论文摘要
硒是人和动物健康生长必需的微量元素之一,适量的硒能调节生长、提高生产性能和机体免疫力、抗癌、抗氧化、抗应激、延缓衰老及拮抗某些毒物或有毒元素以及防治地方病等。近几年,研究发现亚硒酸钠（Sodium selenite,SS）有过氧化特性、毒性较大而生物利用率较低、对动物和环境可造成不良影响的缺点;而生物源性有机硒具有高生物利用率、低毒性和对环境污染小等优点。因此,应提倡并开发利用有机硒源硒。目前生产上应用的有机硒主要是富硒酵母,但由于富硒酵母的价格相对较高,其推广应用受到了一定的限制。富硒益生菌（Selenium-enriched probiotics,SP）制剂是本研究室根据生物转化的原理,应用益生菌将无机硒转化为有机硒的一种新型有机硒源制剂。它在蛋鸡上的应用研究也只是刚刚起步,鉴于此,本文从宏观水平、生理生化水平、细胞水平和分子水平等多方面比较了富硒益生菌（SP）和亚硒酸钠（SS）在蛋鸡生产上的应用效果,同时对相关机理进行了探索。试验1、富硒益生菌对蛋鸡生产性能、肝脏脱碘酶Ⅰ活性和血清T3、T4水平的影响将58周龄的健康罗曼蛋鸡800羽按试验要求分为8组,每组5个重复,每重复5茏,每笼4羽。将富硒益生菌（Selenium-enriched probiotics,SP）和亚硒酸钠（Sodiumselenite,SS）2种硒源分别以3个硒水平0.2,0.5和1.0mg·kg-1添加到基础日粮中组成6种试验日粮,基础日粮中添加益生菌作为益生菌对照,基础日粮作为空白对照,进行为期35d的饲养试验。结果表明:①富硒益生菌对蛋鸡生产性能有显著影响,而硒水平对蛋鸡生产性能没有显著影响;硒源和硒水平对蛋鸡肝脏IDⅠ酶的活性和蛋鸡血清T3、T4水平均有极显著的影响。②添加SP或益生菌均可提高蛋鸡产蛋率、日产蛋量和平均蛋重,降低料蛋比;③添加SS或SP均能提高蛋鸡肝IDⅠ酶的活性和血清T3水平,降低T4水平,特别是添加SP时,随着硒添加水平的升高,蛋鸡肝脏IDⅠ酶的活性和血清T3水平升高,血清T4水平则降低;而添加益生菌对蛋鸡肝IDⅠ酶的活性没有显著影响,却能显著提高血清T3水平,而降低T4水平。结果证实:添加SP的效果分别优于添加SS或益生菌。试验2、富硒益生菌对蛋鸡脾硒含量及免疫能力的影响试验设计同试验1。在试验的第14d采血样,在第28d时杀鸡取血样和脾脏,测定脾脏硒含量、蛋鸡外周血液T淋巴细胞的转化以及血清IL-2的水平。结果表明:硒源和硒水平对蛋鸡脾脏硒含量、外周血T淋巴细胞转化及血清IL-2的水平均有显著影响。日粮添加SS或SP均能显著提高脾硒含量、促进蛋鸡外周血T淋巴细胞的转化、提高蛋鸡血清IL-2的水平;随着硒添加水平的升高,脾硒含量、T淋巴细胞的转化和血清IL-2均显著增加;随着试验时间的延长,血清IL-2显著升高,且添加SP在提高脾硒含量和IL-2上要显著优于SS和益生菌;添加益生菌只有在试验的第28d时才显著提高蛋鸡血清IL-2的水平。试验3、富硒益生菌对蛋鸡血液硒含量及抗氧化能力的影响试验设计同试验1。在试验的第14d和28d采血样,测定蛋鸡血液的硒含量以及血液中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性和总抗氧化能力（T-AOC）。结果表明:硒源和水平对蛋鸡血液硒含量、GSH-PX活性和T-AOC均有显著影响;添加SS较添加SP能显著提高蛋鸡血液硒含量和GSH-PX活性,而添加SP较SS能显著提高蛋鸡血浆T-AOC;蛋鸡血液硒含量、GSH-PX活性和T-AOC均随着硒添加水平的升高而升高。结果证实:SP是蛋鸡较好的硒源。试验4、富硒益生菌对蛋鸡肝脏、肾脏和心肌组织硒含量及其抗氧化能力的影响试验设计同试验1。在试验结束时,每组每重复任取2羽鸡宰杀（n=10）,取肝脏、肾脏和心肌分别进行硒含量及其谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、过氧化氢酶（CAT）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性和总抗氧化能力（T-AOC）的测定。