论文摘要
目的利用3-甲基胆蒽（3-methylcholanthrene,3-MCA）及N-甲基-N-亚硝基脲（N-methyl-N-nitrosourea, MNU）诱导建立小鼠胃癌模型。分别于12周及20周检测小鼠外周血及脾细胞白细胞计数、CD3+CD4+CD8+T细胞亚群及CD4+ CD25+调节性T细胞（CD4+CD25+regulatory T cells, Treg）在小鼠胃癌模型建立过程中不同时期的水平变化特征。方法本实验采用六周龄、雄性、BALB/c小鼠以3-MCA挂线法于小鼠腺胃挂含有3-MCA线结联合MNU灌胃诱导小鼠胃癌。分别于12周及20周取血及脾细胞检测其白细胞计数、并通过流式细胞术（Flow Cytometries, FCM）检测其T细胞亚群及Treg水平,同时取胃标本切片行病理学检查胃癌发展情况。通过统计学方法分析所得数据。结果1.12周时25%小鼠出现腺胃部位的黏膜增厚及慢性炎症。20周时37.5%小鼠成功诱导出小鼠胃癌。对照组小鼠均未见黏膜增厚,慢性炎症或胃癌。2.实验组小鼠12周及20周时体重变化的降低与对照组相比均具有统计学意义（P<0.05）。3.实验组小鼠脾白细胞计数在20周的升高具有统计学意义（P<0.05）。4.实验组小鼠外周血Treg在20周时的升高有统计学意义（P<0.05）。脾Treg比例在12周及20周时的升高均有统计学意义（P<0.05）。脾Treg绝对值在12周时的降低、在20周时的升高均具有统计学意义（P<0.05）。5.实验组小鼠脾CD3+细胞在20周时的升高具有统计学意义（P<0.05）。脾CD4+细胞在20周时的降低具有统计学意义（P<0.05）。脾CD8+细胞在20周时的降低有统计学意义（P<0.05）。脾CD4+/CD8+比值在20周时的升高有统计学意义（P<0.05）。6.实验组小鼠脾CD3+细胞绝对值在20周时的升高具有统计学意义（P<0.05）。脾CD4+细胞绝对值在20周时的升高具有统计学意义（P<0.05）。结论1.MCA挂线法联合MNU灌胃法成功诱导小鼠胃癌。2.长期接触致癌物后可导致体重减轻,在停止致癌物攻击一段时间后体重的增长略有恢复,但无法恢复正常水平。如因长期接触致癌物后导致肿瘤可引起体重下降复。3.长期接触致癌物后可引起外周血白细胞计数的降低,即使停止致癌物攻击后外周血白细胞计数水平仍无法恢复正常水平,但脾白细胞计数呈现升高的趋势、原因可能与免疫系统淋巴细胞反应性增生有关。4.Treg在自身免疫调节中起作用,且在肿瘤的发生、发展过程中起重要作用。其过量表达在炎症时预防自身过度免疫反应造成自身组织损伤,而在肿瘤形成的过程中则抑制机体产生有效的抗肿瘤免疫应答、导致肿瘤免疫逃逸。5.T细胞亚群在胃癌诱导早期因炎症反应T细胞总数及CD4+细胞水平均有所升高,而因为Treg高表达预防过度免疫同时引起CD8+细胞减少。在胃癌诱导晚期部份成瘤小鼠因免疫功能受到影响导致T细胞总数及CD8+细胞减少,但仍因为炎症反应或肿瘤影响导致CD4+细胞的升高。
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