芹菜素与曲昔匹特的分子印迹研究及色谱定量分析

论文摘要

分子印迹技术又称为分子烙印技术,它是指制备对某一特定的目标分子（印迹分子）具有预定选择性和特殊亲合性的技术。它在印迹分子存在的情况下,功能性单体与交联剂共聚制得高交联的聚合物网络,移去印迹分子后获得在三维空间构象和结合位点上与某一特定分子（模板分子,印迹分子）完全互补的聚合物。近年来,该技术已广泛应用于色谱分离、抗体或受体模拟、生物传感器以及生物酶模拟和催化合成等诸多领域,并因此成为化学和生物学交叉的新兴领域之一,得到世界注目并迅速发展。研究的主要内容有:（1）介绍了分子印迹技术及高效液相色谱法的原理、方法、应用及展望;（2）采用本体聚合法合成芹菜素分子印迹聚合物。紫外光度法证明了模板分子与功能单体之间存在相互作用,并据此选择了聚合反应时合适的溶剂并推测出聚合物的印迹机理。傅立叶红外光谱仪测定了聚合物的结构特征。平衡结合实验研究了聚合物的吸附特性,结果表明,在所研究的浓度范围内(0.1 mmol·L-1～2.5 mmol·L-1),MIP的吸附量大于BP的吸附量,由Scatchard分析得聚合物对芹菜素的识别主要有两类结合位点,其离解常数KD和最大表观结合量Qmax分别为:2.52×10-4和0.54×10-3mol·L-1;2.65和18.89μmol·g-1。分子印迹聚合物呈现出空白聚合物没有的高选择性。（3）建立了新型胃药曲昔匹特胶囊的反相高效液相色谱分析方法。比较了内标法和外标法,内标法以茶碱对照品作为内标物,曲昔匹特在10～160μg·mL-1的范围内质量浓度与峰面积比呈现良好的线性关系,回收率在98.61%～99.91%之间,精密度相对标准偏差为1.35%。外标法中曲昔匹特在40～110μg·mL-1的范围内质量浓度与峰面积比呈现良好的线性关系,回收率在98.84%～100.00%之间,精密度相对标准偏差为1.33%。该方法准确可靠、灵敏度高、重现性好。（4）建立了凌宵花中芹菜素含量的测定方法。采用C18柱（5μm,150mm×4.6 mm）,流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液（50:50）,室温操作,检测波长336nm。在1.60～12.80 mg·L-1范围内,芹菜素进样量与峰面积响应值呈良好的线性关系,r=0.9998;回收率为98.19%～101.64%,RSD为1.46% （n=5）。方法简便,灵敏度高,重复性好,可用于凌宵花中黄酮类成分的含量测定。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 引言
• 1.1 分子印迹技术
• 1.1.1 分子印迹技术原理
• 1.1.2 分子印迹技术分类
• 1.1.3 分子印迹聚合物的制备
• 1.1.4 分子印迹聚合物的合成技巧
• 1.1.5 分子印迹聚合物的形态表征
• 1.1.6 吸附等温线和结合位点分布
• 1.1.7 分子印迹聚合物的应用
• 1.1.8 分子印迹技术目前存在的问题及发展现状
• 1.1.8.1 目前存在的问题
• 1.1.8.2 国内外现状
• 1.1.8.3 分子印迹聚合物的展望
• 1.2 高效液相色谱技术
• 1.2.1 高效液相色谱法特点
• 1.2.2 高效液相色谱法的分离原理
• 1.2.3 高效液相色谱法技术的应用
• 1.3 论文选题来源及研究内容
• 1.3.1 论文选题来源
• 1.3.2 主要研究内容
• 第2章 芹菜素分子印迹聚合物的合成及谱学研究
• 2.1 实验部分
• 2.1.1 试剂与仪器
• 2.1.2 紫外光谱实验
• 2.1.3 芹菜素印迹聚合物的制备
• 2.1.4 静态吸附实验
• 2.1.5 聚合物结构特征研究
• 2.2 结果与讨论
• 2.2.1 模板分子API 与功能单体AA 在不同溶剂中的的紫外吸收光谱分析
• 2.2.2 模板分子API 与功能单体AA 之间的配合作用
• 2.2.3 芹菜素印迹机理
• 2.2.4 印迹聚合物和非印迹聚合物对芹菜素的结合性质
• 2.2.5 红外光谱分析
• 2.3 小结
• 第3章 高效液相色谱法测定科芬奇胶囊中曲昔匹特含量的方法研究
• 3.1 实验部分
• 3.1.1 试剂与仪器
• 3.1.2 色谱条件
• 3.1.3 内标法
• 3.1.4 外标法
• 3.2 结果与讨论
• 3.2.1 标准曲线的测定
• 3.2.2 精密度实验结果
• 3.2.3 样品测定结果
• 3.2.4 加标回收率测定结果
• 3.2.5 检测波长的选择
• 3.2.6 内标物的选择
• 3.2.7 样品溶解时间的选择
• 3.2.8 流动相的优化
• 3.3 小结
• 第4章 反相高效液相色谱外标法测定凌宵花提取液中的黄酮含量
• 4.1 实验部分
• 4.1.1 试剂及仪器
• 4.1.2 色谱条件
• 4.1.3 溶液的制备
• 4.1.4 线性关系的考察
• 4.1.5 精密度试验
• 4.1.6 稳定性实验
• 4.1.7 重复性实验
• 4.1.8 加标回收试验
• 4.2 结果与讨论
• 4.2.1 标准曲线
• 4.2.2 精密度实验结果
• 4.2.3 稳定性试验结果
• 4.2.4 回收率实验结果
• 4.2.5 样品的测定结果
• 4.2.6 检测波长的选择
• 4.2.7 对照品的溶解
• 4.2.8 对照品的溶解
• 4.2.9 凌霄花中黄酮类成分的提取
• 4.2.10 色谱分离
• 4.3 小结
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历、在校期间发表的学术论文与研究成果