聚丙烯酰胺水凝胶中丙烯酰胺单体的提取及高效液相色谱测定

论文摘要

目的:为了检测用于软组织填充的聚丙烯酰胺水凝胶（Polyacrylamide Gel,PAMG）中丙烯酰胺（acrylamide,AM）单体的含量,建立一种快速、简单、有效的丙烯酰胺单体提取及高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography,HPLC）分析方法。并对植入人体前、后的聚丙烯酰胺酰胺水凝胶进行丙烯酰胺单体的提取及检测。方法:比较超声辅助甲醇萃取法、水浸泡萃取法和加速溶剂萃取法（accelerated solvent extraction,ASE）三种聚丙烯酰胺水凝胶样品前处理方法的优劣。采用水浸泡萃取法对聚丙烯酰胺水凝胶进行样品前处理,0.45μm的PVDF膜过滤,依次通过Oasis HLB固相萃取柱和Bond Elut-Accucat固相萃取柱净化,收集最终的提取液进行HPLC分析。结果:超声辅助甲醇萃取法的加标回收率为44.270.0%,水浸泡萃取法的加标回收率为87.894.9%,ASE法的加标回收率为36.264.2%。色谱条件为Angilent TC-C18色谱柱,流动相为100%水,流速为1mL/min。丙烯酰胺色谱图峰面积与丙烯酰胺标准溶液浓度在0.05100μg/mL之间呈线性关系（R2=0.9997）,最小检出限与最小定量限分别为0.05μg/mL和0.15μg/mL。对3个不同浓度的丙烯酰胺标准溶液的测定结果显示RSD值为2.4%4.7%,日内和日间RSD值分别为5.6%（n=6）和6.7%（n=8）。对未植入人体的聚丙烯酰胺水凝胶检测结果为0.20.8μg/mL,对从人体中抽出的聚丙烯酰胺水凝胶的检测结果均低于最小检测限。结论:水浸泡萃取法是一种简单、有效的样品前处理方法。根据聚丙烯酰胺水凝胶的特性及丙烯酰胺在水中溶解度最大,过量的水使聚丙烯酰胺水凝胶达到完全的溶胀状态,丙烯酰胺单体则在水凝胶内、外水中达到平衡,通过测定提取液中丙烯酰胺的含量间接得出聚丙烯酰胺水凝胶中丙烯酰胺单体的含量,通过对检测基质的替换,不但极大地简化了样品处理过程,而且加标回收率实验也获得了满意结果。采用高效液相色谱对聚丙烯酰胺水凝胶中的丙烯酰胺进行检测是一种简便、高效、快速、经济的方法。对植入与未植入人体的聚丙烯酰胺水凝胶分析结果提示,植入人体的聚丙烯酰胺水凝胶在人体内未在短时间内大量降解及局部蓄积,且丙烯酰胺含量低于植入前水平,可能因为聚丙烯酰胺水凝胶中的水份在人体组织复杂的生物环境中与体液进行交换,丙烯酰胺自由扩散,被组织吸收、代谢使之含量减少。对于临床出现的多种并发症,可能不是残留单体单独作用的原因,可能有其他未知因素发挥作用。因此,对于其可能含有的其他化学成分,以及水凝胶大分子结构的微观变化及其长期的变化仍需进一步探讨。由于对从人体中抽出的聚丙烯酰胺水凝胶的检测结构均低于最小检出限,所以有待于建立对更低浓度丙烯酰胺的检测方法。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言和文献回顾
• 1 聚丙烯酰胺的化学特性及应用
• 2 聚丙烯酰胺水凝胶在整形外科中的应用及出现的并发症
• 3 液相色谱分析样品前处理技术
• 4 高效液相色谱对丙烯酰胺的检测
• 正文
• 实验一 聚丙烯酰胺水凝胶中丙烯酰胺单体的提取与净化
• 1 试剂与仪器
• 2 实验方法
• 3 结果与讨论
• 实验二 聚丙烯酰胺水凝胶中丙烯酰胺的 HPLC 检测
• 1 仪器与设备
• 2 实验方法
• 3 结果与讨论
• 小结
• 参考文献
• 个人简历和研究成果
• 致谢