脉冲染料激光干预小鼠黄褐斑模型的实验研究

论文摘要

目的：通过脉冲染料激光（Pulsed Dye Laser，PDL）干预治疗小鼠黄褐斑动物实验模型，检测模型皮损区皮下血管及色素变化情况，探讨PDL对黄褐斑可能的治疗意义及作用机制。方法：健康雌性昆明种小鼠40只，分为两组，其中30只为模型组，10只为正常组。均剔除其背部毛发，面积约3*2cm2。模型组予以每日肌肉注射黄体酮（0.4%），5ml/kg体质量，同时以波长为320nm的中波紫外线照射小鼠裸露皮肤，一日1次,1次60分钟，共45日，观察其脱毛部位皮肤变化情况，制作小鼠黄褐斑动物模型。建模完成后，取模型组及对照组小鼠背部皮肤，行组织学检查及皮肤丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的检测，发现模型组皮肤MDA升高和SOD降低，皮肤表皮基底层黑色素增加，验证小鼠黄褐斑模型建立成功。建模成功后，将建模后小鼠分成三组，A组：即对照组；B组：PDL治疗一次组；C组：PDL治疗二次组。以PDL干预治疗其背部皮肤，取治疗前A组、B组治疗后一周、C组治疗后一周及C组治疗后一周的对照组背部皮肤，行组织病理学检查，HE染色观察皮肤的变化，ElivisionTMplus免疫组化方法用HMB45为一抗对皮肤黑素颗粒进行标记，CD34为一抗对皮肤皮下微血管进行标记。对比皮肤颜色变化、HE染色法、免疫组化法和图像分析法观测治疗前后皮肤血管密度的变化和皮肤黑色素细胞数量及形态的改变。将资料输入计算机以SPSSl3.0软件进行统计分析，以P<0.05为有统计学意义。结果：1、30只小鼠造模后，27只存活。据所拍照片实验区域皮肤颜色逐渐加深，HMB45免疫组化染色示皮肤黑色素表达显著增多；与造模前正常组相比，皮肤组织中SOD明显降低，MDA升高。2、以PDL对小鼠黄褐斑模型皮损区干预治疗后一周，结果显示：与对照组小鼠相比，小鼠皮下血管密度明显减少（P <0.05）；与此同时，激光干预治疗后其皮损区黑色素的表达水平也明显下降（P <0.05）；PDL两次治疗组皮下微血管及黑色素的减少更加明显。结论：1、雌激素注射并UVB照射可建立小鼠的黄褐斑模型。2、黄褐斑小鼠皮损区皮下血管较正常皮下血管明显增生。3、PDL针对小鼠黄褐斑模型的皮下血管进行干预治疗，血管中的血红蛋白受热凝固，而吸收的热可能扩散至血管周围的黑色素细胞，黑色素细胞受热引起凋亡，起到治疗黄褐斑的作用。

论文目录

• 英文缩写一览表
• 中文摘要
• Abstract
• 第一章 引言
• 第二章 材料和方法
• 2.1 实验动物
• 2.2 实验仪器
• 2.3 实验试剂
• 2.4 实验方法
• 2.5 统计学方法
• 第三章 结果
• 3.1 大体观察与建模后小鼠皮肤组织中 SOD 与 MDA 的水平
• 3.2 组织学观察
• 3.3 HMB45 免疫组化染色后黑色颗粒及 CD34 免疫组化染色后微血管表达的检测
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 参考文献
• 在读期间发表论文
• 致谢