材料
  • 2.1.1 供试材料
  • 2.1.2 其他试剂
  • 2.2 试验方法
  • 2.2.1 外植体材料的选取与预处理
  • 2.2.2 灭菌处理
  • 2.2.3 培养基
  • 2.2.4 初代诱导培养方法及试验处理方案设计
  • 2.2.4.1 外植体的选择
  • 2.2.4.2 鳞片的小鳞茎诱导试验处理方案及方法设计
  • 2.2.4.3 小鳞茎鳞片的丛生芽诱导试验处理方案及方法设计
  • 2.2.4.4 顶芽的丛生芽诱导试验处理方案设计
  • 2.2.4.5 带腋芽茎段的丛生芽诱导试验处理方案及方法设计
  • 2.2.4.6 叶片的不定芽诱导试验处理方案及方法设计
  • 2.2.5 继代增殖培养试验处理方案及方法设计
  • 2.2.6 生根结鳞茎培养试验处理方案及方法设计
  • 2.2.6.1 糖浓度对龙牙百合组培苗生根结鳞茎影响的试验设计
  • 2PO4对龙牙百合组培苗生根结鳞茎影响的试验设计'>2.2.6.2 KH2PO4对龙牙百合组培苗生根结鳞茎影响的试验设计
  • 2.2.6.3 生长素对龙牙百合组培苗生根结鳞茎影响试验处理方案及方法设计
  • 2.2.7 炼苗假植移栽
  • 2.2.8 组织培养条件
  • 2.3 数据统计与分析
  • 3 结果与分析
  • 3.1 灭菌效果
  • 3.1.1 鳞片的灭菌效果
  • 3.1.2 顶芽、茎段和叶片灭菌效果
  • 3.1.3 采样季节对灭菌效果及腋芽萌发的影响
  • 3.1.4 小结
  • 3.2 初代诱导试验结果与分析
  • 3.2.1 外植体的选择
  • 3.2.1.1 不同季节鳞茎对小鳞茎诱导影响
  • 3.2.1.2 不同位置的鳞片对小鳞茎诱导的影响
  • 3.2.2 鳞片诱导小鳞茎试验结果与分析
  • 3.2.2.1 数据的统计分析
  • 3.2.2.2 6-BA和NAA浓度诱导小鳞茎的单效应分析
  • 3.2.2.3 6-BA和NAA对小鳞茎诱导的交互效应分析
  • 3.2.2.4 计算机模拟寻优
  • 3.2.2.5 验证试验
  • 3.2.3 小鳞茎诱导丛生芽试验结果与分析
  • 3.2.3.1 数据的统计分析
  • 3.2.3.2 6-BA和NAA诱导丛生芽的单效应分析
  • 3.2.3.3 6-BA和NAA对小鳞片诱导丛生芽的交互效应分析
  • 3.2.3.4 计算机模拟寻优
  • 3.2.3.5 验证试验
  • 3.2.4 顶芽的丛生芽诱导试验结果与分析
  • 3.2.5 茎段的丛生芽诱导试验结果与分析
  • 3.2.5.1 数据的统计分析
  • 3.2.5.2 6-BA和NAA浓度诱导茎段产生丛生芽的单效应分析
  • 3.2.5.3 6-BA和NAA交互效应分析
  • 3.2.5.4 计算机模拟寻优
  • 3.2.5.5 验证试验
  • 3.2.6 叶片的不定芽诱导试验结果与分析
  • 3.2.6.1 数据的统计分析
  • 3.2.6.2 6-BA和NAA诱导叶片产生不定芽的单效应分析
  • 3.2.6.3 计算机模拟寻优
  • 3.2.6.4 验证试验
  • 3.2.7 小结
  • 3.3 继代增殖培养
  • 3.3.1 6-BA与NAA配合使用对增殖系数影响
  • 3.3.2 KT对丛生芽继代增殖培养的影响
  • 3.3.3 6-BA对增殖系数的影响
  • 3.3.4 数据的统计分析和寻优
  • 3.3.4.1 数据的统计分析
  • 3.3.4.2 计算机模拟寻优
  • 3.3.5 小结
  • 3.4 生根结鳞茎培养试验结果与分析
  • 3.4.1 糖浓度对生根结鳞茎的影响
  • 2PO4对龙牙百合组培苗生根结鳞茎的影响'>3.4.2 KH2PO4对龙牙百合组培苗生根结鳞茎的影响
  • 3.4.3 生长素对生根结鳞茎影响的试验结果与分析
  • 3.4.3.1 数据的统计分析
  • 3.4.3.2 NAA、IBA和IAA诱导结鳞茎的单效应分析
  • 3.4.3.3 NAA、IBA和IAA生根诱导的单效应分析
  • 3.4.3.4 NAA、IBA和IAA诱导结鳞茎的交互效应分析
  • 3.4.3.5 计算机模拟寻优
  • 3.4.3.6 验证试验
  • 3.4.4 小结
  • 3.5 炼苗假植移栽
  • 4 讨论与结论
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附录 A
  • 附录 B
  • 相关论文文献

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