Apaf-1基因启动子甲基化与抑凋亡蛋白Apollon表达在成人急性白血病发生发展中的意义

论文摘要

目的通过对成人急性白血病Apaf-1基因启动子甲基化状态的研究,深入了解抑癌基因沉默在白血病发生发展中的意义。方法初治急性非淋巴细胞白血病（AML）28例,初治急性淋巴细胞白血病10例,复发15例,为2009年3月至2009年10月在山东大学千佛山医院血液科住院和门诊患者。诊断标准参照张之南主编的《血液病诊断及疗效标准》第三版,用甲基化特异性PCR法（MSP）测定Apaf-1基因启动子的甲基化状态,用RT-PCR检测研究对象白血病细胞Apaf-1表达水平,分析甲基化对Apaf-1表达水平的影响。统计学分析采用SPSS12.0软件包进行,结果用均数士标准差（x土s）表示,对计量资料t检验和方差分析,计数资料应用X2检验或fisher确切概率法。检验水准α=0.05。结果（1）正常对照组骨髓单个核细胞均未检测到Apaf-1基因启动子区域的甲基化,53例AL患者的甲基化阳性率33.9%（18/53）（图二）,（p<0.05）,差异有统计学意义,即病人与正常人之间Apaf-1基因启动子区域CpG岛甲基化阳性率不同,初治AL患者中AML 9例（32.1%）；ALL 3例（30%）；复发6例（40%）,3者差异无统计学意义（P>0.05）,即Apaf-1基因启动子区域CpG岛甲基化在AML患者、ALL患者与复发患者没有明显差异。10例对照组骨髓单个核细胞中只有1例表达缺失,其余均能检测到Apaf-1基因的表达,实验组Apaf-1基因启动子区域发生甲基化的患者均未检测到该基因的表达,甲基化组较非甲基化组Apaf-1 mRNA表达水平下降,差异有统计学意义（p<0.05）。实验组与对照组Apaf-1基因表达差异有统计学意义（p<0.05）结论Apaf-1基因启动甲基化使基因表达降低或缺失,可能是白血病发病机制之一。目的探讨Apaf-1基因启动子甲基化与Apollon蛋白表达的相互作用,深入了解两者在急性白血病发病发生发展中的相互作用。方法初治急性非淋巴细胞白血病（AML）28例,初治急性淋巴细胞白血病10例,复发15例,为2009年3月至2009年10月在山东大学千佛山医院血液科住院和门诊患者。诊断标准参照张之南主编的《血液病诊断及疗效标准》第三版,用淋巴细胞分离液分离实验组和对照组骨髓单个核细胞,取50ul单个核细胞悬液涂片,采用免疫细胞化学法（ICC法）检测抑凋亡蛋白Apollon的表达情况,同时进行组织病理学评分。并将实验组进行疾病类型、外周血白细胞数分组与Apaf-1基因甲基化状态进行相关性分析。结果实验组骨髓单个核细胞Apollon蛋白表达水平高于对照组（P<0.05）,而且在实验组中Apaf-1启动子存在甲基化的患者Apollon蛋白表达水平高于非甲基化患者,AL患者中Apaf-1基因启动子甲基化阳性率与Apollon蛋白表达呈正相关；外周血WBC>10×109/L的AL患者Apaf-1基因启动子甲基化阳性率与蛋白表达水平高于WBC<10×109/L患者,但（P>0.05）,差异无统计学意义,结论Apaf-1基因启动子的异常甲基化与抑凋亡蛋白Apollon的高表达在白血病的发生发展中起协同作用,共同促进了白血病的发生、发展。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 符号说明
• 第一部分:成人急性白血病Apaf-1基因启动子甲基化状态研究
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 附表
• 附图
• 参考文献
• 第二部分:Apaf-1基因启动子甲基化与Apollon蛋白表达水平相关性分析
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 附表
• 附图
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的论文
• 致谢
• 学位论文评阅及答辩情况表