论文摘要
[目的]1．观察大豆异黄酮联合长春瑞滨对兔VX2肿瘤组织皮下移植瘤模型的干预作用，并探讨肿瘤发生时氧化与抗氧化失衡的相互关系；2．建立兔VX2肿瘤细胞肺移植瘤模型，并观察其生物学特性与肿瘤生长的关系。[方法]1．采用兔VX2肿瘤组织悬液种植法（由中国第四军医大学附属唐都医院介入放射科张洪新副教授提供）在18只日本大耳白兔右侧后腿皮下建立VX2肿瘤组织皮下移植瘤模型。将模型制备成功后的18只日本大耳白兔随机分成3组，每组6只，分别为对照组（A组）：实验动物以基础饲料及自来水喂养；长春瑞滨干预组（B组）：实验动物以基础饲料及自来水喂养，并于种植VX2肿瘤组织悬液后第15天按2.5 mg／只剂量沿耳缘静脉注射长春瑞滨干预，第22天按2.0 mg／只剂量沿耳缘静脉注射长春瑞滨干预；长春瑞滨联合大豆异黄酮干预组（C组）：实验动物除按B组剂量给予长春瑞滨干预外，从种植VX2肿瘤组织悬液后第8天开始在基础饲料中按50 mg／kg／只／天剂量添加大豆异黄酮干预。全部实验动物从种植VX2肿瘤组织悬液1周后开始每周测量其右侧后腿皮下移植瘤的长径（a）和短径（b），计算并比较瘤体生长率（tumor growth rate，TGR）。于种植VX2肿瘤组织悬液第30天采血制备血浆检测超氧化物歧化酶（SOD）活力及丙二醛（MDA）含量，并处死动物观察肿瘤转移情况。2．无菌操作制备兔VX2肿瘤单细胞悬液，6只日本大耳白兔在清醒状态下分别沿右侧腋后线第7肋间注入活细胞数为1×107／ml的VX2肿瘤细胞悬液0.1 ml建立兔VX2肿瘤细胞肺移植瘤模型。观察实验动物生存期及肿瘤生成率，并采用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中凋亡相关基因bcl-2、bax蛋白的表达情况。[结果]1．18只日本大耳白兔于右后腿皮下种植VX2肿瘤组织悬液1周后均在注射部位形成可触及的实体瘤，成功率为100％。未发现兔VX2肿瘤组织后腿皮下移植瘤发生远处组织器官转移。2．兔VX2肿瘤组织皮下移植瘤模型动物在种植VX2肿瘤组织悬液第2周时喂饲大豆异黄酮的C组实验动物皮下移植瘤生长率较A组明显降低，P＜0.01。第2周开始应用长春瑞滨干预后，B组实验兔皮下移植瘤生长率较A组降低，P＜0.05；C组瘤体生长率较B组降低，P＜0.05，较A组明显降低P＜0.01。第3周应用长春瑞滨第2次干预后，B组及C组实验动物的皮下移植瘤生长率均较A组明显降低，P＜0.01；C组实验动物的皮下移植瘤生长率低于B组，但差异不显著，P＞0.05。3．与A组比较：B组实验兔血浆MDA含量明显升高，P＜0.01，SOD活力明显降低，P＜0.01；与B组比较：C组实验兔血浆MDA含量下降，P＜0.05，SOD活力升高P＜0.05。4．兔VX2肿瘤细胞肺移植瘤原位成瘤率为83.33％（5／6），生存期为35.4±3.78天。肿瘤组织可侵犯周边组织器官并发生远处器官转移。5．5例兔VX2肿瘤细胞肺移植瘤模型肿瘤组织中Bcl-2蛋白阳性表达4例（80％），Bax蛋白阳性表达1例（20％），二者阳性表达率比较未见显著性差异，P＞0.05。5例兔VX2肿瘤细胞肺移植瘤模型肿瘤组织中Bcl-2和Bax蛋白均阳性表达1例，均阴性表达1例。[结论]1．按50 mg／kg／只／天的剂量在饲料中添加大豆异黄酮可以抑制兔VX2肿瘤组织皮下移植瘤的生长，从而验证了大豆异黄酮的抗肿瘤作用。2．按50mg／kg／只／天的剂量在饲料中添加大豆异黄酮与长春瑞滨联合应用，具有协同抑制兔VX2肿瘤组织皮下移植瘤生长的作用。3．实验兔应用长春瑞滨干预后可能由于发生了血液毒性反应而导致肺部感染，继而使其体内出现过氧化损伤，抗氧化能力下降的现象。联合应用大豆异黄酮干预后可以改善上述实验动物体内的氧化-抗氧化失衡现象。4．本实验成功的建立了兔VX2肿瘤细胞肺移植瘤模型，操作后并发症少；动物生存时间适宜；肿瘤生长迅速；侵袭及远处转移能力强。但成功率未达到100％，需要进一步实验改进模型制备的方法。