论文摘要
分析化学的飞速发展使得分析化学突破了单一学科的领域，由分析化学变为分析科学，涵盖了化学与数学、物理学、计算机科学、生物学等一系列学科，发展成为一门多学科性的综合学科，而分析化学的发展方向之一是提高分析方法的灵敏度和选择性，之二是大力向生命科学领域拓展发展空间。喹诺酮类药物是一类较新的合成抗菌药且新药不断涌现，目前在临床上的应用日益广泛，建立高灵敏高选择性药物分子的检测方法势在必行。核酸、蛋白质等生物大分子的定量分析是生物体液测定和遗传诊断的参数，是生命科学、化学等诸多学科中最活跃的领域之一。随着药学和生命科学的不断发展，人们对药物和生物大分子分析测定的要求越来越高，因此必须运用和发展更适当的分析方法来满足要求。荧光光度法由于具有灵敏度高、选择性好、简便等优卢在药物和生物大分子分析中得到广泛应用。本论文主要以荧光光度法为研究手段，在喹诺酮类药物和生物大分子测定方法开发方面做了以下工作：第一部分喹诺酮类药物的荷移光谱法研究（1）以吸光光度法为手段，研究了电子给体依诺沙星（enoxacin，ENX）与电子受体茜素红（alizarin red，AR）之间的电荷转移反应，确定了反应的最佳条件。实验结果表明：依诺沙星与茜素红在水溶液中室温下即可生成稳定的1∶2型络合物，络合物的λmax=524nm，依诺沙星浓度在0～20mg／L范围内符合比尔定律，用拟定方法测定药物制剂中依诺沙星的含量，结果与标示量一致，其回收率为99.4～100.5％。（2）以荧光光度法为手段，研究了加替沙星（GFLX）与电子受体四氯对苯醌（TCBQ）之间的荷移反应，建立了灵敏度高、选择性好的测定加替沙星新方法。用于药物制剂中GFLX的含量测定，与吸光光度法对照，取得了一致的结果。同时建立了测定尿样中GFLX的荷移—同步荧光光谱法，有效避开了尿样基体对药物的干扰，成功的直接测定了尿液中的GFLX，结果与文献值一致。第二部分生物大分子的分析方法研究（1）以共振瑞利散射（RRS）技术为手段，研究了Fe3+与脱氧核糖核酸（DNA）的光谱特性和反应的适宜条件，探讨了光谱增敏机理和两者之间的相互作用力。建立了一种简便、快速测定DNA的新方法。方法用于合成样品中痕量DNA的测定，回收率：在93.3％～100.9％。与染料散射法相比具有线性范围宽、检出限低等特点。（2）以共振瑞利散射技术为手段，研究了在非离子表面活性剂吐温-20存在下甲基蓝与蛋白质作用形成的离子缔合物的光谱特征、影响因素和适宜的反应条件，探讨了光谱增敏机理和两者之间的相互作用力。并建立了测定蛋白质的新方法，方法用于合成样品中蛋白质含量的测定，结果满意，用于牛血清样品中蛋白质含量的测定，结果与经典的考马斯亮蓝法一致。（3）用荧光光谱法研究了多西环素（DC）与β-环糊精（β-CD）包结形成的超分子络合物与牛血清白蛋白之间的相互作用。结果表明pH10.9的NH3-NH4Cl介质中β-环糊精与多西环素生成1∶1的包结物，并使多西环素的荧光增强，在此二元包结体系中加入牛血清白蛋白（BSA）后体系的荧光强度进一步显著增强，据此首次建立了以包结物为荧光探针测定牛血清白蛋白的新方法，方法用于合成样品中牛血清白蛋白的测定，回收率为99.0％～103.9％。