论文摘要
目的:1、研究六味地黄丸(liuweidihuang pills)对原代培养的人牙周膜细胞生物学活性的影响。2、研究六味地黄丸(liuweidihuang pills)对大鼠实验性牙周炎模型的牙周组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、BGP表达的影响。方法:1、利用组织培养技术,从健康的牙周组织中获得牙周膜细胞。在体外培养人牙周膜细胞的基础上,采用噻唑蓝(MTT)比色法、酶动力学方法探讨六味地黄丸对原代培养的人牙周膜细胞增殖活性、碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。2、在成功建立大鼠实验性牙周炎模型的基础上,实验动物分别灌服六味地黄丸后第1、2、3、4周处死,取牙周组织标本作切片,行常规HE染色,观察牙周组织病理变化状况,并采用免疫组织化学法检测TNF-α、IL-1β、IL-6、BGP水平的变化。结果:1牙周膜细胞的生长情况原代培养细胞从组织块中游出时间为3-14天,镜下细胞呈长梭形或星形,胞突细长放射状排列,胞体丰满,胞浆均匀核圆形或卵圆形者为成纤维细胞;2对牙周膜细胞生长增殖的影响与对照组比较,10 g/L、20 g/L、50 g/L的六味地黄丸均能明显增强人牙周膜细胞增殖能力(P<0.05),呈剂量、时间依赖性。1 g/L在作用48小时与对照组比较有统计学意义。100 g/L的浓度与对照组比较无统计学意义;3、六味地黄丸对牙周膜细胞ALP活性的影响10g/L 20g/L 50g/L的六味地黄丸作用72小时细胞培养液中ALP活性均明显高于对照组(P<0.05),而1g/L、100g/L与对照组比较无统计学意义;4牙周炎组牙周组织中TNF-α、IL-1β、IL-6表达明显高于正常组(P<0.05);BGP低于正常组(P<0.05),各时间段牙周炎治疗组牙周组织中TNF-α、IL-1β、IL-6表达明显低于牙周炎组(P<0.05),BGP高于牙周炎组(P<0.05)。并且,全身及局部的牙周组织的病理变化与对照组比较均有明显改善。结论:六味地黄丸在一定浓度范围内(10 g/L—50 g/L)能提高牙周膜细胞的增殖活性及ALP活性。大鼠实验性牙周炎模型牙周组织中TNF-α、IL-1β、IL-6含量较正常对照组明显升高,BGP含量较正常对照组明显降低。应用六味地黄丸能抑制实验性牙周炎模型牙周组织中TNF-α、IL-1β、IL-6的表达而促进BGP的表达。根据上述结果证实,六味地黄丸可促进创伤愈合和组织再生,从而为牙周病临床的合理用药提供科学依据。