西施舌三倍体诱导研究

论文摘要

本文以我国海产经济贝类-西施舌（Coelomactra antiquata）为研究对象,利用冷休克、热休克和6-DMAP通过抑制受精卵第二极体的释放获得三倍体。首次报道了西施舌三倍体诱导结果,并采用适宜诱导参数获得了西施舌三倍体幼贝,并对其生长和营养成分进行了研究。 分别采用热休克、冷休克和6-DMAP通过抑制受精卵第二极体的释放获得三倍体。结果表明:在50%的受精卵出现第一极体时,用7℃的低温,对受精卵持续处理20min,三倍体率为12.34%:在50%的受精卵出现第一极体时,用34℃的高温,对受精卵持续处理15min,三倍体率为24.3%:用200μmol/L的6-DMAP在50%的受精卵出现第一极体时,对受精卵持续处理15min,三倍体率为48.28%。通过对三种方法的效果进行比较,确定西施舌三倍体诱导的适宜方案为:获得充分成熟的卵子,使用浓度为200μmol/L的6-DMAP,在50%受精卵出现第一极体时,对受精卵持续处理15min。 使用浓度为200μmol/L的6-DMAP,在50%受精卵出现第一极体时,对受精卵持续处理15min,三倍体率为47.89%。并对同期培育的西施舌三倍体和二倍体幼虫和稚、幼贝的生长以及幼贝营养成分进行研究,结果表明:幼虫期三倍体群体和二倍体群体的生长速率差异不显著;稚、幼贝阶段,三倍体群体表现出明显的生长优势。 养殖119大后,对西施舌三倍体、二倍体养殖群体和二倍体野生群体的粗蛋白、粗脂肪和氨基酸含量进行测定,结果显示:西施舌野生群体的粗蛋白含量和粗脂肪含量均高于二倍体养殖群体和三倍体。但三倍体的粗蛋白含量高于二倍体养殖群体,而西施舌三倍体的粗脂肪含量低于二倍体养殖群体。在总氨基酸含量、必需氨基酸含量和使贝类具有鲜味和甘味的六种氨基酸含量方面,西施舌三倍体均高于二倍体养殖群体。本研究对于西施舌营养成分的分析,为西施舌的人工配合饵料的配比提供了科学依据。

论文目录

• 内容提要
• Abstract
• 第一部分 文献综述
• 1.1 前言
• 1.2 贝类多倍体遗传育种研究进展
• 1.3 贝类多倍体遗传育种的细胞学机理
• 1.4 贝类多倍体的染色体组操作方法
• 1.4.1 化学诱导剂
• 1.4.2 物理方法
• 1.4.3 生物方法
• 1.4.4 染色体的观察及倍性的分析
• 1.5 贝类多倍体的制备方法
• 1.5.1 三倍体育种
• 1.5.2 四倍体育种
• 1.6 贝类多倍体的生物学特性
• 1.6.1 多倍体贝类的存活能力
• 1.6.2 多倍体贝类的生长
• 1.6.3 多倍体贝类的性腺发育和繁殖潜力
• 1.6.4 三倍体贝类的性比
• 1.6.5 三倍体贝类的抗逆性
• 1.6.6 三倍体的生理生化指标
• 第二部分 西施舌三倍体最佳诱导方法的选择
• 1.材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 亲贝来源
• 1.1.2 实验器材
• 1.1.3 实验药品
• 1.2 方法
• 1.2.1 精卵获取及受精
• 1.2.2 诱导方法
• 1.2.3 受精卵的孵化及幼虫的培育
• 1.2.4 倍性检查
• 1.2.5 染色体制备
• 1.2.6 相关参数计算方法
• 2.结果与分析
• 2.1 在20℃—22℃下西施舌受精卵极体出现的时间
• 2.2 冷休克诱导西施舌三倍体结果
• 2.2.1 冷休克诱导后幼虫发育过程中显微观察结果
• 2.2.2 冷休克诱导西施舌三倍体结果
• 2.2.3 诱导温度与三倍体倍化率
• 2.2.4 诱导温度与面盘幼虫相对孵化率之间的相关关系
• 2.2.5 三倍体率与面盘幼虫相对孵化率之间的关系
• 2.3 热休克诱导西施舌三倍体结果
• 2.3.1 热休克诱导后幼虫发育过程中显微观察结果
• 2.3.2 热休克诱导西施舌三倍体结果
• 2.3.3 诱导温度与三倍体率
• 2.3.4 诱导温度与面盘幼虫相对孵化率之间的相关关系
• 2.3.5 三倍体率与面盘幼虫相对孵化率之间的关系
• 2.4 6-DMAP诱导西施舌三倍体结果
• 2.4.1 6-DMAP诱导后幼虫发育过程中显微观察结果
• 2.4.2 6-DMAP诱导西施舌三倍体结果
• 2.4.3 6-DMAP浓度与西施舌三倍体倍化率的关系
• 2.4.4 6-DMAP浓度与西施舌面盘幼虫相对孵化率的关系
• 2.4.5 6-DMAP诱导时三倍体率与面盘幼虫相对孵化率的关系
• 3.讨论
• 3.1 倍性检测方法
• 3.2 诱导温度、诱导的起始时间和处理强度的选择
• 3.3 诱导温度对三倍体倍化率和面盘幼虫相对孵化率的影响
• 3.4 温度诱导时胚胎孵化率与三倍体率的关系
• 3.5 6-DMAP的作用机理
• 3.6 6-DMAP各诱导参数确定
• 3.7 药物浓度对西施舌三倍体率和胚胎孵化率的影响
• 3.8 三种方法诱导西施舌三倍体结果的综合比较
• 3.9 三种诱导方法应用效果的比较
• 3.10 存在的问题和展望
• 第三部分 西施舌三倍体幼体早期生长研究
• 1 材料和方法
• 1.1 西施舌三倍体群的获得
• 1.2 受精卵的孵化、幼虫的培育及稚、幼贝的饲养管理
• 1.3 倍性检查
• 1.4 生长的测定
• 2、结果
• 2.1 西施舌三倍体的诱导结果
• 2.2 西施舌幼虫期的生长比较
• 2.3 西施舌稚、幼贝期生长比较
• 3、讨论
• 3.1 三倍体群体的生长效果
• 3.2 展望
• 第四部分 西施舌三倍体幼体营养成分初步研究
• 1 材料和方法
• 1.1 西施舌三倍体群的获得
• 1.2 受精卵的孵化、幼虫的培育及稚、幼贝的饲养管理
• 1.3 倍性检查
• 1.4 生化测定准备
• 1.5 水分测定
• 1.6 蛋白质含量的测定
• 1.7 氨基酸含量的测定
• 1.8 粗脂肪含量的测定
• 2、结果
• 2.1 西施舌三倍体和二倍体养殖群体幼贝营养成分比较
• 2.2 西施舌三倍体和二倍体养殖群体幼贝氨基酸成分比较
• 2.3 西施舌野生群体的营养成分分析
• 3、讨论
• 3.1 西施舌营养分析
• 3.2 西施舌三倍体与二倍体养殖群体的营养分析
• 参考文献
• 中文摘要
• 致谢