玉米光温敏自交不亲和系HE97的亲和性研究及自交不亲和基因的定位

论文摘要

本试验从多个方面对玉米光温敏自交不亲和材料HE97进行了研究。通过分期播种,进行了光温敏自交不亲和材料HE97亲和性转换区间的研究,依据田间跟踪调查叶龄及室内考种研究了HE97亲和性转换区间的光温临界值,结果表明:1)日最低温度是影响HE97自交不亲和性的主要原因,亲和性转换区间在16.5℃～18.1℃之间。2)通过HE97自交和姊妹交以及将HE97与郑58作为双亲,各自的花丝一分为二,分别正反交,授粉后4个小时分别取其花丝进行固定、染色,观察花粉管的伸长情况,根据结实率与花粉管伸长的对应关系,结果发现观察到花粉管的对应植株收获到了种子,而没有观察到花粉管的对应植株结实率极低或没有结实,本研究把HE97初步划为孢子体自交不亲和类型。3)以HE97为母本,87-1为父本,按4母:1父行比,通过花粉直感效应研究天然异交率,结果母本HE97结实良好（62%）,其中自交粒（白粒）占70%,异交粒（黄粒）占30%,结合花丝切片观察表明,亲和花粉的萌发及受精会导致落在同一果穗柱头上不亲和花粉的萌发不再受抑制。这一现象要求对信号传导进行详细系统的研究,以揭示其中的奥秘。4)通过对（HE97×昌7—2）、（昌7—2×HE97）、（HE97×87—1）、（87—1×HE97）、（HE97×郑58）、（郑58×HE97）的6个群体的F2、BC1、BC2群体收获后进行室内考种和卡方测验,选择（HE97×郑58）F2自交群体作为基因定位群体,从600多对SSR引物中筛选出第2染色体上的p-nc133和p-umc2032两对引物与自交不亲和基因相连锁,该基因与p-nc133的遗传距离为26.243,与p-umc2032的遗传距离为19.682。

论文目录

• 中文摘要
• 1 文献综述
• 1.1 交不亲和性的概述
• 1.2 自交不亲和性的机理研究
• 1.2.1 细胞学生物学研究
• 1.2.2 生理生化研究
• 1.2.3 分子生物学研究
• 1.2.3.1 孢子体型自交不亲和分子生物学研究
• 1.2.3.2 配子体型自交不亲和分子生物学研究
• 1.3 自交不亲和性的确定及鉴定方法
• 1.3.1 亲和指数法
• 1.3.2 荧光显微法
• 1.3.3 等电聚焦电泳法
• 1.3.4 免疫测定法
• 1.3.5 限制性酶切片段长度多态性分析法
• 1.3.6 关于未来自交不亲和性测定方法的展望
• 1.4 自交不亲和的克服方法
• 1.5 展望
• 2 引言
• 3 材料与方法
• 3.1 材料来源
• 3.2 研究方法
• 3.2.1 玉米自交不亲和系的生态学机制研究
• 3.2.2 玉米光敏自交不亲和系亲和类型的确定
• 3.2.3 自交不亲和材料的亲和率和天然异交率的研究
• 3.2.4 自交不亲和基因的定位
• 3.2.5 具体的实验方法
• 3.2.5.1 DNA的提取
• 3.2.5.2 PCR扩增
• 3.2.5.2.1 PCR反应体系
• 3.2.5.2.2 PCR反应程序
• 3.2.5.3 扩增产物检测
• 3.2.5.4 花丝的解剖及染色
• 3 结果与分析
• 3.1 HE97自交不亲和属性的确定
• 3.2 HE97亲和性转换的影响因子的确定及转换区间的划分
• 3.2.1 亲和性转换区间在播期上的划分
• 3.2.2 HE97的亲和性转换因子及温光临界值
• 3.3 HE97花丝切片观察及自交不亲和类型分析
• 3.4 HE97姊妹交和天然杂交的结实情况
• 3.4.1.HE97的天然异交率
• 3.4.2 HE97姊妹交结实情况分析
• 3.5 自交不亲和基因定位结果分析
• 4 结论与讨论
• 4.1 结论
• 4.2 讨论
• 参考文献
• Abstract