结果表明:补硒能提高蛋鸡肝脏、肾脏、心肌的硒含量以及GSH-PX、CAT、SOD的活性和T-AOC;且随着硒添加水平的升高,肝脏、肾脏争心肌的硒含量,GSH-PX活性均有显著增高;添加SP在提高肝脏和心肌硒含量的能力上和在提高肝脏、肾脏和心肌的GSH-PX活性、CAT活性以及肾脏的SOD活性和T-AOC的能力上要优于或显著优于SS;提倡在低中水平(0.2 mg·kg-1和0.5 mg·kg-1)添加SP硒。试验5、富硒益生菌对蛋鸡肝脏GPX-4酶和IDⅠ醇mRNA水平的影响试验设计同试验1。在试验结束时,每组每重复任取2羽鸡宰杀并取肝脏样（n=10）,应用实时荧光定量PCR方法测定肝组织中GPX-4和IDⅠ的mRNA水平。结果表明:硒源对蛋鸡肝脏GPX-4酶的mRNA水平没有显著影响,而硒水平能显著影响蛋鸡肝脏GPX-4酶的mRNA水平;硒源和硒水平对蛋鸡肝脏IDⅠ酶的mRNA的水平均有极显著的影响。添加硒可显著提高蛋鸡肝脏GPX-4酶和IDⅠ酶的mRNA水平,随着硒添加水平的升高,蛋鸡肝脏GPX-4酶的mRNA水平显著升高,而IDⅠ酶的mRNA水平极显著升高。添加SP较SS能显著提高蛋鸡肝脏IDⅠ酶的mRNA水平。试验6、富硒益生菌对蛋硒含量、蛋GSH-PX活性及蛋哈夫单位的影响将60周龄的健康罗曼蛋鸡240羽按试验要求分为8组,每组5个重复,每重复6羽。将2种硒源（SP和SS）分别以3个硒水平0.2,0.5和1.0 mg·kg-1添加到基础日粮中组成6种试验日粮,基础日粮中添加益生菌作为益生菌试验日粮,基础日粮作为空白对照,进行为期35d的饲养试验。在试验第30d,从各组每重复中任取4枚蛋用于蛋硒、蛋GSH-Px活性和哈夫单位的测定（n=20）。结果表明:硒源和水平对蛋硒均有极显著的影响,蛋硒含量随着日粮硒水平的升高而升高,且添加SP较SS更能提高蛋硒含量;硒源对蛋GSH-PX活性和哈夫单位均没有显著影响。无论添加SP或是SS均能显著提高蛋GSH-PX活性,能在不同程度上缓减蛋哈夫单位的下降,能在一定程度上延长蛋的保鲜期或货架寿命;蛋硒含量与蛋GSH-PX活性呈显著的正相关,而蛋GSH-PX活性与储存过程中蛋哈夫单位的下降呈显著的负相关。试验7、富硒酵母对蛋鸡组织硒分布及蛋硒含量的影响采用2×3因子完全随机设计,比较富硒酵母（Selenium-enriched yeast,SY）和亚硒酸钠（Sodium selenite,SS）对蛋鸡组织硒分布及蛋品中硒含量的影响。将2种硒源分别以3个硒水平0.2、0.5和1.0mg·kg-1添加到蛋鸡基础日粮,组成6组试验日粮,基础日粮作对照。将700羽健康罗曼蛋鸡按设计要求分为7组,每组5重复,每重复5笼,每笼4羽,进行为期28d的饲养试验。在试验期间,每隔7d从每组的每重复中收集2枚蛋样,在第0、14和28d采血样,在试验结束时,每组每重复任取2羽鸡宰杀（n=10）,取肝、脾、肾、心肌及胸肌,分别进行蛋硒和血硒及相关组织硒的测定。结果表明,与对照组相比,无论添加SY还是SS均能极显著提高蛋硒和血硒的含量,均能显著提高肝、脾、肾、心肌及胸肌的硒含量;硒源和硒水平对蛋硒、血硒及上述组织的硒含量均有极显著影响,添加SY较SS能显著提高蛋硒含量、脾硒含量和胸肌硒含量,而添加SS较SY能显著提高血硒及肾硒含量;硒在蛋鸡组织及蛋品中的含量由高到低依次为肝＞肾＞脾＞心肌＞蛋＞血＞胸肌。来源于SY的蛋和肉是一种有开发潜力的硒源。试验8、富硒酵母对鸡蛋硒分布及其存在形式的影响试验设计同试验7。在试验期间,每隔7d从每组的每重复中收集2枚蛋样用于蛋硒分布及其存在形式的分析。结果表明:①添加硒可提高全蛋、蛋黄和蛋清总硒和有机形态硒,且全蛋、蛋黄和蛋清总硒和有机形态硒均随着日粮硒添加水平的升高而升高。②添加硒对鸡蛋硒分布和存在形式的影响是一致的,且添加硒主要通过影响蛋清硒含量和硒存在形式来影响全蛋的硒含量和硒存在形式。③来源于SY的硒较SS硒能更多的沉积在蛋中,且大部分主要以有机硒蛋白沉积在蛋清中,而来源于SS的硒较SY硒更利于沉积在蛋黄中,且主要以有机硒蛋白形式存在。
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