茶氨酸对咖啡碱引起的小鼠中枢兴奋的抑制作用

论文摘要

茶氨酸（N-乙基-γ-L-谷氨酰胺，Theanine）是茶叶中特有的氨基酸，不参与蛋白质的合成，以游离的形式存在，是茶树中含量最高的游离氨基酸，占茶叶干重的1%-2%，占游离氨基酸总量的50%以上，几乎所有的天然茶氨酸都从茶叶中提取。茶氨酸不仅影响着茶叶的滋味，而且还具有重要的生物活性，如保护神经、镇静安神、降血压、抗癌、增强抗肿瘤药物的疗效、抗疲劳、提高学习和记忆能力等。咖啡碱（1,3,7－三甲基－2,6－二氧嘌呤），属黄嘌呤生物碱，是茶叶中含量最多的生物碱，占茶叶干重的2%-4%。咖啡碱对人体有兴奋神经、利尿、解毒、助消化等生理作用，可用于治疗精神抑制状态症、神经衰弱等精神疾病，是世界上最常用的神经兴奋药，同时也是许多食品的重要添加剂。了解茶叶中的茶氨酸和咖啡碱在人体内的吸收利用度以及相互之间的拮抗作用是发掘其保健功效的基础。现有关于茶氨酸和咖啡碱拮抗作用的研究，主要手段是利用脑电图及脑电波完成的，这在药理学上是一个相对间接、模糊的指标,有必要寻找生理学、行为学等更加客观的指标来进一步确认茶氨酸和咖啡碱的拮抗作用。本文从动物行为学角度研究了茶氨酸的镇静作用，以及茶氨酸对咖啡碱所引起的小鼠中枢兴奋的拮抗作用,为茶氨酸等茶叶功能性成分在食品中应用，以及开发益智和缓解神经紧张功能食品提供更具体的理论依据。本文考察了饲喂茶氨酸后对小鼠自主活动（走动次数和举前肢数）等动物行为学指标的影响。以试验小鼠为研究对象，分别灌喂1mg/kg、3mg/kg、15mg/kg、30mg/kg、80mg/kg的茶氨酸溶液,连续7d，准确记录末次给药后30min、60min、90min、120min、150min、180min时小鼠的走动次数和举前肢次数。研究结果表明，茶氨酸能显著抑制小鼠的自主活动，且在服用1-15mg/kg茶氨酸范围内抑制作用呈现剂量效应。为了讨论茶氨酸对抗咖啡碱所致的小鼠中枢兴奋的抑制作用，本文以单独灌喂5mg/kg咖啡碱的小鼠为参照，比较了同时灌喂小鼠5mg/kg咖啡碱和不同剂量茶氨酸（1mg/kg、3mg/kg、15mg/kg、30mg/kg、80mg/kg）的小鼠动物行为学指标差异。连续灌喂7d药品后，准确记录末次给药后30min、60min、90min、120min、150min、180min时的小鼠走动次数和举前肢次数，研究结果表明咖啡碱能够提高小鼠的走动次数和举前肢数，茶氨酸的加入可以抑制咖啡碱所引起的小鼠中枢兴奋作用，并在一定浓度范围内呈现剂量效应。本文还分析了茶氨酸对小鼠血液中咖啡碱代谢的影响，以单独灌喂5mg/kg咖啡碱的小鼠为参照，比较了同时灌喂小鼠5mg/kg咖啡碱和不同剂量茶氨酸（1mg/kg、3mg/kg、15mg/kg、30mg/kg、80mg/kg）的小鼠血液中咖啡碱代谢情况。连续灌喂7d药品，末次用药结束后，在30min、60min、90min、120min、150min、180min时，从小鼠眼球取血0.2mL，测定小鼠血液样品中的咖啡碱含量。结果表明，茶氨酸能影响小鼠血液中咖啡碱的代谢，60min前能延缓咖啡碱进入血液，180min前能够延长咖啡碱在小鼠血液中的停留时间，且呈现明显的剂量效应。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 文献综述
• 1.1 前言
• 1.2 茶氨酸的分布
• 1.2.1 在茶树中的分布
• 1.2.2 在各类茶中的分布
• 1.3 茶氨酸的理化性质
• 1.4 茶氨酸在人体内的吸收与代谢
• 1.5 茶氨酸的生理作用
• 1.5.1 保护神经的作用
• 1.5.2 抗肿瘤作用
• 1.5.2.1 直接抗肿瘤作用
• 1.5.2.2 协助其他药物抗癌
• 1.5.3 镇静、松弛紧张神经的作用
• 1.5.4 降血压作用
• 1.5.5 增强学习和记忆能力
• 1.5.6 其他生理作用
• 1.6 茶氨酸的制备
• 1.6.1 植物组织 （细胞 ） 培养法
• 1.6.2 化学合成法
• 1.6.3 微生物发酵法
• 1.6.4 从茶叶中提取纯化茶氨酸
• 1.7 茶氨酸的应用前景
• 1.8 咖啡碱的性质以及生理功能
• 1.8.1 使中枢神经系统兴奋的作用
• 1.8.2 强心、松弛平滑肌、影响呼吸的作用
• 1.8.3 助消化、醒酒作用
• 1.8.4 咖啡碱的其他作用
• 1.9 咖啡碱的制备技术以及测定方法
• 1.10 茶氨酸作为镇静类药物的优越性
• 1.10.1 茶氨酸易溶解有较高的生物利用率
• 1.10.2 茶氨酸无毒性
• 2 引言
• 2.1 研究目的及意义
• 2.2 研究内容
• 3 材料与方法
• 3.1 材料与试剂
• 3.2 主要仪器
• 3.3 方法
• 3.3.1 昆明种小鼠的饲养、灌喂、取血、处死方法
• 3.3.1.1 昆明种小鼠的饲养方法
• 3.3.1.2 昆明种小鼠的灌喂方法
• 3.3.1.3 昆明种小鼠的取血方法
• 3.3.2 样品制备
• 3.3.2.1 茶氨酸、咖啡碱浓度的确定
• 3.2.2.2 茶氨酸、咖啡碱溶液的制备
• 3.3.3 茶氨酸对小鼠的镇静作用
• 3.3.4 茶氨酸对抗咖啡碱所致的小鼠中枢兴奋作用
• 3.3.5 茶氨酸对小鼠血液中咖啡碱代谢的影响
• 3.3.6 血液样品的处理
• 3.3.7 样品的 HP LC 分析方法
• 3.3.7.1 咖啡碱标准液的配制
• 3.3.7.2 色谱条件
• 3.3.7.3 标准曲线的绘制
• 3.3.8 统计分析
• 4 结果与分析
• 4.1 服用不同剂量的茶氨酸对小鼠自主活动的影响
• 4.2 服用不同剂量的茶氨酸对咖啡碱所致的小鼠中枢兴奋抑制作用
• 4.3 小鼠血液中咖啡碱含量检测方法
• 4.4 服用不同剂量的茶氨酸对小鼠血液中咖啡碱浓度的影响
• 5 讨论
• 5.1 茶氨酸对小鼠自主活动影响的探讨
• 5.2 茶氨酸拮抗咖啡碱引起的小鼠中枢兴奋作用的探讨
• 6 结论
• 6.1 茶氨酸对小鼠中枢神经的影响
• 6.2 茶氨酸对抗咖啡碱所致的小鼠中枢兴奋作用
• 6.3 茶氨酸对小鼠血液中咖啡碱代谢的影响
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介