用实时定量PCR研究人类疱疹病毒5型和6型与口腔扁平苔藓发病的关系

论文摘要

目的与方法:人类疱疹病毒与口腔扁平苔藓（OLP）的关系一直没有定论。由于以前的研究发现,在活检组织样本中HHV-6和HCMV（二者均属人类疱疹病毒的β亚科）的检出率比其它疱疹病毒相对高,再加上OLP在临床上具有反复发作的特点,因此一些研究者猜想,人类疱疹病毒β亚科,特别是HHV-6和HCMV,或许与OLP的发病有关系,但缺乏统计学的支持。以前的这方面研究主要是采用传统的定性PCR的方法,虽然定性PCR直到现在仍被用于临床样本的检测,但它并不能准确地反映出阳性样本中病毒的活化和复制状况,这是定性PCR的局限性;另外,以前有关的研究在OLP样本的选择方面也存在着某些缺陷。为了进一步揭示HHV-6和HCMV与OLP的关系,本研究在以上两方面作了改进:①我们选用了实时定量（real-time） PCR的检测技术的Cycleave荧光法,其探针是由RNA和DNA杂交而成并在检测时还结合使用RNase-H,这种检测技术除了在底物扩增效率和检测准确性方面优于其它的定量PCR外,还具有高度的灵敏性;②我们有针对性地选择可能与病毒有关的病例,16例OLP患者的取样范围包括外周血白细胞、血浆、唾液、病损区脱落细胞、非病损区脱落细胞以及活检组织,并使用了10例健康人作组间对照,这样不但可以充分地利用定量PCR技术的优势,而且还使我们的研究更加符合统计学的要求。结果:在14名（14/16,87.5%）OLP患者的27个（27/85,31.76%）样本中以及在3名（3/10,30%）健康对照者的5个（5/40,12.5%）样本中检出了HCMV-DNA。在85个OLP样本中,27个样本HCMV阳性,其中6个样本为HCMV和HHV-6共同阳性,其余的1例HHV-6阳性在其它样本中单独检出;在40个健康对照的样本中,5个样本HCMV阳性,其中含有1例HHV-6阳性的样本,HHV-6仅检出1例。OLP组的样本各自携毒率依次为白细胞50%（8/16）、唾液25%（4/16）、活检组织80%（4/5）、病损区脱落细胞50%（8/16）、非病损区脱落细胞18.75%（3/16）;健康对照组则依次为白细胞30%（3/10）、唾液20%（2/10）、脱落细胞0%（0/10）。在所有的血浆样本中目的病毒均未检出。结论:本研究表明,HCMV与OLP的发病有关联（X2=6.8290,P<0.05,Pearson列联系数0.2080）;本研究还表明,OLP病损区的脱落细胞可能是一种比较好的用于研究病毒与疾病关系的实验材料,在减少来自血液中病毒的污染方面优于组织块。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料与方法
• （五） 结果与分析
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