大承气汤动物含药血浆对Cajal间质细胞三磷酸肌醇受体表达的影响

论文摘要

背景:中药药代动力学是研究中药有效成分在体内的吸收、分布、代谢和排泄等动态变化规律的一门边缘学科。通过对中药活性成分体内动态变化规律的研究可以阐明其作用机理并用现代科学对中药传统理论进行解释。通过掌握其体内的吸收、分布、代谢和排泄特点,可以拟定合理的给药方案,促进临床合理用药,提高临床治疗水平。大承气汤为通里攻下法代表方剂,在治疗胃肠运动障碍性疾病方面有显著疗效。大黄素、厚朴酚为其主要药效成分,参与调节细胞内钙库动员,促进信号传导,加强胃肠运动。胃肠动力是维持人体正常消化功能的一个重要因素,表现为慢波驱动下胃肠道节律性收缩运动,任何影响胃肠道正常收缩与舒张的因素皆可导致胃肠动力障碍。Cajal间质细胞（Interstitial cells of cajal,ICC）是胃肠基本电节律（basic electric rhythm,BER）的起搏与调节者,胃肠自主神经与平滑肌联系的中介,是胃肠运动产生与调控的关键,与众多胃肠动力紊乱性疾病以及胃肠道肿瘤的发病有关。因此,研究ICC起搏电位产生及调控机理十分重要。ICC细胞内质网钙库上Ryanodine受体（Ryanodine receptor, RyR）和三磷酸肌醇受体（Inositol 1,4,5-trisphosphate receptor,IP3R）受体依赖型钙离子通道在ICC起搏电位的产生过程中发挥重要作用。内质网钙库离子通道释放和调节机制成为研究热点。大承气汤为通里攻下法代表方剂,在治疗胃肠运动障碍性疾病有显著疗效。大黄素、厚朴酚为其主要药效成分,参与调节细胞内钙库动员。目的:观察大承气汤有效成分大黄素、厚朴酚在Wistar大鼠体内的药代动力学过程,建立一种Wistar大鼠灌服大承气汤动物含药血浆冻干粉的制备方法。并探讨大承气汤动物含药血浆对大鼠胃肠Cajal间质细胞（ICC）三磷酸肌醇受体（IP3R）mRNA表达的影响。方法:采用RP-HPLC法测定Wistar大鼠灌服大承气汤药液后大黄素、厚朴酚两种成分不同时段动物体内各组织和体液中药物的浓度,并用3P97药代动力学软件计算其在血浆中的药代动力学参数。在动态监测血药浓度曲线基础上优选采样时间,采集分离血浆,制备含药血浆冻干粉,以RP-HPLC检测有效成分保存效率。制备大承气汤动物含药血浆,作用于Wistar大鼠空肠ICC细胞,RT-PCR检测IP3R受体mRNA表达变化。结果:建立的方法能够很好地分离大黄素和厚朴酚这两种成分,浓度-色谱响应间线性相关系数均>0.999,平均加样回收率>90%;两种成分在大鼠体内代谢符合一级消除动力学二室开放模型, Tmax分别为1.38h和0.27h,T1/2β为30.68h和6.68h,T1/2ka为0.65h和0.093h;血浆蛋白结合率分别为74.56%和65.63%。RP-HPLC检测证实,经长期保存动物血浆冻干粉较低温冷冻保存动物血浆在有效成分含量有显著提高（P<0.05）。大鼠空肠ICC细胞3型IP3R mRNA均有表达,含药血浆组较空白培养液组明显增加（P<0.05）,高浓度组较低浓度组有显著差异（P<0.05）。结论:单剂量灌服大承气颗粒冲剂后,大黄素与厚朴酚吸收较好,进入体内后主要分布于胃肠内,进入循环后以肝代谢和肾排泄为主。存在肝肠循环。大承气汤动物血浆冻干粉较传统动物含药血浆在有效成分含量维持上有显著优势。大承气汤动物含药血浆可显著增强大鼠小肠ICC IP3R mRNA表达,并存在量效依赖关系。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 第一部分 灌服大承气汤大鼠体内药代动力学研究
• 一、实验材料
• 二、实验方法
• 三、数据分析
• （五） 第二部分 大承气汤动物含药血浆对 Cajal 间质细胞三磷酸肌醇受体 mRNA 表达的影响
• 一、实验材料
• 二、实验方法
• 三、数据分析
• （六） 结果
• （七） 讨论
• （八） 结论
• （九） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢
• 四、缩略语表