齿叶白鹃梅叶的化学成分及药理作用研究

论文摘要

目的:探讨齿叶白鹃梅（Exochorda serratifolia S.Moore.）叶对正常和糖尿病小鼠糖耐量的影响以及对链尿佐菌素（STZ）诱导糖尿病小鼠的降糖作用;对齿叶白鹃梅叶进行化学成分的分离与结构鉴定;建立齿叶白鹃梅叶含量测定方法;对齿叶白鹃梅不同部位中的总黄酮含量以及化学成分进行对比分析;研究大孔树脂对齿叶白鹃梅叶中总黄酮成分的富集工艺。材料与方法:材料:齿叶白鹃梅叶:采于朝阳省凌源县,经辽宁中医药大学植物教研室王冰教授鉴定为齿叶白鹃梅（Exochorda serratifolia S.Moore.）叶。方法:1.采用腹腔注射链脲佐菌素（150mg·kg-1 ）诱导小鼠造成糖尿病模型;观察齿叶白鹃梅叶水提和80%醇提物对正常小鼠和糖尿病小鼠糖耐量的影响;观察齿叶白鹃梅叶水提和80%醇提物对糖尿病小鼠血糖值的影响。2.采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备液相和重结晶等方法对齿叶白鹃梅叶进行化学成分的分离;根据化合物的理化性质和波谱数据对分离得到的化合物进行结构鉴定。3.采用高效液相色谱法,测定齿叶白鹃梅叶中芹菜素-7-O-β-D-新橙皮糖苷和芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量;采用分光光度法,以芦丁为对照品,建立齿叶白鹃梅叶总黄酮的含量测定方法。4.采用紫外分光光度法测定齿叶白鹃梅不同部位总黄酮的含量以及采用高效液相梯度洗脱的方法对其进行化学成分的分析和比较。5.采用大孔树脂法对齿叶白鹃梅叶中的总黄酮进行富集纯化工艺研究。考察不同型号的树脂,确定适宜的树脂类型;优选上样浓度、洗脱剂浓度等工艺参数,确定最佳工艺条件。结果:1.糖耐量实验表明齿叶白鹃梅叶水提和80%醇提物均能降低正常和糖尿病小鼠餐后1h和2h血糖,并且齿叶白鹃梅叶水提物对糖尿病小鼠餐后2h血糖具有显著降低作用（P<0.05）;降血糖药理实验表明齿叶白鹃梅叶水提物高剂量与80%醇提取物高剂量均能降低STZ致糖尿病小鼠的血糖,且齿叶白鹃梅叶水提高剂量组的降糖作用优于齿叶白鹃梅叶80%醇提高剂量组的降糖作用。2.从齿叶白鹃梅叶中分离得到二十三个化合物,鉴定了其中十九个化合物的结构（其余四个化合物为长链不饱和脂肪酸）,分别为:β-谷甾醇（1）,十八碳酸单甘油酯（2）,齐墩果酸（3）,熊果酸（4）,芹菜素（5）,原儿茶酸（6）,木犀草素（7）,槲皮素（8）,胡萝卜苷（9）,芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷（10）,槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（11）,芹菜素-7-O-β-D-新橙皮糖苷（12）,反式对羟基桂皮酸（13）,顺式对羟基桂皮酸（14）,（5-oxo-2,5-dihydrofuran-3-yl） methyl （2E）-3-（4-hydroxyphenyl） acrylate（15）,（5-oxo-2,5-dihydrofuran-3-yl） methyl （2Z）-3-（4-hydroxyphenyl） acrylate（16）,咖啡酸（17）,芦丁（18）,槲皮素-7-O-β-D-新橙皮糖苷（19）。化合物15和化合物16为新化合物,其余化合物均为首次从该植物中分离得到。3.建立了齿叶白鹃梅叶的含量测定方法。采用高效液相色谱法测定芹菜素-7-O-β-D-新橙皮糖苷和芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量:其线性范围分别是1.424-5.696μg（r=0.9996）和0.17-1.02μg（r=0.9995）,平均回收率分别为98.1%（RSD=2.27%）和101.3%（RSD=2.28%）;采用分光光度法以芦丁为对照品测定总黄酮的含量:芦丁在5.6-22.4μg·mL-1（r=0.9998）范围内线性关系良好,平均回收率为97.77%,RSD=1.78%（n=3）。4.齿叶白鹃梅花的总黄酮含量略比叶中的含量高,且花与叶的总黄酮含量明显高于根与茎中的总黄酮含量;对其化学成分研究表明不同部位的HPLC图谱具有明显的区别,主要成分芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-β-D-新橙皮糖苷等含量差别很大。5.在大孔树脂富集总黄酮的工艺研究中,确定了树脂型号,优选了纯化工艺。结论:1.齿叶白鹃梅叶能改善正常和STZ糖尿病小鼠糖耐量,并具有一定的降糖作用。2.二十三个化合物均首次从此植物中分离得到,并分得两对顺反异构体,其中一对为新化合物。3. HPLC测定齿叶白鹃梅叶中芹菜素-7-O-β-D-新橙皮糖苷和芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量,此方法准确、可靠,可用于齿叶白鹃梅叶的质量控制;紫外分光光度法测定齿叶白鹃梅叶的总黄酮的含量,该方法简便、准确、可靠,可作为该植物中总黄酮含量检测的方法。4.通过对齿叶白鹃梅不同部位的HPLC分析以及总黄酮的含量测定,可以比较化学成分的差异。5.通过D101型大孔树脂的分离纯化可使齿叶白鹃梅叶中的总黄酮含量达到60%左右。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献综述
• 参考文献
• 第一章 齿叶白鹃梅叶糖耐量以及降血糖的药理作用研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 第二章 齿叶白鹃梅叶化学成分的研究
• 第一节 化合物的分离与结构鉴定
• 第二节 化合物结构光谱数据
• 小结
• 第三章 齿叶白鹃梅叶质量控制方法研究
• 第一节 高效液相色谱法测定齿叶白鹃梅叶中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷及芹菜素-7-O-β-D-新橙皮糖苷的含量
• 第二节 分光光度法测定齿叶白鹃梅叶中总黄酮的含量
• 第四章 齿叶白鹃梅不同部位化学成分分析
• 第一节 齿叶白鹃梅不同部位总黄酮含量测定
• 第二节 齿叶白鹃梅不同部位化学成分分析
• 第五章 大孔吸附树脂富集齿叶白鹃梅叶总黄酮的工艺研究
• 1、 仪器与试药
• 2、方法与结果
• 结果与讨论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简介
• 附图