论文摘要
目的:1.了解依那西普（ETA）和英夫利西单抗（INF）对体外培养的类风湿关节炎（RA）成纤维细胞样滑膜细胞（FLS）的影响。2.评价单次膝关节腔内注射ETA对脊柱关节病（SpA）和RA导致的X线无中、重度骨破坏表现的膝关节炎的疗效和安全性。比较关节腔注射和皮下注射ETA对SpA膝关节炎的疗效差异。3.了解关节液中下列炎症相关指标与SpA和RA关节炎活动性的关系:TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10浓度、Th1/Th2比例以及高敏C反应蛋白（hs-CRP）水平。了解ETA对SpA和RA关节液中上述细胞因子浓度和Th1/Th2平衡性的影响。方法:1.体外培养RA患者FLS,应用WST-8比色法检测ETA和INF对FLS增殖的影响,应用流式细胞术观察ETA和INF是否能诱导FLS凋亡。2.进行单次膝关节腔内注射ETA治疗SpA和RA膝关节炎的随机、单盲、平行、阳性药（复方倍他米松）对照的临床试验。试验对象按2:1比例随机分为2组,分别给予目标膝关节腔注射25mg ETA或2ml复方倍他米松;观察4周;60例完成试验;主要疗效指标为改良HSS（Hospitalfor Special Surgery）膝关节评分。3.对膝关节较多积液的SpA和RA患者给予膝关节腔注射（11例SpA和13例RA）或皮下注射（11例SpA）25mg ETA,同时抽吸出5ml关节液,48h后评价其临床疗效并再次行关节腔穿刺抽吸出关节液;应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测其注射前后膝关节液中上述细胞因子的浓度;应用免疫散射比浊法检测其hs-CRP水平。结果:1.不同浓度ETA和INF作用24～72小时对FLS增殖的抑制率分别在1.0～17.9%和6.2～19.8%,10pmol/L ETA和INF未能诱导FLS凋亡。2.关节腔注射ETA或复方倍他米松均可使SpA和RA膝关节炎的多数疗效指标得到改善;ETA组对改良HSS膝关节评分、患者对膝健康状况VAS和医生对膝健康状况VAS的改善率大于复方倍他米松组（P=0.0409～0.0467）;不良事件:试验组8例（19.0%）,对照组8例（44.4%）。3.膝关节腔注射与皮下注射25mg ETA相比,48小时后对SpA膝关节炎的临床疗效指标、关节液白细胞和hs-CRP的改善率无明显差异。4.SpA膝关节炎改良HSS膝关节评分与关节液中细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10的浓度（P=0.0079～0.0319,r=0.4585～0.5506）及IFN-γ/IL-4比值（P=0.0678,r=0.3964）呈正线性相关,与关节液中hs-CRP水平呈负线性相关（P=0.0013,r=-0.6528）。对于关节液中上述细胞因子和IFN-γ/IL-4比值原为较高水平的SpA患者而言,ETA对其有降低作用;但对于细胞因子和IFN-γ/IL-4比值原为较低水平的SpA患者而言,ETA对其有升高作用。5.RA膝关节炎改良HSS膝关节评分和关节液细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6和IL-10的浓度及IFN-γ/IL-4比值无相关性。ETA降低了多数RA患者膝关节液的TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6和IL-10浓度。结论:1.ETA和INF在体外可以抑制RA患者FLS的增殖。2.单次膝关节腔内注射25mg ETA对于炎性膝关节炎是一种有效、安全的治疗选择,其疗效优于2ml复方倍他米松。膝关节腔注射与皮下注射25mg ETA48小时后对SpA膝关节炎的疗效相似。3.SpA关节炎活动性越强,关节液中TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6和IL-10浓度越低,hs-CRP水平越高。ETA对SpA关节液中上述细胞因子浓度起双向调节作用。4.ETA可降低多数RA患者的关节液TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6和IL-10浓度。
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