论文摘要
本文研究了在不同双水相体系中各种维生素B（维生素B1或维生素B 2或维生素B 6）的萃取最佳条件,并结合荧光法对其进行测定。主要探讨了酸度、萃取剂的种类和用量、萃取时间等影响萃取率的因素,且在最佳萃取条件时进行荧光扫描确定最佳激发/发射峰。本课题要解决的关键问题有:双水相体系的确立及最佳萃取条件的优化选择,主要内容如下:1.建立一种分离、测定痕量维生素B2的新方法。先用聚乙二醇--硫酸铵双水相体系萃取富集维生素B2,然后于λex /λem=448.0/526.0nm处测有机相的荧光值。聚乙二醇6000-硫酸铵双水相体系对维生素B2的一次性萃取率在91%93%之间,线性范围8.52×10-61.5×10-4g/L,检出限为7.0×10-6g/L。该方法萃取率高、线性范围宽、检出限低,可用于维生素B2的分析测定。2.建立一种分离、测定痕量维生素B6的新方法。先用聚乙二醇--硫酸铵双水相体系萃取富集维生素B6,然后于λex /λem=325/398nm处测有机相的荧光值。聚乙二醇6000-硫酸铵双水相体系对维生素B6的一次性萃取率在95%以上,线性范围6.0×10-63.0×10-5g/L,检出限为6.0×10-6g/L。该方法萃取率高、检出限低,可用于维生素B6的分析测定。3.建立痕量维生素B1的的双水相萃取与荧光测定。用钼酸钠作为维生素B1的氧化剂,取适量氧化后的硫胺荧加入已盛有一定量聚乙二醇6000、柠檬酸三钠和缓冲液的分液漏斗中,振荡静置后分离上下相,在最佳激发/发射波长310nm/441 nm处测定有机相的荧光强度。在4.0×10-42.0×10-2 ug/ mL的线性范围内,维生素B1的回归方程y=52.79+21.86x,该方法检出限为0.46 ng/mL,回收率为96.3%103.8%,相对标准偏差为0.8%1.5%。本方法具有操作简单,准确、灵敏的特点,适用于痕量维生素B1的测定。4.寻求稳定性好、灵敏度高的双水相体系测定痕量维生素B6。以聚乙二醇与聚乙烯吡咯烷酮的协同增敏作用提高痕量维生素B6的分析灵敏度。在最佳条件下,本实验测定维生素B6的线性范围为8.0×10-42.4×10-2 ug/mL,检出限:0.6 ng/mL,回收率88.4398.78%。与单一高聚物双水相比较,组合双水相体系具有稳定性强,盐的用量少,灵敏度高等特点。5.基于离子液在盐的作用下能够形成双水相,用于目标物质的萃取,提出了离子液-硫酸铵双水相萃取、荧光测定痕量维生素B6的新方法。本实验探讨了影响维生素B6萃取率的主要因素,如酸度、萃取剂的用量、时间等。在最适条件下,即λex/λem =342nm/418nm,pH=8.69,离子液和硫酸铵的用量分别为1.3mL、2.8g,萃取3min时体系测定维生素B6的线性范围为1.6×10-71.04×10-5g/L ,检出限4.8×10-7g/L。6.根据高聚物的强富集作用及荧光猝灭法灵敏度高等特点,提出了双水相萃取、荧光猝灭法测定痕量维生素B2的新方法。主要研究了萃取剂、萃取时间、酸度、铬蓝黑的浓度、猝灭时间等因素的影响,并探讨了利用维生素B2猝灭铬蓝黑R的机理。实验表明,在最佳条件下,聚乙二醇辛基苯基醚硫酸铵体系对维生素B2的一次萃取率可达到98%,利用该方法测定维生素B2的线性范围为:6.0×10-87.2×10-6g/L;回归方程:ΔF=0.22+2.94C;相关系数为0.9989;检出限:4.1×10-8g/L。该方法用于样品测定的相对标准偏差在2.95.8%之间。与维生素B2的其它分析方法比较,本方法具有检出限低,线性范围宽,低毒环保等优点。