论文摘要
目前,药物残留及抗生素滥用导致的耐药性等问题日益突出,研究开发新型安全的饲料添加剂成为当前普遍关注的热点。由微生物代谢合成的小分子蛋白或多肽物质(抗菌肽)具有抑制或杀灭多种致病菌和腐败菌的能力,并且具有安全、无毒、高效等特点,被认为是天然的生物防腐剂和良好的抗生素替代物,在食品领域和畜牧行业具有广阔的应用前景。本研究旨在将B. laterosporus S62-9所产抗菌肽制备成抗菌肽饲料添加剂,优化抗菌肽饲料添加剂的制备条件;研究抗菌肽制备成的抗菌肽饲料添加剂的稳定性,对肉鸡和蛋鸡进行抗菌试验,考察其对雏鸡生产性能的影响;同时进一步制备抗菌肽微生态制剂,并优化其产芽孢的条件。抗菌肽饲料添加剂优化后的吸附条件为:料液比6.5%(m/v),吸附温度45℃,吸附时间25 min,使抗菌肽饲料添加剂制备过程中的吸附率和抗菌肽饲料添加剂的单位效价有所提高。该抗菌肽饲料添加剂具有很强的稳定性,4℃冷藏60天后抑菌圈直径较未经冷藏处理组直径减少仅为0.24 mm,抑菌圈直径减小1.46%;100℃处理60 min抗菌肽饲料添加剂抗菌活性损失很小,且pH 4-8的试验组和对照组抑菌圈直径差仅在2.10-7.01 mm之间,抗菌效价损失很小;经胃蛋白酶、脂肪酶和过氧化氢酶处理后抗菌肽饲料添加剂抑菌圈直径减少率分别为32.0%、22.6%和0%,抗菌活性损失较小。蛋鸡功毒试验、肉鸡功毒试验和肉鸡大群饲养试验研究表明抗菌肽饲料添加剂对S. aureus ATCC 14458引起的病症具有一定的治疗效果,有助于提高雏鸡的存活率、体重并且有助于保护雏鸡的内脏器官,增强雏鸡自身免疫能力的作用。本研究制备了微生态抗菌肽制剂,对其发酵产芽孢的条件进行了优化,最终确定B. laterosporus S62-9产芽孢最优发酵条件为:发酵pH 7、发酵温度32℃、发酵时间48 h、发酵转速350 r/min。
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摘要Abstract第1章 绪论1.1 抗菌肽研究概况1.1.1 抗菌肽的发现1.1.2 抗菌肽作用机制的阐述1.1.3 抗菌肽微生态制剂的研究1.2 抗菌肽国内外研究进展及未来发展趋势1.2.1 产抗菌肽的菌种研究现状1.2.2 抗菌肽研究现状1.2.3 抗菌肽应用研究现状1.3 课题的研究内容和意义第2章 抗菌肽饲料添加剂的制备及其抗菌效果研究2.1 试验主要材料2.1.1 试验菌种及材料2.1.2 培养基2.1.3 试验主要试剂2.1.4 试验主要仪器设备2.2 试验方法2.2.1 抗菌肽抗菌效价的测定方法2.2.2 抗菌肽效价与抑菌圈直径的关系的确立2.2.3 抗菌肽饲料添加剂的制备2.2.4 抗菌肽抗菌特性研究2.2.5 抗菌肽饲料添加剂的吸附优化2.2.6 抗菌肽饲料添加剂稳定性研究2.3 结果与分析2.3.1 抗菌肽效价与抑菌圈直径关系的建立2.3.2 抗菌肽抗菌试验结果分析2.3.3 抗菌肽饲料添加剂吸附优化结果分析2.3.4 抗菌肽饲料添加剂稳定性研究结果分析2.4 本章小结第3章 抗菌肽饲料添加剂动物试验研究3.1 抗菌肽饲料添加剂对蛋鸡生长性能的研究3.1.1 试验动物及饲养条件3.1.2 试验菌种3.1.3 试验仪器3.1.4 试验分组3.1.5 试验方法3.1.6 结果与分析3.1.7 小结3.2 抗菌肽饲料添加剂对肉鸡生长性能的研究3.2.1 试验动物及饲养条件3.2.2 试验菌种3.2.3 试验仪器3.2.4 试验分组3.2.5 试验方法3.2.6 结果与分析3.2.7 小结3.3 抗菌肽饲料添加剂在大群肉鸡饲养中的应用研究3.3.1 试验动物及饲养条件3.3.2 试验场地3.3.3 试验分组3.3.4 试验仪器3.3.5 试验方法3.3.6 结果与分析3.3.7 小结3.4 本章小结第4章 抗菌肽微生态制剂的制备及其研究4.1 试验主要材料4.1.1 试验菌种4.1.2 培养基4.1.3 试验主要试剂4.1.4 试验主要仪器设备4.2 试验与方法4.2.1 菌种的培养4.2.2 微生态制剂抗菌特性的测定4.2.3 菌体生长曲线及菌体产芽孢率的测定4.2.4 摇床发酵优化B.laterosporus S62-9产芽孢的条件4.3 结果与分析4.3.1 微生态制剂抗菌特性测定结果与分析4.3.2 菌体生长曲线及产芽孢率的确定4.3.3 发酵pH对菌体产芽孢率的影响4.3.4 发酵温度对菌体产芽孢率的影响4.3.5 发酵时间对菌体产芽孢率的影响4.3.6 发酵转速对菌体产芽孢率的影响4.4 本章小结结论参考文献攻读硕士学位期间所发表的论文致谢
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