不同玉米品种蛋白质指纹图谱和DNA指纹图谱的构建

论文摘要

玉米是我国主要粮食和饲料作物,在我国农业生产中占有非常重要的地位。玉米存在许多不同品种,其产量和品质有很大的差异。为了有效的鉴别品种,科学地保护和利用优良种质资源,本研究利用生化标记(盐溶蛋白)和分子标记技术(RAPD、ISSR)构建了十一个玉米品种的蛋白质指纹图谱和DNA指纹图谱,并进行了聚类分析。得到以下结果:1.优化了玉米种子盐溶蛋白的分离提取体系,在盐溶蛋白提取、凝胶电泳实验过程优化的基础上,得到了稳定清晰、分辨率较高的盐溶蛋白指纹谱带。2.建立了适于玉米的RAPD反应体系,筛选出三条引物,在DNA提取、PCR扩增、凝胶电泳等实验过程的优化基础上,得到了清晰、稳定、重复性好、分辨率较高的DNA指纹图谱。3.建立了适于玉米的ISSR反应体系,筛选出四条引物,分别得到稳定清晰的DNA指纹图谱。4.对三种技术得到的指纹图谱进行了聚类分析,得到了基本一致性的结果。5.蛋白质、DNA指纹图谱均可作为玉米品种分类鉴定的标准。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 玉米品种鉴定技术及方法
• 1.1.1 形态鉴定
• 1.1.2 生化鉴定
• 1.1.3 DNA 分子标记鉴定
• 1.2 指纹图谱技术在农作物品种鉴定中的应用
• 1.2.1 绘制新品种的指纹图谱，保护专利权
• 1.2.2 分析、检验品种的真实性及纯度
• 1.2.3 品种的亲缘关系和分类研究
• 1.3 本论文的立题意义和研究目的
• 2 材料和方法
• 2.1 试验材料
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 蛋白质标记
• 2.2.2 DNA 分子标记
• 3 结果与分析
• 3.1 蛋白质标记
• 3.1.1 电泳条件的改进
• 3.1.2 图谱分析
• 3.1.3 统计分析
• 3.2 DNA 分子标记
• 3.2.1 DNA 提取液质量及浓度检测结果
• 3.2.2 RAPD 引物筛选及扩增结果
• 3.2.3 ISSR 引物筛选及扩增结果
• 3.2.4 玉米品种指纹图谱的构建
• 4 讨论
• 4.1 实验过程中的一些方法和问题
• 4.1.1 玉米种子盐溶蛋白提取及电泳
• 4.1.2 关于玉米材料总 DNA 的提取及模板的制备
• 4.1.3 RAPD 与ISSR 反应稳定性及影响因素
• 4.1.4 污染问题
• 4.1.5 关于引物的筛选
• 4.2 多态性条带的选择
• 4.3 玉米品种的指纹图谱
• 4.4 盐溶蛋白标记、RAPD 和 ISSR 分子标记的一致性
• 5 结论
• 5.1 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 作者简介