论文摘要
通过采用回归的最优设计进行试验处理方案设计,对龙牙百合组织培养体系进行优化,并分析影响龙牙百合组织培养各环节因素,从而得到最佳培养条件。用顶芽、幼叶、茎段和鳞片为外植体,进行小鳞茎和芽的诱导、继代增殖、生根结鳞茎诱导以及组培苗假植移栽等方面试验,试验结果如下:1初代诱导培养采用饱和D—最优设计研究6-BA和NAA浓度配比对鳞片、茎段和叶片诱导的影响,应用SAS 8.2统计分析软件依据试验结果建立多项式回归方程,并对6-BA和NAA进行单效应分析和互作相应分析,再应用Qbasic寻优软件进行寻优,得到各外植体诱导的最佳培养基。诱导鳞片产生小鳞茎的最佳培养基为:MS+6-BA1.5 mg/L+NAA0.5 mg/L,诱导小鳞茎鳞片产生丛生芽的最佳培养基为:MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.25mg/L,诱导茎段产生丛生芽的最佳培养基为:MS+6-BA2.40mg/L+NAA0.25 mg/L,诱导叶片产生丛生芽的最佳培养基为:MS+6-BA2.50 mg/L+NAA0.25 mg/L。用附加不同浓度的6-BA和NAA的MS为培养基对顶芽进行诱导,结果表明,较适宜的培养基为:MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2mmg/L。2芽的继代增殖培养以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA和KT单因素以及6-BA和NAA配合使用对龙牙百合丛生芽进行继代增殖培养,发现6-BA单独使用效果最好,应用Qbasic对其结果进行运算建立回归方程,并寻优得6-BA最佳浓度为1.0 mg/L,增殖系数为5.02/30 d。3生根结鳞茎的诱导培养以1/2 MS为基本培养基,添加不同浓度白糖,结果发现,白糖的浓度与结鳞茎呈正相关,糖浓度为6%时,结鳞茎数最多;与生根呈负相关,糖浓度太高,苗的移栽成活率低。当糖浓度为6%时,改变1/2 MS培养基中KH2PO4含量,发现在KH2PO4用量为5.1g/L时,对试管苗生根结鳞茎有促进作用,结鳞茎的时间缩短,鳞茎直径比较大。以改良1/2MS为基本培养基,添加6%蔗糖,采用311—A最优混合设计对NAA、IBA和IAA浓度进行试验方案设计,根据试验结果,应用SAS 8.2统计软件建立多项式回归方程,应用Excel进行单效应和互作效应分析,再应用Qbasic寻优软件进行寻优,得到生根结鳞茎的最佳培养基为:1/2 MS+NAA0.33 mg/L+IBA0.27 mg/L+IAA0.30 mg/L+6%蔗糖。
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摘要Abstract1 前言1.1 食用百合品种特性1.2 食用百合的营养价值和药用价值1.3 国内外研究进展1.3.1 外植体选择的研究1.3.2 外植体的灭菌方法研究1.3.3 基本培养基对百合组织培养各阶段的影响研究1.3.4 初代诱导培养研究1.3.5 继代增殖培养研究1.3.6 生根结鳞茎培养研究1.3.7 组培苗移栽研究1.3.8 统计方法在植物组织培养上的应用研究1.4 研究本课题的目的和意义2 材料与方法2.1 试验材料2.1.1 供试材料2.1.2 其他试剂2.2 试验方法2.2.1 外植体材料的选取与预处理2.2.2 灭菌处理2.2.3 培养基2.2.4 初代诱导培养方法及试验处理方案设计2.2.4.1 外植体的选择2.2.4.2 鳞片的小鳞茎诱导试验处理方案及方法设计2.2.4.3 小鳞茎鳞片的丛生芽诱导试验处理方案及方法设计2.2.4.4 顶芽的丛生芽诱导试验处理方案设计2.2.4.5 带腋芽茎段的丛生芽诱导试验处理方案及方法设计2.2.4.6 叶片的不定芽诱导试验处理方案及方法设计2.2.5 继代增殖培养试验处理方案及方法设计2.2.6 生根结鳞茎培养试验处理方案及方法设计2.2.6.1 糖浓度对龙牙百合组培苗生根结鳞茎影响的试验设计2PO4对龙牙百合组培苗生根结鳞茎影响的试验设计'>2.2.6.2 KH2PO4对龙牙百合组培苗生根结鳞茎影响的试验设计2.2.6.3 生长素对龙牙百合组培苗生根结鳞茎影响试验处理方案及方法设计2.2.7 炼苗假植移栽2.2.8 组织培养条件2.3 数据统计与分析3 结果与分析3.1 灭菌效果3.1.1 鳞片的灭菌效果3.1.2 顶芽、茎段和叶片灭菌效果3.1.3 采样季节对灭菌效果及腋芽萌发的影响3.1.4 小结3.2 初代诱导试验结果与分析3.2.1 外植体的选择3.2.1.1 不同季节鳞茎对小鳞茎诱导影响3.2.1.2 不同位置的鳞片对小鳞茎诱导的影响3.2.2 鳞片诱导小鳞茎试验结果与分析3.2.2.1 数据的统计分析3.2.2.2 6-BA和NAA浓度诱导小鳞茎的单效应分析3.2.2.3 6-BA和NAA对小鳞茎诱导的交互效应分析3.2.2.4 计算机模拟寻优3.2.2.5 验证试验3.2.3 小鳞茎诱导丛生芽试验结果与分析3.2.3.1 数据的统计分析3.2.3.2 6-BA和NAA诱导丛生芽的单效应分析3.2.3.3 6-BA和NAA对小鳞片诱导丛生芽的交互效应分析3.2.3.4 计算机模拟寻优3.2.3.5 验证试验3.2.4 顶芽的丛生芽诱导试验结果与分析3.2.5 茎段的丛生芽诱导试验结果与分析3.2.5.1 数据的统计分析3.2.5.2 6-BA和NAA浓度诱导茎段产生丛生芽的单效应分析3.2.5.3 6-BA和NAA交互效应分析3.2.5.4 计算机模拟寻优3.2.5.5 验证试验3.2.6 叶片的不定芽诱导试验结果与分析3.2.6.1 数据的统计分析3.2.6.2 6-BA和NAA诱导叶片产生不定芽的单效应分析3.2.6.3 计算机模拟寻优3.2.6.4 验证试验3.2.7 小结3.3 继代增殖培养3.3.1 6-BA与NAA配合使用对增殖系数影响3.3.2 KT对丛生芽继代增殖培养的影响3.3.3 6-BA对增殖系数的影响3.3.4 数据的统计分析和寻优3.3.4.1 数据的统计分析3.3.4.2 计算机模拟寻优3.3.5 小结3.4 生根结鳞茎培养试验结果与分析3.4.1 糖浓度对生根结鳞茎的影响2PO4对龙牙百合组培苗生根结鳞茎的影响'>3.4.2 KH2PO4对龙牙百合组培苗生根结鳞茎的影响3.4.3 生长素对生根结鳞茎影响的试验结果与分析3.4.3.1 数据的统计分析3.4.3.2 NAA、IBA和IAA诱导结鳞茎的单效应分析3.4.3.3 NAA、IBA和IAA生根诱导的单效应分析3.4.3.4 NAA、IBA和IAA诱导结鳞茎的交互效应分析3.4.3.5 计算机模拟寻优3.4.3.6 验证试验3.4.4 小结3.5 炼苗假植移栽4 讨论与结论致谢参考文献附录 A附录 B
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