论文题目: 表达ILTV gB及gD主要抗原表位基因和鸡IgY重链恒定区基因重组鸡痘病毒免疫效力的研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 预防兽医学
作者: 刘文波
导师: 陈溥言
关键词: 传染性喉气管炎病毒,糖蛋白,糖蛋白,抗原表位基因,重组鸡痘病毒
文献来源: 南京农业大学
发表年度: 2005
论文摘要: 传染性喉气管炎(Infectious laryngotractheitis，ILT)是由传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起的鸡的一种急性上呼吸道传染病。该病分布于世界各地，被OIE列为B类传染病。上世纪60年代，我国也发现本病。此后，相继在许多省市流行，给我国养禽业造成了严重的经济损失。目前国内外主要使用弱毒疫苗预防本病，但它们都存在着疫苗株毒力偏强、潜伏感染、易于返祖以及疫苗株和野毒株无法鉴别的缺点，从而不利于ILT的根除。随着分子生物学的发展，利用基因工程疫苗预防ILT已成为人们的共识。禽痘病毒载体是继痘苗病毒以后发展起来的又一动物病毒载体。由于禽痘病毒具有宿主范围窄，可插入较大的外源基因，在动物体内能产生一过性感染，却能诱发保护性免疫应答，易于工业化生产等优点，使其从众多的活病毒载体中脱颖而出，成为当前重组病毒载体疫苗研究的热点，并且在人和许多动物重要传染病重组疫苗的研制中得到广泛应用。本研究利用鸡痘病毒弱毒疫苗株282 E4株为载体，构建了表达ILTV烟台株gB及gD主要抗原表位基因和鸡IgY重链恒定区基因的重组鸡痘病毒，并检测了其对鸡抵抗ILTV强毒株攻击的免疫保护作用。研究主要包括以下几个方面： 1．传染性喉气管炎病毒烟台株TK基因的序列测定及TK蛋白结构功能初步分析 根据传染性喉气管炎病毒(ILTV)美国632株TK基因序列设计并合成1对引物，以烟台分离株为模板扩增了TK基因并对其进行了序列测定。结果表明，该基因包括1个1089 bp的完整开放阅读框架，可编码363个氨基酸组成的多肽。核苷酸序列比较分析发现，不同ILTV毒株之间TK基因相对保守，但与其他疱疹病毒之间同源性则比较低。氨基酸序列分析还发现，尽管与其他疱疹病毒的TK蛋白同源性较低，但ILTV TK蛋白也具有疱疹病毒胸苷激酶催化结构域的保守氨基酸共有序列：-DGXXGXGK-(ATP结合结构域)和-DRH-(核苷酸结合结构域)，以及5个保守的Cys残基。这些Cys残基可能是通过形成二硫键来维持TK蛋白氨基酸的功能构象，使ATP结合结构域与核苷酸结合结构域在空间上相互重叠，并与底物靠近发生反应，从而发挥TK蛋白的功能。 2．传染性喉气管炎病毒烟台株gE基因的序列测定及gE蛋白结构功能初步分析 根据传染性喉气管炎病毒(ILTV)美国标准攻毒毒株gE基因序列设计并合成1对引物，以烟台株为模板，PCR法扩增出1条1.5 kb的gE基因片段，并将其克隆至
论文目录:
中文摘要
英文摘要
英文缩略词表
前言
第一篇 文献综述
第一章 传染性喉气管炎病及其研究进展
1 传染性喉气管炎病毒的历史及分类
2 传染性喉气管炎的流行病学及致病机理
3 传染性喉气管炎病毒的生物学进展
4 传染性喉气管炎病毒的分子生物学研究进展
5 传染性喉气管炎病的诊断
6 传染性喉气管炎基因工程疫苗的研究进展
7 展望
参考文献
第二章 应用禽痘病毒表达载体研制重组疫苗的研究进展
1 禽痘病毒的基本特性
2 重组禽痘病毒的构建
3 外源基因在重组禽痘病毒中的表达
4 禽痘病毒表达载体的优越性
5 重组禽痘病毒疫苗的应用前景
参考文献
第二篇 试验研究
第三章 传染性喉气管炎病毒烟台株TK基因的序列测定及TK蛋白结构功能初步分析
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
参考文献
英文摘要
第四章 传染性喉气管炎病毒烟台株gE基因的序列测定及gE蛋白结构功能初步分析
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
参考文献
英文摘要
第五章 目的片段的选取及重组鸡痘病毒转移载体pEF-gB-gD和pEF-gB-gD-IgY的构建
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
参考文献
英文摘要
第六章 目的片段在重组鸡痘病毒中的表达及其生物学特性的研究
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
参考文献
英文摘要
第七章 重组鸡痘病毒对SPF鸡的免疫保护作用
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
参考文献
英文摘要
全文总结
致谢
攻读博士学位期间发表论文
附录
Curriculum vitae
发布时间: 2006-10-20
参考文献
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