灵发素促进不定根形成的效应及机理研究

灵发素促进不定根形成的效应及机理研究

论文摘要

生长素(IAA)是学术界公认的促进不定根形成的主要激素,常用细胞分裂素(CTK),如6-BA,KT和ZT都是抑制不定根的形成和生长,灵发素(LFS)按化学结构和主要生物活性都应属于CTK,但它却又有与IAA相似的,促进不定根发生的活性。为探讨LFS促进不定根发生的机理,以绿豆、黄瓜、拟南芥和罗汉果等为试验材料,从生物学效应、形态解剖、酶活性和内源激素4个方面对LFS促进植物不定根发生的机理进行了研究,所获主要结果如下:1、LFS处理能够提高罗汉果、拟南芥组培苗和绿豆下胚轴、黄瓜插条的生根率、增加生根数和生根范围。LFS促进不定根形成具有明显的浓度效应和时间效应,在10-6~10-3mol·L-1的浓度范围内,以10-5mol·L-1促进绿豆插条生根的效果最好;而在处理时间方面以连续处理24h以上,或在插条离体后的12~24h进行处理,效果最好。2、绿豆下胚轴插条不定根原基由维管组织间的薄壁细胞分化而来,形成时期是插条离体后的48~72h。LFS处理插条不定根原基形成的部位与CK组的相同,但是发育进程比CK处理的更快。不定根的形成过程可分为5个阶段:0~12h为脱分化期;12~24为诱导期;24~48h为细胞分裂期;48~72h为根原基形成期;72~96h为根原基的生长和不定根形成期。3、IAAO、POD和PPO是与植物不定根的发生和发展有着密切关系的三种酶,能调节内源IAA水平。在不定根形成过程中,LFS处理可以降低插条生根部位的IAAO活性,提高POD和PPO的活性。4、LFS处理提高了插条生根部位的内源IAA、ABA含量,降低GA含量,对ZR含量无显著影响;LFS对绿豆插条内源IAA、ZR和ABA含量的影响与IBA相似,IAA/ZR、IAA/ABA在48h(不定根原基形成前期)和96h(不定根形成期)分别达到最大值。LFS促进不定根发生,其机理与内源IAA水平变化密切相关。在不定根形成的不同时期,LFS可能通过调节IAAO、POD和PPO活性,间接影响IAA代谢,提高插条内IAA的水平,同时调节插条内ZR、ABA的水平,使IAA/ZR在不定根原基形成前期,IAA/ABA在不定根形成期分别达到一个较高水平,从而促进不定根的发生。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1 前言
  • 1.1 灵发素的研究概况
  • 1.2 不定根发生的解剖学研究
  • 1.3 酶的活性与不定根形成的关系
  • 1.4 植物激素与不定根形成的关系
  • 1.4.1 生长素与不定根形成的关系
  • 1.4.2 细胞分裂素与不定根形成的关系
  • 1.4.3 脱落酸与不定根形成的关系
  • 1.4.4 赤霉素与不定根形成的关系
  • 1.4.5 IAA/ABA、IAA/ZR、ABA/GA与不定根形成的关系
  • 1.5 本研究的目的和意义
  • 2 材料与方法
  • 2.1 试验材料
  • 2.2 试验方法
  • 2.2.1 LFS促进不定根发生的效应
  • 2.2.1.1 拟南芥、罗汉果切段组培
  • 2.2.1.2 绿豆、黄瓜插条水培
  • 2.2.1.3 LFS不同浓度处理
  • 2.2.1.4 LFS不同时间长度及不同时期的处理
  • 2.2.1.5 IBA和6-BA处理
  • 2.2.2 添加TIBA处理
  • 2.2.3 解剖结构观察
  • 2.2.3.1 石蜡切片法
  • 2.2.4 酶活性的测定
  • 2.2.4.1 IAAO活性的测定
  • 2.2.4.2 POD活性的测定
  • 2.2.4.3 PPO活性的测定
  • 2.2.5 内源激素的测定
  • 2.2.5.1 样品中激素的提取
  • 2.2.5.2 ELISA法测定激素含量
  • 2.2.6 数据处理
  • 3 结果与分析
  • 3.1 LFS促进不定根发生的效应
  • 3.1.1 LFS处理对罗汉果、拟南芥组培苗不定根形成的影响
  • 3.1.2 LFS处理对绿豆下胚轴、黄瓜插条不定根形成的影响
  • 3.1.3 LFS不同浓度处理对不定根形成的影响
  • 3.1.4 LFS不同处理时间长度对不定根形成的影响
  • 3.1.5 LFS、IBA、6-BA对绿豆插条不定根形成的影响
  • 3.2 绿豆下胚轴不定根形成过程的形态解剖观察
  • 3.2.1 蒸馏水处理的绿豆下胚轴不定根形成的过程
  • 3.2.2 LFS处理的绿豆下胚轴不定根形成的过程
  • 3.2.3 LFS在不同时期处理的效果
  • 3.3 TIBA对LFS促进生根的影响
  • 3.4 LFS处理对绿豆插条酶活性的影响
  • 3.4.1 对IAAO活性的影响
  • 3.4.2 对POD活性的影响
  • 3.4.3 对PPO活性的影响
  • 3.5 LFS处理对插条内源激素水平的影响
  • 3.5.1 对IAA含量的影响
  • 3.5.2 对ZR含量的影响
  • 3.5.3 对ABA含量的影响
  • 3含量的影响'>3.5.4 对GA3含量的影响
  • 3.5.5 IAA/ZR的动态变化
  • 3.5.6 IAA/ABA的动态变化
  • 3的动态变化'>3.5.7 ABA/GA3的动态变化
  • 4 讨论
  • 4.1 LFS促进不定根发生的生物效应
  • 4.1.1 LFS促进绿豆,黄瓜,拟南芥和罗汉果生根的效应
  • 4.1.2 LFS促进不定根形成的浓度效应和时间效应
  • 4.2 不定根形成过程的形态解剖特点
  • 4.3 TIBA对LFS促进生根的影响
  • 4.4 LFS处理对插条IAAO、POD、PPO的影响
  • 4.5 LFS处理对插条内源激素水平的影响
  • 4.5.1 对IAA含量的影响
  • 4.5.2 对ZR含量的影响
  • 4.5.3 对ABA含量的影响
  • 3含量的影响'>4.5.4 对GA3含量的影响
  • 3值的动态变化'>4.5.5 IAA/ZR、IAA/ABA、ABA/GA3值的动态变化
  • 4.6 LFS促进生根与IAA的关系
  • 5 结论
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附录:
  • 相关论文文献

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