中国樱桃与甜樱桃杂交后代植株的组培快繁及鉴定

中国樱桃与甜樱桃杂交后代植株的组培快繁及鉴定

论文摘要

中国樱桃果个较小、果肉较软,甜樱桃果个大、果肉较硬。中国樱桃果实甜酸适口、风味浓郁;而甜樱桃果实甜度不够、风味偏淡,人们在食用口感上更偏爱中国樱桃。所以,利用中国樱桃优良的品质和甜樱桃个大、肉硬、相对耐贮藏的特性,把两种资源进行遗传改良和种质创新具有重要的意义。本试验进行了甜樱桃和中国樱桃果实性状的比较以及樱桃远缘杂交种组培快繁体系的研究。试验于2006~2007年在山东农业大学果树生物学实验室和山东农业大学泰安市横岭果树育种基地进行。以中国樱桃在泰安的一个地方类型和大樱桃的4个主要栽培品种“大紫”、“长把红”、“红灯”和“养老”的果实为试材,研究和比较了甜樱桃和中国樱桃果实的内在和外观品质。以山东农业大学果树生物学实验室经胚抢救获得的甜樱桃与中国樱桃的杂交种后代植株为试材,探讨了樱桃远缘杂交种的茎段起始培养、多丛芽增殖、生根培养与移栽,优化了樱桃茎段培养体系;初步建立了甜樱桃与中国樱桃的种间杂种组培快繁体系,为进一步的育种及有关研究提供了种质;并成功地将一批远缘杂种试管苗定植于大田,并采用RAPD、SSR分子标记等方法对杂种试管苗进行了鉴定。主要结果如下:1、甜樱桃不同品种之间,可溶性蛋白质含量没有显著差异,可溶性糖含量存在差异,以养老最高,达14.52%;中国樱桃可溶性蛋白质和可溶性糖含量均显著高于甜樱桃的4个品种。其中,中国樱桃可溶性蛋白质含量是甜樱桃的1.983.6倍,可溶性糖含量比甜樱桃高出3.64.7个百分点。2、在果实外观方面,甜樱桃中以红灯单果重最大为8.54g,果柄最短为2.58cm,果实纵横经比最小为0.77;中国樱桃品种泰小红樱果柄长1.885cm,显著短于甜樱桃,但单果重最小,为1.35 g。3、口感评价表明,甜樱桃中养老甜酸适中,其他几个品种酸甜;中国樱桃最甜,明显甜于甜樱桃,与可溶性糖含量相符合。4、樱桃远缘杂交种的外植体,以春季、当年生的新梢为佳,茎段用未木质化或半木质化的部分,其上的腋芽发育基本完成。外植体的灭菌采用2%次氯酸钠处理茎段12分钟,其灭菌综合效果较好。结果表明次氯酸钠的浓度越高,处理时间越长,对幼嫩组织的杀伤力越大,褐化程度越高。5、针对樱桃杂种茎段接种后细菌污染较重的现象,采用0.3 %新洁而灭处理茎段2分钟、再用2%次氯酸钠处理12分钟的多重灭菌,效果较好。对细菌的繁殖有明显的抑制作用。6、在无菌水、培养基(1/2MS+6-BA0.8mg·L-1+IAA0.1mg·L-1)中加10mg.L-1维生素C,对樱桃杂种茎段初代培养的褐变调控效果较好。7、筛选出1/2MS+6-BA0.8mg·L-1+IAA0.1mg·L-1+Vc10mg·L-1为初代培养基,有利于樱桃远缘杂种茎段腋芽的萌发与生长。8、1/2MS+6-BA0.5mg·L-1+IBA0.1mg·L-1既有利于减轻继代增殖过程中的玻璃化现象,又是樱桃远缘杂种多丛芽诱导与增殖的理想培养基,增殖系数为5.7,新梢生长量可达2.6cm。9、1/4MS+IBA0.5mg·L-1+PP3330.1mg·L-1生根效果明显好于1/2MS+IBA 0.2mg·L-1+Vc10mg·L-1以及MS+IBA0.5mg·L-1。生根多且健壮。选用有效叶5片以上的健壮苗,经驯化后,于10—11月移栽到温室内,移栽成活率可达95.3%以上。10、对茎段培养得到的樱桃远缘杂交种试管苗进行RAPD、SSR电泳谱带分析,结果表明所得苗木确系杂种。

