饲料中转基因成分对家蚕生长发育的影响

论文摘要

家蚕(Bombyx mori)属鳞翅目，蚕蛾科。是鳞翅目昆虫的模式生物，鳞翅目是昆虫中的第二大目。作为一种重要的经济绢丝昆虫，对于推动丝绸业、食品、医药等领域的发展起到了重要作用，同时家蚕也是遗传学研究的经典生物之一，本文探讨转基因饲料是否影响家蚕的经济性状和遗传性状。从转基因作物问世以来，转基因产品的安全性问题就一直是人们关注的热点。本文根据GenBank中登录的转基因大豆完整外源DNA序列设计了一对引物，对家蚕转基因饲料进行了定性检测。结果表明：家蚕转基因饲料为含抗草甘膦（Glyphosate resistance）基因饲料。利用转基因和非转基因饲料对家蚕进行连续三代饲养，对每一代进行每龄经过时间、全茧量、茧层量、茧层率、蛹体重、24h疏毛率、48h疏毛率、每龄死亡率、每龄眠起体重等经济性状的数据统计，并进行了单因素方差分析。同时采用PCR方法对转基因饲料饲养后家蚕组织中外源基因的表达情况进行了检测。结果显示，含转基因大豆粉的人工饲料对家蚕的生长发育并无显著影响，且不存在外源基因的污染。根据AFLP技术具有准确性高、灵敏度好、可重复性好、多态性强，且在短时间内能检测出DNA样品细微差别的优点。利用此技术对非转基因饲料饲养的家蚕及三代转基因饲料饲养的家蚕的基因组进行分析。结果显示：非转基因饲料与每一代转基因饲料饲养的家蚕基因组的AFLP图谱无明显差异。以上结果说明转基因饲料饲养家蚕是安全的，对其生长发育没有不利影响。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 目录
• 1 文献综述
• 1.1 转基因作物概况
• 1.1.1 转基因作物研究现状
• 1.1.2 转基因作物优势
• 1.1.3 转基因作物安全性问题
• 1.1.3.1 转基因作物环境安全性问题
• 1.1.3.2 转基因作物食品安全性问题
• 1.1.3.3 转基因作物中标记基因的安全性
• 1.1.4 安全评价与技术支撑体系
• 2 引言
• 2.1 研究的目的及意义
• 2.2 主要研究内容
• 2.2.1 转基因饲料的定性检测
• 2.2.2 转抗草甘膦饲料对家蚕饲养安全性评价的初步研究
• 2.2.3 转基因饲料饲育后家蚕组织中的外源基因检测
• 2.2.4 通过AFLP检测外源基因对家蚕基因组的影响
• 3 材料与方法
• 3.1 实验材料
• 3.2 仪器与试剂
• 3.2.1 主要实验仪器
• 3.2.2 主要生化试剂
• 3.2.3 常用溶液的配置
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 转基因大豆粉DNA的提取
• 3.3.2 转基因饲料的常规PCR定性检测
• 3.3.3 家蚕的饲养
• 3.3.4 不同饲育处理对家蚕经济性状指标的影响
• 3.3.5 家蚕组织的收集
• 3.3.6 家蚕基因组DNA的提取
• 3.3.7 提取基因组 DNA 的质量检测
• 3.3.8 转基因饲料饲育后家蚕各组织中的外源基因检测
• 3.3.9 利用 AFLP 技术检测外源基因对家蚕基因组的影响
• 3.3.9.1 模板组DNA的制备
• 3.3.9.2 基因组DNA的酶切
• 3.3.9.3 酶切片段的连接
• 3.3.9.4 模板DNA的扩增反应
• 3.3.9.5 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测
• 4 结果与分析
• 4.1 转基因大豆粉的DNA提取
• 4.2 转基因饲料中外源基因的定性检测
• 4.3 家蚕的饲育与观察
• 4.4 不同饲育处理后对家蚕经济性状指标的比较
• 4.5 家蚕各组织基因组DNA的提取
• 4.6 家蚕各组织中外源基因的检测
• 4.7 AFLP检测外源基因对家蚕基因组影响
• 4.7.1 模板DNA的制备
• 4.7.2 模板DNA的预扩增检测
• 4.7.3 扩增产物的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测
• 5 讨论
• 5.1 家蚕的饲养
• 5.2 转基因饲料对家蚕的饲育安全性评价
• 5.3 通过 AFLP 对外源基因的检测
• 6 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简介
• 读研期间发表的论文