人脂肪干细胞移植对兔眼视网膜裂孔修复作用的研究

人脂肪干细胞移植对兔眼视网膜裂孔修复作用的研究

论文摘要

目的:观察人脂肪源性干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)移植入兔眼视网膜裂孔模型眼内,对裂孔修复的影响及眼内干细胞分化情况。方法:新西兰白兔20只,取左眼,行玻璃体切除,制作直径约1.5mm的视网膜裂孔模型。一组动物于玻璃体腔内裂孔表面移植ADSCs 20μl或10μl;另一组注入等量生理盐水作为对照。分别于术后第2、4、8、12、20、32日行三维OCT检查,观察裂孔修复情况。术后第12日、32日取出兔眼,行组织学及人细胞核、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、视紫红质N端残基表位Opsin、蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC)抗原的免疫荧光检测。结果:三维OCT及眼底检查示两组视网膜裂孔在术后第4日有修复组织出现,对照组修复组织随时间延长逐渐增多,至20日后不再变化,裂孔中心组织最终厚度薄于正常视网膜。免疫荧光染色显示裂孔处细胞主要为GFAP阳性细胞,Opsin,PKC抗原阴性。ADSCs移植组裂孔修复组织生长迅速,修复组织量大,至术后12日不再变化,20μl ADSCs移植组裂孔组织明显隆起,远高出正常视网膜,其中一眼有增殖膜生成。10μl ADSCs移植组,修复组织稍隆起,无增殖膜出现。免疫荧光染色显示裂孔处修复细胞主要为GFAP抗原阳性细胞,尚有少量细胞Opsin或PKC抗原阳性。受体眼内有抗人细胞核单克隆抗体(anti-human nuclei monoclonalantibody,HuNu)染色阳性细胞存在,并可表达GFAP或Opsin或PKC抗原。结论:玻璃体切除兔眼视网膜裂孔模型,术后短期裂孔能够自我修复,修复细胞主要为神经胶质细胞。人ADSCs玻璃体腔内裂孔部位移植,促进了受体自身细胞增殖,并促使受体眼修复细胞向感光细胞或双极细胞分化。在兔眼内视网膜损伤的环境中ADSCs亦可向感光细胞或神经胶质细胞或双极细胞分化。

论文目录

  • 英文缩写
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 前言
  • 实验材料
  • 实验动物
  • 主要仪器设备
  • 主要试剂
  • 实验方法
  • (一) 人ADSCs体外培养
  • (二) 兔眼视网膜裂孔模型制作及ADSCs移植
  • (三) 术后监测
  • 实验结果
  • (一) 体外细胞培养及鉴定
  • (二) 三维OCT及眼底图像
  • (三) 组织学及免疫荧光检查
  • 讨论
  • (一) 关于实验方法的讨论
  • (二) ADSCs移植组与对照组视网膜裂孔修复情况比较
  • (三) 临床应用前景及展望
  • 结论
  • 参考文献
  • 综述
  • 特发性黄斑裂孔修复机制研究与治疗方法疗效比较
  • 致谢
  • 相关论文文献

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