G蛋白偶联受体介导雄激素对前列腺癌细胞快速作用的非基因组机制

G蛋白偶联受体介导雄激素对前列腺癌细胞快速作用的非基因组机制

论文摘要

目的:体外研究G蛋白偶联受体介导的雄激素(双氢睾酮,DHT)对人前列腺癌PC3细胞内Ca2+水平及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)活性产生的快速非基因组效应,并探讨其机制。方法:应用钙荧光指示剂Fura-2/AM检测细胞内钙离子浓度([Ca2+]i);Western blot方法检测MAPK家族成员(ERK1/2、JNK和p38)的活化水平;MTT assay检测DHT快速作用对细胞增殖的影响。结果:DHT可以在一定范围内浓度依赖性地诱导PC3细胞[Ca2+]i快速升高,而且也能快速诱导ERK1/2、JNK的磷酸化,但是对p38的磷酸化却表现为快速的抑制作用;当细胞外无Ca2+或使用L-型钙离子通道阻断剂预处理细胞,DHT不能诱导这种快速效应;用AR拮抗剂醋酸环丙氯地孕酮预处理细胞,对该快速效应无影响;用蛋白合成抑制剂放线菌酮预处理细胞,DHT仍能诱导[Ca2+]i快速升高;用睾酮-牛血清白蛋白复合物(短期内不能穿过细胞膜)刺激细胞,仍能诱导[Ca2+]i快速升高;用G蛋白抑制剂百日咳毒素或GDPβs预处理细胞,能明显阻断DHT诱导的快速效应;DHT短暂的脉冲式刺激对PC3细胞的增殖具有一定的促进作用。结论:雄激素对前列腺癌细胞存在着由细胞膜G蛋白偶联受体(GPCR)介导的快速非基因组效应。雄激素通过GPCR能促使细胞膜L-型电压门控通道开放,引起胞外Ca2+内流,导致胞内Ca2+浓度的快速升高,然后进一步引起MAPK激酶活性的快速变化。DHT通过非基因组作用快速调节MAPK激酶活性可能是其促进PC3细胞增殖的机制之一。这种雄激素快速作用的非基因组机制可能在前列腺癌的恶性演变过程中扮演着一个重要的角色,同时对前列腺癌的治疗也具有重要的临床价值。

论文目录

  • 英文缩写
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  • 第一部分 雄激素对前列腺癌 PC3细胞内游离钙离子浓度快速诱导作用的非基因组机制
  • 前言
  • 材料和方法
  • 结果
  • 讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 第二部分 DHT通过非基因组途径对前列腺癌 PC3细胞内MAPK激酶活性的快速调节作用及其对细胞增殖的影响
  • 前言
  • 材料和方法
  • 结果
  • 讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 综述
  • 参考文献
  • 致谢
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