论文目录

  • 中文摘要
  • Abstract
  • 引言
  • 1 问题的提出
  • 2 胚抢救技术在果树育种上研究与应用
  • 2.1 培育早熟桃、杏品种
  • 2.2 枣及其它果树育种
  • 2.3 培育无核葡萄品种
  • 2.4 培育三倍体及多倍体新种质
  • 2.5 克服远缘杂种不育
  • 2.6 打破种子休眠,缩短育种周期
  • 2.7 克服多胚品种珠心胚的干扰
  • 3 远缘杂种的鉴定与选择
  • 3.1 染色体鉴定
  • 3.2 同工酶鉴定
  • 3.3 分子鉴定
  • 3.4 形态鉴定
  • 4 植物组培快繁技术的研究进展
  • 4.1 培养条件的研究
  • 4.2 试管苗玻璃化现象研究
  • 4.3 组织培养过程中褐变现象的研究
  • 4.4 培养方式的研究
  • 4.5 樱桃组培快繁技术的研究
  • 5 本研究的内容与目标
  • 第一章 甜樱桃和中国樱桃果实性状的比较
  • 1 材料与方法
  • 1.1 材料
  • 1.2 试验方法
  • 1.2.1 单果重测定
  • 1.2.2 果柄长和果实纵横径比的
  • 1.2.3 可溶性蛋白质的测定
  • 1.2.4 可溶性糖含量测定
  • 1.2.5 果实裂果情况调查
  • 1.2.6 果实风味、品质的鉴评
  • 2 结果与分析
  • 2.1 不同品种果实可溶性蛋白质含量的差异
  • 2.2 不同品种果实可溶性糖含量的差异
  • 2.3 不同品种果实性状的差异
  • 2.4 不同品种果实裂果情况的差异
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 第二章 欧洲甜樱桃与中国樱桃杂交种快繁体系的建立
  • 1 材料与方法
  • 1.1 试验试材
  • 1.1.1 植物材料
  • 1.1.2 植物生长调节剂
  • 1.1.3 培养基基本成分
  • 1.2 实验方法
  • 1.2.1 杂种的茎段初代培养
  • 1.2.1.1 无菌外植体的获得
  • 1.2.1.2 次氯酸钠对外植体消毒的影响
  • 1.2.1.3 0.3%新洁而灭+2%次氯酸钠对外植体消毒的影响
  • 1.2.1.4 维生素C和活性炭对外植体(茎段)褐化的影响
  • 1.2.2 多丛芽诱导与增殖培养
  • 1.2.3 生根培养与移栽
  • 1.2.4 杂种的分子鉴定
  • 2. 结果与分析
  • 2.1 杂种茎段的初代培养
  • 2.1.1 次氯酸钠对外植体消毒的影响
  • 2.1.2 0.3%新洁而灭+2%次氯酸钠对外植体消毒的影响
  • 2.1.3 Vc和Ac对外植体褐化的影响
  • 2.2 多丛芽的诱导与增殖
  • 2.3 生根与移栽
  • 2.4 杂种的分子鉴定
  • 2.4.1 RAPD分析
  • 2.4.2 SSR分析
  • 3 讨论
  • 3.1 外植体的选择与消毒
  • 3.2 植物组织培养的褐变与调控
  • 3.3 关于外植体腋芽的萌发与生长
  • 3.4 关于多丛芽的诱导与增殖
  • 3.5 关于继代培养中的玻璃化现象
  • 3.6 关于壮苗与生根
  • 3.7 关于杂种后代的鉴定方法
  • 4结论
  • 参考文献
  • 附录
  • 致谢
  • 攻读硕士学位期间发表论文的目录
  • 相关论文文献

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