颞叶癫痫大鼠海马神经元SOD、MDA和线粒体超微结构变化及丁苯酞作用

论文摘要

第一部分氯化锂—匹鲁卡品诱导的癫痫大鼠海马神经元SOD活力、MDA含量变化及丁苯酞的作用目的研究氯化锂—匹鲁卡品诱导的癫痫大鼠的行为学改变、海马神经元超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的变化,探讨癫痫发作时自由基的变化及丁苯酞对自由基的影响。方法雄性成年Wistar大鼠30只,随机分为丁苯酞(NBP)干预组、癫痫持续状态(SE)组,每组12只,每组再根据癫痫发作后3h、24h两个时间点,分为两个组,每小组6只,另外6只大鼠设为空白对照组。NBP组和SE组按传统方法建立氯化锂—匹鲁卡品颞叶癫痫模型。NBP组大鼠在腹腔注射匹鲁卡品前15分钟,给予丁苯酞80mg/Kg腹腔注射。对照组大鼠于腹腔注射匹鲁卡品前15分钟,给予等量生理盐水腹腔注射。观察各组大鼠的行为学变化,并分别取适量海马组织,应用化学比色法检测超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量。结果癫痫(SE)组大鼠达到Ⅳ级发作的时间平均为45.2±13min;NBP组大鼠达到Ⅳ级发作的时间平均为75.8±15.6min,其中有一只大鼠未出现痫性发作。癫痫组大鼠海马组织SOD活力在SE 3h后降低(112.52±10.16)U/mgprot,与对照组比较差异有显著性(P＜0.01);24h时有所升高(120.43±11.33)U/mgprot,但与对照组比较仍有显著差异(P＜0.05);MDA含量随着时间延长,含量逐渐增加,与对照组比较有显著性差异,3h时MDA含量(4.08±0.69)nmol/mgprot,P＜0.05,24h时MDA含量(5.24±1.55)nmol/mgprot,P＜0.01。NBP组在SE后3h、24h时,SOD活力分别是(128.20±8.78)U/mgprot和(133.25±13.77)U/mgprot;MDA含量分别是(3.50±0.12)nmol/mgprot和(3.94±0.89)nmol/mgprot,与对照组比较虽有差别,但没有显著性(P＞0.05)。结论癫痫发作可引起癫痫大鼠海马神经元的氧自由基产生增加,而使自由基清除剂的活性降低,造成神经元的损伤。丁苯酞能延长癫痫发作的潜伏期,通过升高SOD活力,降低MDA含量,增加机体的抗氧化作用,从而起到保护神经元的作用。第二部分氯化锂—匹鲁卡品诱导的癫痫大鼠海马神经元线粒体超微结构的改变及丁苯酞的作用目的研究氯化锂—匹罗卡品致痫大鼠模型海马线粒体超微结构的改变,探讨癫痫诱导的神经元损伤与线粒体的相互关系,及丁苯酞的保护作用。方法成年雄性Wistar大鼠30只,随机分为丁苯酞(NBP)干预组、癫痫持续状态(SE)组,每组12只,每组再根据癫痫发作后3h、24h两个时间点,再分为两个小组,每小组6只,另6只设为空白对照组。NBP组和SE组按传统方法建立氯化锂—匹鲁卡品颞叶癫痫模型。NBP组大鼠在腹腔注射匹鲁卡品前15分钟,给予丁苯酞80mg/Kg腹腔注射。对照组大鼠于腹腔注射匹鲁卡品前15分钟,给予等量生理盐水腹腔注射。应用光镜及电镜观察各组模型大鼠海马神经元线粒体超微结构的变化。结果(1)光镜下改变:癫痫发作后3h,NBP组和对照组CA3区和齿状回结构相似,癫痫组出现形态不完整,细胞肿胀、增生;24h时,癫痫组(Fig2.A)可见细胞肿胀、破裂,轮廓模糊、界限不清,排列紊乱,神经元数目明显减少,出现明显的变形、坏死;而NBP组(Fig2.B)出现神经元数目减少,结构肿胀。(2)电镜观察:电镜下癫痫组和NBP组神经元结构出现程度不同的损伤。癫痫组(Fig1.A)神经元胞质中线粒体变形、肿胀或双层单位膜断裂,大部分线粒体嵴缺失,基质空化并出现膜性小体,多个高尔基复合体囊泡肿胀,胞质中粗面内质网短小、稀少,又游离核糖体分布;NBP组(Fig1.B)神经元胞质中,线粒体结构尚完整,大部分线粒体双层单位膜和嵴的结构清晰,基质中少见膜性小体,部分神经元出现膜断裂和嵴的缺失,胞质中粗面内质网较癫痫组增多,游离核糖体丰富。结论氯化锂—匹罗卡品致痫大鼠模型海马神经元存在着线粒体超微结构的损伤,表明线粒体超微结构改变在癫痫发作诱导的神经元损伤中具有十分重要的作用。而通过丁苯酞对线粒体的保护作用,可有效减轻神经元的损伤,从而减轻癫痫发作后脑损伤的发生。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 符号说明
• 第一部分 氯化锂—匹鲁卡品诱导的癫痫大鼠海马神经元SOD活力、MDA含量变化及丁苯酞的作用
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 第二部分 氯化锂—匹鲁卡品诱导的癫痫大鼠海马神经元线粒体超微结构的改变及丁苯酞的作用
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图表
• 致谢
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