虎杖组织培养物中白藜芦醇和虎杖苷的代谢调控、生物转化及其提取液抗肿瘤活性筛选研究

虎杖组织培养物中白藜芦醇和虎杖苷的代谢调控、生物转化及其提取液抗肿瘤活性筛选研究

论文摘要

虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.)为多年生蓼科草本植物,在我国广泛分布于秦岭以南地区,根或根茎入药。药理学研究表明,虎杖中所含的白藜芦醇和虎杖苷,是具有多种药理作用的活性化合物,被誉为“二十一世纪最有前途的抗癌药物之一”。目前市售的白藜芦醇和虎杖苷主要是从野生虎杖中提取,极易造成资源匮乏。为了实现该药用植物资源的可持续利用,本人系统地开展了虎杖的生物技术研究,包括组织培养、遗传转化、活性成分的代谢调控以及生物转化等,并对组织培养物提取液的抗肿瘤活性进行了初步筛选,取得的主要结果如下:1建立了虎杖快速无性繁殖体系通过植物组织培养的方法,建立了适宜扩大培养的无性繁殖体系流程,可在短期内持续收获优质虎杖种苗。筛选并确定了诱导幼芽分化的培养基为MS+0.05mg/L TDZ+0.5mg/L NAA;促进幼苗生长的培养基为MS+0.1mg/L CPPU+1.0mg/L NAA+0.5%活性炭;快速生根及壮苗的培养基为1/2MS+1.0mg/L NAA+0.5%活性炭。以无菌组培苗幼芽为起始材料,经过器官增殖培养途径,2~3周内可获得发育良好的完整植株,繁殖系数为57,炼苗移栽成活率为100%。2成功诱导愈伤组织并建立了细胞悬浮培养体系茎段比叶柄、叶片更容易诱导愈伤组织的形成,诱导培养基为MS+0.5mg/L CPPU+0.2mg/L NAA。愈伤组织增殖培养基为SH+0.05mg/L TDZ+1.0mg/L NAA。受到光照、培养基组成等条件的影响,愈伤组织在继代过程中可形成生长速度、形态特征以及有效成分含量不同的品系。选取黑暗条件下生长旺盛、结构疏松的白色愈伤组织,经过摇瓶培养和反复继代筛选,分离获得了胚性的细胞悬浮培养系。3实现了虎杖毛状根的高频诱导与离体优化培养利用发根农杆菌Ri质粒遗传转化技术,首次实现了虎杖毛状根的高频诱导。以毛状根的诱根率和诱根密度作为转化效率的评价指标,探讨了

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 英文缩写
  • 研究论文 虎杖组织培养物中白藜芦醇和虎杖苷的代谢调控、生物转化及其提取液抗肿瘤活性筛选研究
  • 引言
  • 第一部分 药用植物虎杖的组织培养技术研究
  • 前言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 附图
  • 附表
  • 讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 第二部分 虎杖毛状根的诱导、离体培养及其活性物质的代谢调控和生物转化研究
  • 第一节 虎杖毛状根的高频诱导
  • 前言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 附图
  • 附表
  • 讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 第二节 虎杖毛状根的离体培养及其活性物质的代谢调控研究
  • 前言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 附图
  • 附表
  • 讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 第三节 虎杖毛状根的生物转化研究
  • 前言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 附图
  • 讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 第三部分 虎杖愈伤组织和细胞培养物的生长及其活性物质的代谢研究
  • 前言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 附图
  • 附表
  • 讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 第四部分 虎杖组织培养苗和人工栽培苗中活性物质的代谢调控及生物转化研究
  • 前言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 附图
  • 附表
  • 讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 第五部分 虎杖不同组织培养物提取液抗肿瘤活性筛选研究
  • 前言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 附图
  • 讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 第六部分 转RS 基因虎杖毛状根的成分分析及抗肿瘤活性筛选研究
  • 前言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 附图
  • 附表
  • 讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 综述一 中草药资源可持续发展与利用的研究概况
  • 综述二 白藜芦醇及其苷类化合物的研究进展
  • 致谢
  • 个人简历
  • 相关论文文献

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