宫颈鳞状细胞癌组织中cyclinB1、CDK1、P27的表达及其意义

论文摘要

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一,在全球妇女恶性肿瘤发病率中仅次于乳腺癌,处于第二位,其中绝大多数为鳞状细胞癌。虽然宫颈癌的早期诊断和治疗发展很快,但是近年来宫颈癌在一些国家和地区的发病率有增加的趋势,特别是向年轻化发展。正常细胞、癌细胞都是通过细胞周期而增生,只是细胞周期的调节在癌变中发生了改变。因此有必要从细胞周期上进一步探讨宫颈鳞癌的发病机制,以了解宫颈鳞癌的生物学行为,为临床指导治疗提供帮助。细胞周期的程序控制主要通过各种细胞周期蛋白（cyclin）、依赖细胞周期蛋白的蛋白激酶（cyclin dependent kinase,CDK）、细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制因子（cyclin dependent kinase inhibitor,CDI）的共同作用来实现。cyclin,因其在细胞周期连续合成不断积累而出现活性周期性变化而得名,是一组结构类似的蛋白质,统称为cyclin家族,目前已知有8种成员,即cyclinA,B,C…H。每一种cyclin有若干亚型。它们作为调节亚基,通过对功能蛋白的磷酸化修饰,控制细胞周期的进行。cyclinB1是细胞周期G2/M限制点的主要调控元件之一。CDK是一组丝氨酸-苏氨酸（Ser-Thr）蛋白激酶,目前发现有7种成员,有不同程度的同源性,故称CDK家族,各成员命名为CDK1,2,3…7。CDK含催化亚基,但需要cyclin提供调节亚基才有活性,所以通常以cyclin- CDK复合物形式出现。CDK也能与CDI（细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制因子）结合,而抑制细胞周期。CDK1又称cdc2（cell division cycle gene）,研究认为cdc2编码蛋白就是CDK1,cyclinB-cdc2复合物是M期促进因子（M phase-promoting factor）或称成熟促进因子MPF（maturation-promoting factor）的重要组成部分。对驱动细胞进入M期至关重要,正因为cdc2作用重要,在1991年冷泉港实验室发起的一次细胞周期研讨会上决定把cdc2命名为CDK家族的第一号,即CDK1。CDI是CDK的抑制物,通过与CDK非共价结合而抑制CDK活性,参与细胞周期检查机制。哺乳动物细胞的CDI主要包括蛋白激酶4的抑制物（inhibitor ofCDK4,Ink4）、激酶抑制蛋白（kinase inhibition protein,Kip）等,Kip包括P21、P27、P57等。P27与cyclin-CDK结合成复合物,对后者有无抑制作用主要取决于P27的量,即所谓以化学剂量方式起作用,这是它的一个特点。P27作用的另一个特点是非特异性,可抑制所有CDK的活性。G0期细胞P27水平较高,从G0期到S期逐渐降低。P27主要受细胞外刺激诱导表达。有研究表明:将野生型P27基因导入肿瘤细胞可使细胞停滞于G0/G1。本研究通过免疫组化的方法,检测了18例正常宫颈组织、19例宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CINⅡ、Ⅲ级）组织、56例宫颈鳞癌组织中cyclinB1,CDK1,P27的蛋白表达情况,分析了其蛋白表达与宫颈癌临床病理因素的关系及宫颈鳞癌中三种蛋白表达之间的关系,探讨cyclinB1,CDK1,P27在宫颈癌发生发展中的作用及预后价值,为宫颈癌的基因治疗提供实验依据。方法1.用免疫组化的方法,检测了18例正常宫颈组织、19例宫颈上皮内瘤变（Ⅱ、Ⅲ级）组织、56例宫颈鳞癌组织中cyclinB1、CDK1,P27的蛋白表达情况,并分析了三者的蛋白表达与宫颈鳞癌临床病理因素的关系。同时分析cyclinB1,CDK1,P27蛋白表达间的相关性。2.统计学处理:数据采用SPSS12.0统计软件包进行统计分析。阳性率的比较用χ2检验及FISH确切概率法。相关分析采用Spearman等级相关。以α=0.05作为统计学检验的显著性水准。结果1.cyclinB1在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变（Ⅱ、Ⅲ级）组织、宫颈鳞癌中阳性表达率分别为11.1%（2/18）、42.9%（8/19）、76.8%（43/56）。cyclinB1阳性表达率在CIN高于正常组,鳞癌高于CIN和正常组织,其差异均具有统计学意义（P＜0.05）。2.CDK1在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变（Ⅱ、Ⅲ级）组织、宫颈鳞癌中阳性表达率分别为5.6%（1/18）、36.8%（7/19）、71.4%（40/56）,CDK1阳性表达率在CIN高于正常组,鳞癌高于CIN和正常组织,其差异均具有统计学意义P＜0.05)。3.P27在正常宫颈组织中表达率最高94.4%（17/18）,在宫颈鳞癌中表达率最低24.0%（12/56）表达率相比具有显著性差异（P＜0.05）。CIN中的阳性表达率为57.1%（12/19）,显著低于正常组织而高于癌组织,其差异均具有显著性意义（P＜0.05）。4.宫颈鳞癌中cyclinB1、CDK1、P27的阳性表达与年龄、临床分期无关（P＞0.05）,而与病理分级关系显著（P＜0.05）,尤其是P27。cyclinB1在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级宫颈鳞癌中的阳性表达率分别是61.5%（6/13）、84.0%（21/25）和88.9%（16/18）。CDK1在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级宫颈鳞癌中的阳性表达率分别是46.2%（5/13）、80.0%（20/25）和83.3%（15/18）。P27在Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级宫颈鳞癌中的阳性表达率分别为46.2%（6/13）、20.0%（5/25）、5.6%（1/18）。cyclinB1、CDK1的表达与淋巴结转移无关（P＞0.05）,P27在有淋巴结转移的宫颈癌组织中的阳性率5%（1/20）显著低于无淋巴结转移的宫颈癌组织30.6%（11/36）（P＜0.05）。5.宫颈鳞癌中cyclinB1及CDK1联合表达率为57.1%（32/56）,但二者表达的相关性不明显（P＞0.05）。cyclinB1和P27二者表达呈负相关关系（r=—0.331,P＜0.05）。,CDK1和P27二者表达呈负相关关系（r=—0.344,P＜0.05）结论1.从宫颈正常上皮、CIN到鳞状细胞癌,cyclinB1,CDK1的表达依次升高而P27依次降低,提示三者参与了宫颈鳞癌的发生发展过程。2.宫颈癌中cyclinB1,CDK1、P27的阳性表达均与年龄和临床分期无关,但均与肿瘤的病理分级关系显著,P27的表达尚与淋巴结转移有关,提示cyclinB1、CDK1、P27的检测可作为评价宫颈癌患者生存及预后的指标。3.cyclinB1、CDK1、P27表达的相关性分析显示,cyclinB1、CDK1在鳞癌的表达均与P27呈负相关,提示三者在宫颈鳞癌的发生发展过程中起一定的协同作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 正文部分
• 宫颈鳞状细胞癌组织中cyclinB1、CDK1、P27的表达及其意义
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述部分
• 细胞周期蛋白B与P27在妇科肿瘤的研究进展
• 参考文献
• 附录部分
• 中英文缩略词对照表
• 攻读硕士期间发表论文情况
• 致谢